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为什么抗体能够检测到基因敲除的蛋白？
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为什么抗体能够检测到基因敲除的蛋白？# Biology - 生物学
j*u
1 楼
最近家里人跟我说国内5年的定期存款的利率是5。5％，问我要不要存一些。我觉得这
个利率很高亚。不知父母们有没有想过把钱投到国内去。529的主要好处是收益不上税
。但是这个好处在国内投资应该也能享受的到吧。具体操作可以是把钱转到国内
grandparents名下，过几年再转回来呗。
不知我想得对不对。大家有没有兴趣讨论一下。
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S*p
2 楼
推荐个牌子，找什么样的人去安装呢？roofer?
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WB
4 楼
win7/win8都支持显示图片略缩图
唯独win2008r2不可以
怎么回事？》
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t*y
5 楼
请问谁碰到过类似的情况？
一个转基因老鼠，目标基因A的exon 1被lacZ基因取代。但是从突变体纯合子分离到的
原代细胞里还是能够检测到目标蛋白A的表达。用qPCR检测目标其mRNA水平虽然要比野
生型少很多，但是也能够检测得到（大概是野生型的百分之五左右）。exon1包括翻译
起始位点ATG以及后面大概250个碱基。此突变体纯合子表型明显，杂合子没有表型。
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m*k
6 楼
1) 有利率风险，就是说如果中国钱贬值了呢?
2) 兑换限制, 人民币转美元有限制
3) 所得税，在中国的收益也要报税。如果转成别人，算赠与。倒是不用什么税。
(但是像洗钱)

【在 j***u 的大作中提到】
: 最近家里人跟我说国内5年的定期存款的利率是5。5％，问我要不要存一些。我觉得这
: 个利率很高亚。不知父母们有没有想过把钱投到国内去。529的主要好处是收益不上税
: 。但是这个好处在国内投资应该也能享受的到吧。具体操作可以是把钱转到国内
: grandparents名下，过几年再转回来呗。
: 不知我想得对不对。大家有没有兴趣讨论一下。
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C*d
7 楼
I don't recommend it. It is too expensive and too weak.
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b*n
10 楼
你突变体纯合子能被抗体检测，是western还是免疫组化？
突变体纯合子的mRNA可以做primer extension，看看是不是有alternative start
codon
想降低qPCR本底水平，引物可以设计一端priming在exon1，另外一端在别的exon或者5'
-UTR

【在 t******y 的大作中提到】
: 请问谁碰到过类似的情况？
: 一个转基因老鼠，目标基因A的exon 1被lacZ基因取代。但是从突变体纯合子分离到的
: 原代细胞里还是能够检测到目标蛋白A的表达。用qPCR检测目标其mRNA水平虽然要比野
: 生型少很多，但是也能够检测得到（大概是野生型的百分之五左右）。exon1包括翻译
: 起始位点ATG以及后面大概250个碱基。此突变体纯合子表型明显，杂合子没有表型。
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j*u
11 楼
这么说来如果数目不太大的话（比如几万美金）应该也是可行的。存在grandparents名
下几年再转过来。汇率可升可降，就当diversify了。

【在 m**k 的大作中提到】
: 1) 有利率风险，就是说如果中国钱贬值了呢?
: 2) 兑换限制, 人民币转美元有限制
: 3) 所得税，在中国的收益也要报税。如果转成别人，算赠与。倒是不用什么税。
: (但是像洗钱)
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s*d
12 楼
too expensive，五十也赚不回来电费。
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v*e
13 楼
令我感到费解的是，产品强度测试难道不是工业设计里最基本的测试么？

【在 n***d 的大作中提到】
: 这次苹果大概要每人发个硬壳才能过去
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t*y
14 楼
western 检测得到，但是蛋白量没有野生型多。
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az
15 楼
我听说是3%，5.5%好高啊

【在 j***u 的大作中提到】
: 最近家里人跟我说国内5年的定期存款的利率是5。5％，问我要不要存一些。我觉得这
: 个利率很高亚。不知父母们有没有想过把钱投到国内去。529的主要好处是收益不上税
: 。但是这个好处在国内投资应该也能享受的到吧。具体操作可以是把钱转到国内
: grandparents名下，过几年再转回来呗。
: 不知我想得对不对。大家有没有兴趣讨论一下。
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n*d
16 楼
也许一直套着壳子测的？呵呵，上次的天线门也是让人费解

【在 v****e 的大作中提到】
: 令我感到费解的是，产品强度测试难道不是工业设计里最基本的测试么？
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c*l
17 楼
这不是很正常吗，你的ko可能是in frame 的exon 1 replacement，蛋白的其他domain
还在， 如果你的抗体是polyclonal或是别exon1以外的epitope，当然可以监测到了
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j*u
18 楼
5。5％应该是简单的年利，不是复利。

【在 az 的大作中提到】
: 我听说是3%，5.5%好高啊
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v*e
19 楼
电池如果贯穿机体的话反而没这个问题了。或者厚点也不会有。那么薄的铝制机身，然
后电池只占2/3长度，肯定会有这个问题。我记得4S好像有个钢的frame，从5开始就是
铝制的了。Ive这把翻船了。。。

