求教：用total mRNA 做in vitro translation然后Western检测# Biology - 生物学
p*w
1 楼
处女zz
一姑娘网上征婚，写道：本人80后，貌美，身高165，处女。。。
我看到感动的差点流涕，回复：不容易啊，80后还是处女，好姑娘。
一会儿姑娘回复：你丫真土。。。我说的是指星座
一姑娘网上征婚，写道：本人80后，貌美，身高165，处女。。。
我看到感动的差点流涕，回复：不容易啊，80后还是处女，好姑娘。
一会儿姑娘回复：你丫真土。。。我说的是指星座
l*t
2 楼
板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
f*e
3 楼
求教：
手里研究的A蛋白影响了B蛋白的蛋白水平，但不影响mrna水平，本想做降解的，MG132
虽然可以恢复一部分，但是就是内源性降解曲线（CHX）没有明显差异。现在想要不要
转向翻译水平，但是没有full length 的mrna，只有coding区，因为也不知道是否在非
编码区的调控，所以单独试coding区意义不大。
所以如下假设，不知道有没有可能。
先将原核表达纯化的蛋白（如GST和GST-A）加入到IVT系统中，再加入相同ug的细胞
total mRNA,翻译一定时间后Western检测B蛋白，不知道这样是否可能，有没有达人做
过，一般都是特定的mrna，这样总rna会不会目的基因拷贝数太少而检测不到。
非常感谢！
手里研究的A蛋白影响了B蛋白的蛋白水平，但不影响mrna水平，本想做降解的，MG132
虽然可以恢复一部分，但是就是内源性降解曲线（CHX）没有明显差异。现在想要不要
转向翻译水平，但是没有full length 的mrna，只有coding区，因为也不知道是否在非
编码区的调控，所以单独试coding区意义不大。
所以如下假设，不知道有没有可能。
先将原核表达纯化的蛋白（如GST和GST-A）加入到IVT系统中，再加入相同ug的细胞
total mRNA,翻译一定时间后Western检测B蛋白，不知道这样是否可能，有没有达人做
过，一般都是特定的mrna，这样总rna会不会目的基因拷贝数太少而检测不到。
非常感谢！
s*e
4 楼
J点是老处男看到处女后泪流满面
T*N
5 楼
其实我觉得kindle fire用起来挺好的。就差中文输入法了。
s*9
6 楼
total mRNA for cell-free translation is a bad idea, unless you have single-
molecule detection sensitivity. You have to fish out the cDNA, add a strong
promoter and synthesize a large amount of mRNAs for the translation if you
can only do western.
molecule detection sensitivity. You have to fish out the cDNA, add a strong
promoter and synthesize a large amount of mRNAs for the translation if you
can only do western.
c*o
7 楼
能看不能吃有啥用？
【在 s*******e 的大作中提到】
: J点是老处男看到处女后泪流满面
【在 s*******e 的大作中提到】
: J点是老处男看到处女后泪流满面
p*s
8 楼
你懂tablet吗？
kindle fire就是个阉割得厉害的产品 无扩展插槽 更无摄像头 蓝牙 mic 无视频输出
接口 说白了就是个amazon的赚钱工具而已
离谱的是存储空间居然只有5g(8-3) 比苹果还nb
kindle fire就是个阉割得厉害的产品 无扩展插槽 更无摄像头 蓝牙 mic 无视频输出
接口 说白了就是个amazon的赚钱工具而已
离谱的是存储空间居然只有5g(8-3) 比苹果还nb
g*5
9 楼
CHX tricky from Sunny?
i*a
10 楼
不能吃, 吃了就不是处女了
【在 c*******o 的大作中提到】
: 能看不能吃有啥用？
【在 c*******o 的大作中提到】
: 能看不能吃有啥用？
a*r
11 楼
码那么多字，不知道已去的jobs烧了多少冥币给你~~hoho
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
a*x
12 楼
CHX does not work for proteins with long half life. Try pulse-chase -- it's
a giant pain but the reviewers will ask for it. If it's super long half life
protein, you can also use siRNA, which worked well in my hand.
a giant pain but the reviewers will ask for it. If it's super long half life
protein, you can also use siRNA, which worked well in my hand.
x*s
13 楼
re
【在 T***N 的大作中提到】
: 其实我觉得kindle fire用起来挺好的。就差中文输入法了。
【在 T***N 的大作中提到】
: 其实我觉得kindle fire用起来挺好的。就差中文输入法了。
r*y
14 楼
I ever used CHX for 36 hours and detected a decrease in the level of a very
stable protein, while the housekeeping protein was not affected.
