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请帮助解释：33% continuous Percoll gradient

请帮助解释：33% continuous Percoll gradient# Biology - 生物学

S*h2012-08-15 07:08

1 楼

【以下文字转载自 MusicPlayer 讨论区】
发信人: Shiloh (Shiloh), 信区: MusicPlayer
标题: Pianotaq 试用
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Nov 14 23:57:43 2015, 美东)
作为一个码工，虽然刚开始学钢琴，实在手痒，下了个pianoteq试用版，接在我的
Casio PX160上感觉很好玩，用的笔记本的耳机转功放（很土的一百块量级音箱）。还
有琴键release的小小咯哒声。声音在我这个初初学者听来和Casio各有不同。不知道各
位大拿们试用过没，给个专业社评价吧，能到什么级别的电钢呢？

W*T2012-08-15 07:08

2 楼

这个是啥？能解释一下么？如何买到需要材料的和如何操作？
谢谢

j*a2012-08-15 07:08

3 楼

去sigma买percoll. 然后调ph，稀释

l*j2012-08-15 07:08

4 楼

个人理解：
continuous Percoll gradient是在高速离心中由于重力的原因，自身产生连续梯度。
discontinuous Percoll gradient是不同浓度的percoll,比如15%，20%，30%三层梯度
。

l*j2012-08-15 07:08

5 楼

还不能随便用水稀释了，得看你要分离什么，一般protocol里都有说明。

s*y2012-08-15 07:08

6 楼

是否需要预先离心来制备梯度呢？

【在 l****j 的大作中提到】

: 个人理解：
: continuous Percoll gradient是在高速离心中由于重力的原因，自身产生连续梯度。
: discontinuous Percoll gradient是不同浓度的percoll,比如15%，20%，30%三层梯度
: 。

l*j2012-08-15 07:08

7 楼

不需要预先离心，先放percoll,再loading sample，直接离心。

h*u2012-08-15 07:08

8 楼

一般是这样来实现连续梯度的：
在centrifugue tube里先放高浓度的percoll suspension, 比如33%percoll,然后放低
浓度的,比如0% percoll。静置一晚上，扩散过程自然能形成连续梯度。要用的时候，
在上面放样品离心。有的protocol用sucrose gradient, 方法类似

【在 l****j 的大作中提到】

: 不需要预先离心，先放percoll,再loading sample，直接离心。

l*j2012-08-15 07:08

9 楼

还没看到需要静置扩散的paper。
建议参考下文，
我照着做过，分的很好。
Nat Protoc. 2009;4(11):1582-90. Epub 2009 Oct 8.
Isolation of mitochondria-associated membranes and mitochondria from animal
tissues and cells.
Wieckowski MR, Giorgi C, Lebiedzinska M, Duszynski J, Pinton P.
SourceDepartment of Biochemistry, Nencki Institute of Experimental Biology,
Warsaw, Poland. m**********[email protected]

W*T2012-08-15 07:08

10 楼

太感谢了，谢谢各位