F*4
2 楼
本人F1学生,5月20-23要随老板去台湾开会。得到开会通知之前打算回国休假一个月,
并已订好机票,4月22回国,5月26返美。所以现在的计划是我按原计划回国,在国内办
理入台证,然后买国内到台湾的往返机票,最后再从国内返美。不知道这个行程可不可
行,我是以美国学校学生的身份去开会,台湾的邀请函也是发到美国,所以想请教一下
我是否可以以美国学生的身份在国内办理入台证。如果入台证能够办下来,是否就能保
证一定可以出入台湾,会不会在海关因为某些原因而禁止入境。
如果以上计划不可行,我就要考虑改变回国计划,从美国出发去台湾。
谢谢!
并已订好机票,4月22回国,5月26返美。所以现在的计划是我按原计划回国,在国内办
理入台证,然后买国内到台湾的往返机票,最后再从国内返美。不知道这个行程可不可
行,我是以美国学校学生的身份去开会,台湾的邀请函也是发到美国,所以想请教一下
我是否可以以美国学生的身份在国内办理入台证。如果入台证能够办下来,是否就能保
证一定可以出入台湾,会不会在海关因为某些原因而禁止入境。
如果以上计划不可行,我就要考虑改变回国计划,从美国出发去台湾。
谢谢!
w*o
3 楼
【 以下文字转载自 Boston 讨论区 】
发信人: wokaowokao (GaN), 信区: Boston
标 题: 公司同事过生日,搞party,送什么好呢
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jul 30 15:15:23 2011, 美东)
同事,男,30来岁,单身,老美
大家说说送啥好
发信人: wokaowokao (GaN), 信区: Boston
标 题: 公司同事过生日,搞party,送什么好呢
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Jul 30 15:15:23 2011, 美东)
同事,男,30来岁,单身,老美
大家说说送啥好
s*m
4 楼
呵呵
n*e
5 楼
(1)韭菜地里长了青苔,是啥原因?该怎么去除?刚割了一茬韭菜,还没有施肥料。是
先除青苔还是先施肥?
(2)中国店买的青江菜种子,现在大概长到5到10cm高了。但是发现很多开始开花了,是
品种原因还是怎么的?
(3)油菜开始是撒的种子,很密。现在也到5cm高了,可以移植吧?移植会伤的利害吗?
主要是很密,根估计都挨着。
谢谢
先除青苔还是先施肥?
(2)中国店买的青江菜种子,现在大概长到5到10cm高了。但是发现很多开始开花了,是
品种原因还是怎么的?
(3)油菜开始是撒的种子,很密。现在也到5cm高了,可以移植吧?移植会伤的利害吗?
主要是很密,根估计都挨着。
谢谢
s*d
6 楼
我昨天把键盘上的键拆下来洗,结果A键掉进下水道了。有谁做做好人,寄个A键给我啊?
愿意出钱购买。
愿意出钱购买。
x*8
7 楼
本人比较菜,作GV3101的电转感受态细胞。懒,先过夜小培养5ml LB,在第二日下午扩
大培养又过夜,第三天早上开始作感受态,没有测od值。用10%甘油洗3次,最后重悬。
结果用一质粒验证,电转2kv,25UF,200欧密嘎,4.4ms电击时间。最后发现一个转化
子都没有。不知问题在哪?大家都是怎么作的啊?求指点,谢谢。
大培养又过夜,第三天早上开始作感受态,没有测od值。用10%甘油洗3次,最后重悬。
结果用一质粒验证,电转2kv,25UF,200欧密嘎,4.4ms电击时间。最后发现一个转化
子都没有。不知问题在哪?大家都是怎么作的啊?求指点,谢谢。
M*s
8 楼
和做饭差不多。
很多人都会作,水平有些差别而已。
还要看时间是否值得。
很多人都会作,水平有些差别而已。
还要看时间是否值得。
i*i
9 楼
关注下,没参加过,关键是没被邀请过,嘿嘿
x*8
13 楼
顶
i*a
15 楼
Group gift
otherwise gift card.
otherwise gift card.
R*s
16 楼
请去wbcenter申请提高上限到50,像这个贴
http://www.mitbbs.com/article_t/WBCenter/12526405.html
【在 s*****m 的大作中提到】
: 呵呵
http://www.mitbbs.com/article_t/WBCenter/12526405.html
【在 s*****m 的大作中提到】
: 呵呵
n*e
17 楼
韭菜根还在地里,怎么翻土啊?可以加石灰改善吗?
g*4
19 楼
靠,现代人!
c*6
22 楼
财主啊!排包子
a*o
25 楼
脓杆菌电转感受态很简单,过夜的菌液,很浓,不需在意OD,用冷水洗5遍,(10%甘油
洗一下),10%甘油重悬。10毫升菌液可以最后重悬在500ul里。电转2.5kv, 400欧,~
7ms. 加1ml培养基,复苏2小时。对于质粒转化,涂1ul就可以得到很多colony.