s
life
【在 a*****x 的大作中提到】
: CHX does not work for proteins with long half life. Try pulse-chase -- it's
: a giant pain but the reviewers will ask for it. If it's super long half life
: protein, you can also use siRNA, which worked well in my hand.
stable protein, while the housekeeping protein was not affected.
s
life
【在 a*****x 的大作中提到】
: CHX does not work for proteins with long half life. Try pulse-chase -- it's
: a giant pain but the reviewers will ask for it. If it's super long half life
: protein, you can also use siRNA, which worked well in my hand.
l*t
15 楼
Ha？你文盲啊？我说Kindle Fire以及后续的tablet和phone对Apple可是真正的威胁，
没看这阵子Apple股票跌吗？
我们果轮比较客观，不像谷轮们成天就是编故事编谎话。
【在 a***r 的大作中提到】
: 码那么多字，不知道已去的jobs烧了多少冥币给你~~hoho
l*t
16 楼
偶也，Kindle Fire是Amazon的赚钱机器，iPad是Apple的赚钱机器。Google/Samsung/
HTC/Moto等等都不赚钱的，都是为了学雷锋才搞产品的。
【在 p******s 的大作中提到】
: 你懂tablet吗？
: kindle fire就是个阉割得厉害的产品 无扩展插槽 更无摄像头 蓝牙 mic 无视频输出
: 接口 说白了就是个amazon的赚钱工具而已
: 离谱的是存储空间居然只有5g(8-3) 比苹果还nb
d*3
17 楼
靠，承认自己是果轮好像很光荣的样子，自己是果轮不要紧不要乱给别人乱扣帽子，我
们都是果黑，但不是任何轮，是个轮就已经接近弱智了
们都是果黑，但不是任何轮，是个轮就已经接近弱智了
a*n
18 楼
不是果轮，就成了谷轮？
我还有点选择的权利吗？
我还有点选择的权利吗？
s*3
19 楼
现在kindle fire的评价是4颗星了，两天前还是3.5了，看来有所改观
b*d
20 楼
果轮的二元世界观再次彰显了人类智商的下限。
S*h
21 楼
各有所好 你那么爱 就快去买 何必在乎别人说它是几星呢
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
x*c
22 楼
amazon强力介入
【在 s********3 的大作中提到】
: 现在kindle fire的评价是4颗星了，两天前还是3.5了，看来有所改观
【在 s********3 的大作中提到】
: 现在kindle fire的评价是4颗星了，两天前还是3.5了，看来有所改观
f*g
23 楼
re
马鬃深谙枪手之道，其实果果也常干这事
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
马鬃深谙枪手之道，其实果果也常干这事
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
b*n
24 楼
网上看了一圏用户评价，感觉马鬃是不是想钱都想疯了，整了这么一个残废出来，比苹
果还要恶劣。
果还要恶劣。
a*m
25 楼
"我们果轮比较客观".....从这句话就看不出任何客观来。。。。。
【在 l**t 的大作中提到】
:
: 偶也，Kindle Fire是Amazon的赚钱机器，iPad是Apple的赚钱机器。Google/Samsung/
: HTC/Moto等等都不赚钱的，都是为了学雷锋才搞产品的。
【在 l**t 的大作中提到】
:
: 偶也，Kindle Fire是Amazon的赚钱机器，iPad是Apple的赚钱机器。Google/Samsung/
: HTC/Moto等等都不赚钱的，都是为了学雷锋才搞产品的。
l*8
26 楼
因为版上都是只知道技术，不知道或者不愿谈marketing的理工男。
版上说的是对的，马宗做得也是对的，各得其所。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
版上说的是对的，马宗做得也是对的，各得其所。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
T*n
27 楼
看到不满意的就指出来，这不是最正常的事情么
不能用果粉/轮的思维往他人身上套啊
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
不能用果粉/轮的思维往他人身上套啊
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
x*s
28 楼
支持
【在 b*******d 的大作中提到】
: 果轮的二元世界观再次彰显了人类智商的下限。
【在 b*******d 的大作中提到】
: 果轮的二元世界观再次彰显了人类智商的下限。
g*g
29 楼
你总算认识到轮跟粉的区别了，不容易呀。烂东西俺坚决批判，不管