【在 n***d 的大作中提到】
: 也许一直套着壳子测的？呵呵，上次的天线门也是让人费解
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t*y
20 楼
插入的lacz后面有一个stop codon，而且exon 1 里面包括进入内质网表达的信号肽，
这样还会表达蛋白的其他domain吗？

domain

【在 c****l 的大作中提到】
: 这不是很正常吗，你的ko可能是in frame 的exon 1 replacement，蛋白的其他domain
: 还在， 如果你的抗体是polyclonal或是别exon1以外的epitope，当然可以监测到了
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a*y
21 楼
五出来的时候也可以掰弯，你忘了？

【在 v****e 的大作中提到】
: 电池如果贯穿机体的话反而没这个问题了。或者厚点也不会有。那么薄的铝制机身，然
: 后电池只占2/3长度，肯定会有这个问题。我记得4S好像有个钢的frame，从5开始就是
: 铝制的了。Ive这把翻船了。。。
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f*u
22 楼
看看有没有可能是splicing把你的lacZ给跳过去了

【在 t******y 的大作中提到】
: 插入的lacz后面有一个stop codon，而且exon 1 里面包括进入内质网表达的信号肽，
: 这样还会表达蛋白的其他domain吗？
:
: domain
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c*t
23 楼
到底用了多大劲啊？6有这个问题吗？三星note有人掰过吗？

【在 v****e 的大作中提到】
: 用手随便掰弯，依港。。。另外一件事是这个帖子在macrumors上出现了一会儿就被撤
: 了。。。
: http://venturebeat.com/2014/09/23/watch-video-proof-of-iphone-6
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b*o
24 楼
就是这个道理，这是很正常的。有时候做KO的人没有考虑到去掉EXON后前面和后门的
EXONS还能连在一起。就是碱基数是３的倍数（IN FRAME）。如果是这样的话，有些功
能蛋白去掉一些片段仍然有功能，尽管功能会降低。如果要KO的蛋白功能研究的非常清
楚，这时就要敲除关键的蛋白片段对应的EXON。

domain

【在 c****l 的大作中提到】
: 这不是很正常吗，你的ko可能是in frame 的exon 1 replacement，蛋白的其他domain
: 还在， 如果你的抗体是polyclonal或是别exon1以外的epitope，当然可以监测到了
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n*d
25 楼
后来的改进了？

【在 a***y 的大作中提到】
: 五出来的时候也可以掰弯，你忘了？
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b*o
26 楼
E coli的Stop codon的使用频率和真核生物的使用频率是不一样的。如果使用了老鼠不
常用的stop codon，那就很有可能"通读"了。
建议你在KO EXON的上游和下游各设计一对QPCR引物，然后检测就能知道你的STOP
CODON是否起作用。

【在 t******y 的大作中提到】
: 插入的lacz后面有一个stop codon，而且exon 1 里面包括进入内质网表达的信号肽，
: 这样还会表达蛋白的其他domain吗？
:
: domain
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v*e
27 楼
但是力矩长了以后这问题就放大了。5我掰过，没这么脆弱（本人绝对比视频里这个秃
子劲儿大）。我认为这是个设计缺陷。

【在 a***y 的大作中提到】
: 五出来的时候也可以掰弯，你忘了？
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M*t
29 楼
需要铁盒子
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c*m
30 楼
铁壳子屏蔽电磁信号，新的天线门。苹果这回真的残了。
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c*t
31 楼
万少，给分析一下苹果股票吧，buy, hold or sell? 最好捎带把sina, baba也分析一
下。最近没看到你的分析，亏了不少钱。

【在 v****e 的大作中提到】
: 三星完胜
: https://www.youtube.com/watch?v=FwM4ypi3at0
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l*u
33 楼
是个设计缺陷，但不代表正常使用也会弯。我觉得很有可能是三星营销团队搞出来的把
戏
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w*2
34 楼
这个没那么严重，苹果在后面的铝里多掺点沙子硬度酒上去了。
这种非正常使用的问题都属于corner case。
是个缺陷，但应该还好。
让我想起来那个砸核桃的故事。。
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g*m
35 楼
这个肯定没有核桃硬，一砸一个坑啊。

【在 w********2 的大作中提到】
: 这个没那么严重，苹果在后面的铝里多掺点沙子硬度酒上去了。
: 这种非正常使用的问题都属于corner case。
: 是个缺陷，但应该还好。
: 让我想起来那个砸核桃的故事。。
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P*i
36 楼
这么牛B，还以为柔性屏只是个传说，这么说6plus已经用上了？
三星不会把软屏先给苹果用吧，估计是LG还是sharp的，难怪产量上不去

【在 v****e 的大作中提到】
: 用手随便掰弯，依港。。。另外一件事是这个帖子在macrumors上出现了一会儿就被撤
: 了。。。
: http://venturebeat.com/2014/09/23/watch-video-proof-of-iphone-6
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n*d
37 楼
这个创意不错，不用的时候可以绕胳臂上。

【在 P****i 的大作中提到】
: 这么牛B，还以为柔性屏只是个传说，这么说6plus已经用上了？
: 三星不会把软屏先给苹果用吧，估计是LG还是sharp的，难怪产量上不去
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