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免疫组化sectioning的问题

免疫组化sectioning的问题# Biology - 生物学

c*y2012-12-24 08:12

1 楼

探针是biotin标记的antisense RNA. 想知道paraffin block sectioning 或
cryosectioning,哪一个会得到更好的结果?技术方面哪个方便些?还有就是endogenous
biotin的背景怎样解决？
第一次做，恳请有经验的能指导一下。多谢了。

t*k2012-12-24 08:12

2 楼

马克一下，想做类似的实验，听说背景会很高。。。。。

c*y2012-12-24 08:12

3 楼

这就是我目前的问题所在.希望有经验的能指点一下

【在 t******k 的大作中提到】

: 马克一下，想做类似的实验，听说背景会很高。。。。。

a*22012-12-24 08:12

4 楼

paraffin- or cryo- 都做过,cryo的信号好一些,最好切完一个星期以内作.
endogenous的biotin有kit可以inhibit,好像是vectorlab.不过,我用的是DIG labell的
probe.
降低背景,还需要作acetylation.这个步骤也可以替换成0.2NHCL处理10min.
最后最后,target gene的表达量是多少,如果太低,背景都会很高.

endogenous

【在 c***y 的大作中提到】

: 探针是biotin标记的antisense RNA. 想知道paraffin block sectioning 或
: cryosectioning,哪一个会得到更好的结果?技术方面哪个方便些?还有就是endogenous
: biotin的背景怎样解决？
: 第一次做，恳请有经验的能指导一下。多谢了。