【在 x******8 的大作中提到】
: 本人比较菜,作GV3101的电转感受态细胞。懒,先过夜小培养5ml LB,在第二日下午扩
: 大培养又过夜,第三天早上开始作感受态,没有测od值。用10%甘油洗3次,最后重悬。
: 结果用一质粒验证,电转2kv,25UF,200欧密嘎,4.4ms电击时间。最后发现一个转化
: 子都没有。不知问题在哪?大家都是怎么作的啊?求指点,谢谢。
洗一下),10%甘油重悬。10毫升菌液可以最后重悬在500ul里。电转2.5kv, 400欧,~
7ms. 加1ml培养基,复苏2小时。对于质粒转化,涂1ul就可以得到很多colony.
【在 x******8 的大作中提到】
: 本人比较菜,作GV3101的电转感受态细胞。懒,先过夜小培养5ml LB,在第二日下午扩
: 大培养又过夜,第三天早上开始作感受态,没有测od值。用10%甘油洗3次,最后重悬。
: 结果用一质粒验证,电转2kv,25UF,200欧密嘎,4.4ms电击时间。最后发现一个转化
: 子都没有。不知问题在哪?大家都是怎么作的啊?求指点,谢谢。
m*y
28 楼
http://www.mitbbs.com/article_t1/EB23/31356219_0_48.html
发信人: myhoney (dear), 信区: EB23
标 题: Re: 普天同庆,发包子
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 12 01:03:51 2011, 美东)
发信人: myhoney (dear), 信区: EB23
标 题: Re: 普天同庆,发包子
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 12 01:03:51 2011, 美东)
J*n
31 楼
被你电死了吧,转农杆菌超简单
l*e
33 楼
GX
I*9
35 楼
我这个傻逼dell键盘连个没用的键都找不到
用的最少的是insert...
用的最少的是insert...
h*e
36 楼
>20kb的质粒是不是很难转进去啊? 还有大家是怎么鉴定的?我每次都用酶切,不好判
断,因为本身都有农杆菌本身就自带质粒。谢谢
断,因为本身都有农杆菌本身就自带质粒。谢谢
s*e
37 楼
gongxi
x*8
39 楼
thank you guys! I feel shameful about myself after reading your notes.:)
Anyway, how about the quality of plasmid? Is there some special requirement
for it?
Anyway, how about the quality of plasmid? Is there some special requirement
for it?
x*8
42 楼
And,
1. how about the difference between different isolates, e.g. LBA4404 or
GV3101 etc.?
2. Can I use the isolate that is grown on LB plate and put in 4 degrees for
2 weeks?
3. Do I need add some antibiotics, such as rafimycin or gentamycin for
GV3101 when I prepare overnight culture?
Thanks a lot.
1. how about the difference between different isolates, e.g. LBA4404 or
GV3101 etc.?
2. Can I use the isolate that is grown on LB plate and put in 4 degrees for
2 weeks?
3. Do I need add some antibiotics, such as rafimycin or gentamycin for
GV3101 when I prepare overnight culture?
Thanks a lot.
r*r
43 楼
???
i*e
44 楼
油菜快吃!!!!
我家阿姨种错了,结果10cm 开花。
夏菜增加: 木耳菜,南瓜秧子,枸杞菜
我家阿姨种错了,结果10cm 开花。
夏菜增加: 木耳菜,南瓜秧子,枸杞菜
z*0
46 楼
GX
c*7
51 楼
难道我最土么?我咋记得OD一定要测,很关键
H*S
52 楼
pai
x*8
53 楼
化学感受态成功了,呵呵
o*x
54 楼
gx
x*8
55 楼
自己上来更新下。
我重新设置了对照,使用了一个小的质粒7k左右,验证我的感受态细胞是没有问题的,
效率还可以;但是我的目的质粒是11k多点,这样的话,就很难转进去了。同一批次的
感受态,转对照没有任何问题,也就是大家说的'转农杆菌很容易‘的说法。但是我的
大质粒是很难转进去,即使转了有几个克隆长出来,效率是很低了。大家展开说说转大
质粒有什么方法吗?楼上的一个说转20k的,你作的如何?
我重新设置了对照,使用了一个小的质粒7k左右,验证我的感受态细胞是没有问题的,
效率还可以;但是我的目的质粒是11k多点,这样的话,就很难转进去了。同一批次的
感受态,转对照没有任何问题,也就是大家说的'转农杆菌很容易‘的说法。但是我的
大质粒是很难转进去,即使转了有几个克隆长出来,效率是很低了。大家展开说说转大
质粒有什么方法吗?楼上的一个说转20k的,你作的如何?
o*y
56 楼
等
h*e
57 楼
>20k的效率很低,长很多的克隆有可能不对
反正我转的都不怎么好 不好验证对不对
反正我转的都不怎么好 不好验证对不对
w*4
58 楼
pai baozi
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