求助：工业化蛋白纯化为什么不用tag？万分感谢# Biology - 生物学
h*e
1 楼
我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
d*n
2 楼
cost.
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
s*9
3 楼
哪些工业化的蛋白？
e*s
4 楼
专利费用？
o*u
5 楼
特异性蛋白酶的价格太高。工业化蛋白生产如果要酶切处理，成本可以是蛋白发酵粗提
成本的几十倍甚至上百倍。所以，不是不得已一般不会用的。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
成本的几十倍甚至上百倍。所以，不是不得已一般不会用的。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
b*n
6 楼
不知道工业化蛋白纯化怎么弄的
是不是盐析+离子交换柱？
感觉很多限制性内切酶的生产应该是用tag的吧
另外现在来自虾的碱性磷酸酶很少了，不少公司开发来自E. coli的重组蛋白
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
是不是盐析+离子交换柱？
感觉很多限制性内切酶的生产应该是用tag的吧
另外现在来自虾的碱性磷酸酶很少了，不少公司开发来自E. coli的重组蛋白
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
s*9
7 楼
我问过NEB的人，如果要用histag，他们得付专利费。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
s*9
8 楼
NEB大部分的限制性内切酶都是recombinant的，一般不带tag。
提纯是通常就是离子交换，分子筛和疏水作用，要2-6步达到95%的纯度。
【在 b******n 的大作中提到】
: 不知道工业化蛋白纯化怎么弄的
: 是不是盐析+离子交换柱？
: 感觉很多限制性内切酶的生产应该是用tag的吧
: 另外现在来自虾的碱性磷酸酶很少了，不少公司开发来自E. coli的重组蛋白
提纯是通常就是离子交换，分子筛和疏水作用，要2-6步达到95%的纯度。
【在 b******n 的大作中提到】
: 不知道工业化蛋白纯化怎么弄的
: 是不是盐析+离子交换柱？
: 感觉很多限制性内切酶的生产应该是用tag的吧
: 另外现在来自虾的碱性磷酸酶很少了，不少公司开发来自E. coli的重组蛋白
m*b
9 楼
发明his tag的人岂不是要恨死他们了
这么好用的tag竟然为了省点儿小钱就不用了
这么好用的tag竟然为了省点儿小钱就不用了
b*n
10 楼
好像清华罗永章的那个抗肿瘤药恩度就是包含his tag的
不知道有没有付专利
【在 m*b 的大作中提到】
: 发明his tag的人岂不是要恨死他们了
: 这么好用的tag竟然为了省点儿小钱就不用了
不知道有没有付专利
【在 m*b 的大作中提到】
: 发明his tag的人岂不是要恨死他们了
: 这么好用的tag竟然为了省点儿小钱就不用了
A*y
11 楼
Protein A uses proprietary secretion tag, you don't even have to lyse the
cells. Just scoop up the media and do a quick clean up. A lot of industrial
protein is made this way.
cells. Just scoop up the media and do a quick clean up. A lot of industrial
protein is made this way.
h*e
12 楼
谢谢各位的回复。
本人想自学这方面的知识，不知哪位能推荐一下这方面的经典书籍或文献？最好能有一
些实例。
万分感谢。
本人想自学这方面的知识，不知哪位能推荐一下这方面的经典书籍或文献？最好能有一
些实例。
万分感谢。
h*e
13 楼
his-tag和GST-tag的专利应该过期了吧。
【在 s******9 的大作中提到】
: 我问过NEB的人，如果要用histag，他们得付专利费。
【在 s******9 的大作中提到】
: 我问过NEB的人，如果要用histag，他们得付专利费。
m*c
14 楼
Tag的作用是用来提纯。对于产量低、纯化困难的旦白是有效的。但是对于production
level来说，还要考虑单位产量的问题，除纯度外。有Tag的就需要増加纯化部骤，因此
就会增加纯化过程中的损耗。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
level来说，还要考虑单位产量的问题，除纯度外。有Tag的就需要増加纯化部骤，因此
就会增加纯化过程中的损耗。
【在 h*********e 的大作中提到】
: 我在实验室纯化蛋白时常先用His-,GST- tag纯化再切掉tag,但是发现在工业化蛋白纯
: 化中很少用tag。请问这是为什么？万分感谢。
相关阅读
问一个opt的问题想转行了替我的好姐妹征婚 (转载)大家都说说discussion怎么写吧请在NIH的同胞进，问下Stephen Brenowitz人怎么样困惑啊：more details or less?从哪里可以查到NIH NSF funding?今天被人鄙視了老头子做的事总是对的——强档推荐给生物WSN的家属们请教EMSA图免费拿最高700刀 bonus+Discover 12000mile+10刀礼品卡若干（自取）ｉＰＳ山中获京都賞的先端技術部門賞今年的国家自然基金结果出来了没转行可以转这些方向ZZ实验室里上BBS，被人发现会不会后果很严重？★★★★★★真心求教： 公派经历，如何走下一步？？酸性酚氯仿抽提纯DNA，中间层有白的东西现在全自动膜片钳的机器到什么程度了？分子的故事（转载）问几个cell assay的问题