是哪家的。您老是只要苹果出的，放个屁都是香的。iCloud太慢都是
谷轮的setup，谷轮控制的服务器也太多了一点。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
是哪家的。您老是只要苹果出的，放个屁都是香的。iCloud太慢都是
谷轮的setup，谷轮控制的服务器也太多了一点。
【在 l**t 的大作中提到】
: 板上都是Android粉丝啊。不是都讨厌Apple吗？不是都支持开源吗？
: Kindle Fire也是Android，也是开源，而且是第一个真正威胁到iPad的Android板子。
: 价格又够低，宣传做得也好，销售渠道也好。这么火的Android板子，为什么没有人支
: 持啊？大家都是在骂。我老早就指出，谷轮们编出那么多理由，比如Android只有七寸
: 板子就说七寸的便携，9.6寸的iPad太大。后来Android改推10.1寸就说其实10.1寸最好
: ，9.6寸太小。还有什么开源啊，等等等等。其实本质就是：google的就是好，不是
: google的就不好。其实没有什么果黑，也不是安轮，都是谷轮。
: Kindle Fire先出来，明年据说还要出大号的板子，下半年甚至还可能出手机。这下
: Android搞不好可能被打死了，Apple也起码要重伤。
a*m
30 楼
应该说体现了现在iq测试中的缺陷。最低是0显然不能满足果轮的需要。。。
【在 x*********s 的大作中提到】
: 支持
【在 x*********s 的大作中提到】
: 支持
s*3
31 楼
哈哈，类似政府干预市场经济啊。。
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
f*i
32 楼
我也关注了一下
有的买家写的评论居然比我GRE作文还长，真敬业啊 LOL
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
有的买家写的评论居然比我GRE作文还长，真敬业啊 LOL
【在 x****c 的大作中提到】
: amazon强力介入
a*e
33 楼
是啊，虽然尺寸正好，可是阉割过渡就值$100了
产品有不好就该骂，而不是付$500然后当亲爷供起来不许骂
这就属于心理问题了
【在 T****n 的大作中提到】
: 看到不满意的就指出来，这不是最正常的事情么
: 不能用果粉/轮的思维往他人身上套啊
产品有不好就该骂，而不是付$500然后当亲爷供起来不许骂
这就属于心理问题了
【在 T****n 的大作中提到】
: 看到不满意的就指出来，这不是最正常的事情么
: 不能用果粉/轮的思维往他人身上套啊
G*y
34 楼
我今天去bestbuy体验了一下fire，非常不错，很流畅，要不是已经有ipad了，肯定入
了
了
n*u
35 楼
MITBBS 什么都会被骂
MITBBS 的风格
MITBBS 的风格
y*5
36 楼
我用了下感觉一般啊
【在 G*****y 的大作中提到】
: 我今天去bestbuy体验了一下fire，非常不错，很流畅，要不是已经有ipad了，肯定入
: 了
【在 G*****y 的大作中提到】
: 我今天去bestbuy体验了一下fire，非常不错，很流畅，要不是已经有ipad了，肯定入
: 了
a*a
37 楼
Android粉丝就不能骂android产品，一看就是果轮思维
p*s
38 楼
果然是走极端的nc果轮 只知道一刀切
kindle fire的系统明显和原生android系统不一样 不要来类比 至少其他平板主要还要
靠device赚钱 自家的content并像amazon那样多
【在 l**t 的大作中提到】
:
: 偶也，Kindle Fire是Amazon的赚钱机器，iPad是Apple的赚钱机器。Google/Samsung/
: HTC/Moto等等都不赚钱的，都是为了学雷锋才搞产品的。
kindle fire的系统明显和原生android系统不一样 不要来类比 至少其他平板主要还要
靠device赚钱 自家的content并像amazon那样多
【在 l**t 的大作中提到】
:
: 偶也，Kindle Fire是Amazon的赚钱机器，iPad是Apple的赚钱机器。Google/Samsung/
: HTC/Moto等等都不赚钱的，都是为了学雷锋才搞产品的。
g*g
39 楼
此帖充分显示了果轮的评判标准与众不同，看到他人不以品牌为标准。惊诧了。
【在 p******s 的大作中提到】
: 果然是走极端的nc果轮 只知道一刀切
: kindle fire的系统明显和原生android系统不一样 不要来类比 至少其他平板主要还要
: 靠device赚钱 自家的content并像amazon那样多
【在 p******s 的大作中提到】
: 果然是走极端的nc果轮 只知道一刀切
: kindle fire的系统明显和原生android系统不一样 不要来类比 至少其他平板主要还要
: 靠device赚钱 自家的content并像amazon那样多
m*s
40 楼
果轮全傻碧， 费口舌干吗
m*n
41 楼
同意
【在 b****n 的大作中提到】
: 网上看了一圏用户评价，感觉马鬃是不是想钱都想疯了，整了这么一个残废出来，比苹
: 果还要恶劣。
【在 b****n 的大作中提到】
: 网上看了一圏用户评价，感觉马鬃是不是想钱都想疯了，整了这么一个残废出来，比苹
: 果还要恶劣。
l*x
42 楼
再一次见识了果轮智商无下限
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