逆转录病毒过表达目的蛋白强度问题求教# Biology - 生物学
z*u
1 楼
我的理解是不是利大于弊？系里不存在竞争？
但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
谢谢
但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
谢谢
d*s
2 楼
小弟正用逆转录病毒在小鼠CD4 T细胞中过表达目的蛋白。病毒质粒是MCSV骨架，目的
基因和GFP之间有IRES连着。对照组CD4 T细胞GFP阳性率有70%。实验组CD4 T细胞GFP
阳性率只有40%，而且GFP的强度也比对照组要弱很多。看了几篇文章转的是同样的基因，
同样也是逆转录病毒但是不同质粒，他们的结果就非常好，实验组GFP的强度和对照组
的差不多。
抱歉描述的有点乱了。我的问题是有什么办法能增加我的实验组T细胞GFP的强度，也就
是增加目的蛋白的表达量吗？先谢谢大家了。
基因和GFP之间有IRES连着。对照组CD4 T细胞GFP阳性率有70%。实验组CD4 T细胞GFP
阳性率只有40%，而且GFP的强度也比对照组要弱很多。看了几篇文章转的是同样的基因，
同样也是逆转录病毒但是不同质粒，他们的结果就非常好，实验组GFP的强度和对照组
的差不多。
抱歉描述的有点乱了。我的问题是有什么办法能增加我的实验组T细胞GFP的强度，也就
是增加目的蛋白的表达量吗？先谢谢大家了。
m*c
3 楼
同问
l*g
4 楼
没用过这个载体的病毒质粒，不是很清楚。为啥目的基因和GFP之间要有IRES连着，GFP
不能和目的基因直接融合吗？一般IRES和筛选基因连着比较有用吧。如果你的GFP阳性
率偏低并且表达量不高的话，可以试着病毒感染后再挑选单克隆细胞，挑那种表达量高
的。
不能和目的基因直接融合吗？一般IRES和筛选基因连着比较有用吧。如果你的GFP阳性
率偏低并且表达量不高的话，可以试着病毒感染后再挑选单克隆细胞，挑那种表达量高
的。
z*u
5 楼
up up up
d*s
6 楼
GFP
非常感谢你的建议。关于ires，很多文章上都是这么做的。我用逆转录病毒主要是为了
瞬时过表达，也就3-5天。
【在 l***g 的大作中提到】
: 没用过这个载体的病毒质粒，不是很清楚。为啥目的基因和GFP之间要有IRES连着，GFP
: 不能和目的基因直接融合吗？一般IRES和筛选基因连着比较有用吧。如果你的GFP阳性
: 率偏低并且表达量不高的话，可以试着病毒感染后再挑选单克隆细胞，挑那种表达量高
: 的。
h*0
7 楼
好事。你的重要性更大了。
【在 z**u 的大作中提到】
: 我的理解是不是利大于弊？系里不存在竞争？
: 但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
: 前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
: 谢谢
【在 z**u 的大作中提到】
: 我的理解是不是利大于弊？系里不存在竞争？
: 但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
: 前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
: 谢谢
A*0
8 楼
系里没人做当然是利好了，要是有一堆人做，光应付politics就够小AP吃一壶的。方向
一样的tenure-track AP 在一个系，不打架就不错了，合作基本上是天方夜谭。
【在 z**u 的大作中提到】
: 我的理解是不是利大于弊？系里不存在竞争？
: 但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
: 前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
: 谢谢
一样的tenure-track AP 在一个系，不打架就不错了，合作基本上是天方夜谭。
【在 z**u 的大作中提到】
: 我的理解是不是利大于弊？系里不存在竞争？
: 但我比较纠结的是，如果问到你想和谁合作这个问题怎么回答呢...program比较小，目
: 前就3个tenure-track的老师，方向不一样，感觉能合作的可能性也比较小...
: 谢谢
z*u
9 楼
我考古了一些面试题，会有问你想和谁合作之类的问题，那请问怎么回答呢……
【在 A****0 的大作中提到】
: 系里没人做当然是利好了，要是有一堆人做，光应付politics就够小AP吃一壶的。方向
: 一样的tenure-track AP 在一个系，不打架就不错了，合作基本上是天方夜谭。
【在 A****0 的大作中提到】
: 系里没人做当然是利好了，要是有一堆人做，光应付politics就够小AP吃一壶的。方向
: 一样的tenure-track AP 在一个系，不打架就不错了，合作基本上是天方夜谭。
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