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紧急求助:怎么溶解蛋白质沉淀啊?
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紧急求助:怎么溶解蛋白质沉淀啊?# Biology - 生物学
l*a
1
打完指纹10天出现第一个LUD,昨天是第二个,不知道还要多久?
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a*5
2
孝顺老妈,买了一个。
准备回国买好看的case,现在暂时买个用几天
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o*4
3
我做Flag pull down,之后把elution冻在-20°过夜,今天早上解冻的时候发现蛋白质
沉淀,
我加了SDS (终浓度1%),煮了5分钟,还是没见到任何溶解,
请问该怎么溶解蛋白质啊?
用loading buffer煮一下能溶解么?
谢谢
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l*7
4
我有五六个,后来没下文
有的啥也没有,就批了
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B*g
5
我用的elago 的 slide 我觉得不错,亚麻训上有

【在 a*******5 的大作中提到】
: 孝顺老妈,买了一个。
: 准备回国买好看的case,现在暂时买个用几天

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b*y
6
boiling in loading buffer should work.
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k*1
7
LUD就代表IO在看你的CASE,没啥用。
有人连着好几天LUD,那是表示IO在用功看他的CASE。如果看完没有动静了,估计在等什
么材料。
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b*y
8
some salt is not compatible with SDS, for instance K+. make sure no high
concentration of it in your original buffer.
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s*e
9
我的都lud4回了,还没批呢,着急呀!
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s*y
10
如果你不关心蛋白是否变性的话可以用8M urea,而且也不影响跑胶。
6M Guanidine 更好使,就是用完之后不太好跑胶。

【在 o**4 的大作中提到】
: 我做Flag pull down,之后把elution冻在-20°过夜,今天早上解冻的时候发现蛋白质
: 沉淀,
: 我加了SDS (终浓度1%),煮了5分钟,还是没见到任何溶解,
: 请问该怎么溶解蛋白质啊?
: 用loading buffer煮一下能溶解么?
: 谢谢

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l*a
11
请问你什么时候打得指纹啊?着急中...

【在 s******e 的大作中提到】
: 我的都lud4回了,还没批呢,着急呀!
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o*4
12
哦,这样啊,谢谢,我不在意蛋白变性

【在 s******y 的大作中提到】
: 如果你不关心蛋白是否变性的话可以用8M urea,而且也不影响跑胶。
: 6M Guanidine 更好使,就是用完之后不太好跑胶。

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k*0
14
1%SDS都无法溶解,这蛋白质有点生猛,是输水的膜蛋白吗?
有没有加了还原剂?
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