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巨噬细胞脱壁方法# Biology - 生物学
s*y
1
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
标 题: 问个问题:什么是translational research?
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 10 17:47:45 2014, 美东)
一直听到这个词,但是一直不明白什么才是translational research,以及和clinical
study 到底有什么区别。
听过几个讲座,都是研究如何给药以及什么时候给药最有效这种话题,感觉就是一个规
模稍微小的一点clinical study。
谁能来说一下?到底什么样的研究模式才算是translational research?难道要我们去
给病人打针这样才算么?
我对这个话题很好奇但是一直觉得云里雾里的。
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a*g
2
小鼠腹腔取得的巨噬细胞,放在tissue culture plate上刺激20h左右后,要用来做流
式。使用3mM EDTA和10mM glucose的buffer在37度放上15分钟后,细胞依然很少脱落。
大家有没什么好办法?谢谢
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A*8
3
我觉得translational应该是介于basic research和clinical之间的,用于bridge这个
gap的,就是研究怎么把科研成果应用到医学上。

clinical

【在 s******y 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
: 发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
: 标 题: 问个问题:什么是translational research?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 10 17:47:45 2014, 美东)
: 一直听到这个词,但是一直不明白什么才是translational research,以及和clinical
: study 到底有什么区别。
: 听过几个讲座,都是研究如何给药以及什么时候给药最有效这种话题,感觉就是一个规
: 模稍微小的一点clinical study。
: 谁能来说一下?到底什么样的研究模式才算是translational research?难道要我们去
: 给病人打针这样才算么?

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o*d
4
一般来说5mM的EDTA就可以搞定。
还有一种土办法:用注射器(10mL DMEM 无血清)附上25G(或更细)的针头,用力将
mf冲下来,这个要求手劲要大。如果还有很多粘附的,就再来一次,注意要换新的DMEM

做flow不需要太多细胞吧,不行的话换Trypsin也可以,反正你也不会再继续培养了。

【在 a*******g 的大作中提到】
: 小鼠腹腔取得的巨噬细胞,放在tissue culture plate上刺激20h左右后,要用来做流
: 式。使用3mM EDTA和10mM glucose的buffer在37度放上15分钟后,细胞依然很少脱落。
: 大家有没什么好办法?谢谢

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b*1
5
胖老师,从药物研发的角度讲。如果你只用细胞,甚至xenograft,别人都不承认这是
translational research. 可是,你要是也用病人肿瘤样品在裸鼠中生成肿瘤,然后测
试疗效,这就有些所谓translational research的味道了,大家比较买帐。可是肿瘤活
样品很难拿到,这种双knock out的老鼠巨贵无比,好说不好干啊。

clinical

【在 s******y 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
: 发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
: 标 题: 问个问题:什么是translational research?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 10 17:47:45 2014, 美东)
: 一直听到这个词,但是一直不明白什么才是translational research,以及和clinical
: study 到底有什么区别。
: 听过几个讲座,都是研究如何给药以及什么时候给药最有效这种话题,感觉就是一个规
: 模稍微小的一点clinical study。
: 谁能来说一下?到底什么样的研究模式才算是translational research?难道要我们去
: 给病人打针这样才算么?

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m*u
6
try ice cold PBS.

【在 a*******g 的大作中提到】
: 小鼠腹腔取得的巨噬细胞,放在tissue culture plate上刺激20h左右后,要用来做流
: 式。使用3mM EDTA和10mM glucose的buffer在37度放上15分钟后,细胞依然很少脱落。
: 大家有没什么好办法?谢谢

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x*e
7
比如说研究CRISPR
细菌免疫听起来很没吸引力,不过genome editing就可以转化到临床上去了

clinical

【在 s******y 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
: 发信人: sunnyday (胖头鱼。按斤卖就赚了), 信区: Biology
: 标 题: 问个问题:什么是translational research?
: 发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 10 17:47:45 2014, 美东)
: 一直听到这个词,但是一直不明白什么才是translational research,以及和clinical
: study 到底有什么区别。
: 听过几个讲座,都是研究如何给药以及什么时候给药最有效这种话题,感觉就是一个规
: 模稍微小的一点clinical study。
: 谁能来说一下?到底什么样的研究模式才算是translational research?难道要我们去
: 给病人打针这样才算么?

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a*g
8
试了ice cold PBS,细胞也是岿然不动。trypsin有说会消化掉细胞表面抗原,大家做
macrophage会用trypsin、EDTA一起来消化脱壁吗?
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s*y
9
哦,有道理!

【在 b*********1 的大作中提到】
: 胖老师,从药物研发的角度讲。如果你只用细胞,甚至xenograft,别人都不承认这是
: translational research. 可是,你要是也用病人肿瘤样品在裸鼠中生成肿瘤,然后测
: 试疗效,这就有些所谓translational research的味道了,大家比较买帐。可是肿瘤活
: 样品很难拿到,这种双knock out的老鼠巨贵无比,好说不好干啊。
:
: clinical

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p*e
10
试一试3mM EDTA in Cold PBS,用枪使劲吹。

【在 a*******g 的大作中提到】
: 试了ice cold PBS,细胞也是岿然不动。trypsin有说会消化掉细胞表面抗原,大家做
: macrophage会用trypsin、EDTA一起来消化脱壁吗?

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d*8
12
让flask坐冰上两小时,然后用iced PBS吹。
操,我怎么把这秘籍给漏出来了。
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i*r
13
translational research 到底怎么样啊?
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