v*a
2 楼
想在细胞中超量表达一个蛋白,在克隆过程中试过在这个蛋白的open reading frame头
尾设计引物,可是都没有成功的,感觉是引物设计得不好。后来就选了5'和3'的UTR区
域设计引物(离start codon和stop codon都有比较远的一段距离)。请问这样的引物可
以吗?会不会对蛋白表达产生什么影响?谢谢!
尾设计引物,可是都没有成功的,感觉是引物设计得不好。后来就选了5'和3'的UTR区
域设计引物(离start codon和stop codon都有比较远的一段距离)。请问这样的引物可
以吗?会不会对蛋白表达产生什么影响?谢谢!
c*7
3 楼
可以,容易。ebay上有卖unlock code。这里二手也有人卖。
j*x
5 楼
很多时候5'/3'UTR区域中包含调控序列,对蛋白表达究竟会产生什么影响很难预测。
如果用5'/3'UTR区域的引物能成功扩增,那就先克隆到载体中再用ORF头尾引物再扩增
一次(或者直接nested PCR),不费多少事,但是能省后面很多不必要的麻烦。
如果用5'/3'UTR区域的引物能成功扩增,那就先克隆到载体中再用ORF头尾引物再扩增
一次(或者直接nested PCR),不费多少事,但是能省后面很多不必要的麻烦。
相关阅读
现在做western谁还用自己做的胶?实验室的manager老是护着另外一个学生博士后选择,请提意见,勿拍,谢谢现在做microRNA的有哪些大牛?你一天工作几小时?在生物公司混, 能比博后多多少?google translate有趣请推荐protein buffer exchange column聊聊积极的为人处世态度where to buy E. coli gene library制备果蝇的抗体的问题关于生物专业: 再随便瞎聊几句取消破四刀面试合适吗问一下做结构的一个问题请问转H4B大概什么手续,多少时间?What Will Be the Hot Jobs of 2018? (转载)请推荐物美价廉的12-channel pipet文章面临被抢走,斗争还是妥协?求作农杆菌感受态细胞的经验打听一下Washington Univ-St. Louis的Richard W. Gross