Redian新闻
>
请教蛋白的Sumo修饰问题。
avatar
请教蛋白的Sumo修饰问题。# Biology - 生物学
a*s
1
今天上课时开了一句玩笑,说上学期你们有人给我的评语说我教的不够challenging,
咱今天学的就够难。结果被一个学生举报到管教学的assistant dean那里去了。
说大家都喜欢上课简单,虽然没人知道是他写的评语(我也不知道是谁写的),我在班
上这么说他感到压力很大。还说我虽然没有指名道姓,但公开讨论某个人的单独评语也
违反规定。真心不了解有没有这个规定,太郁闷了。
avatar
b*0
2
处理细胞,想看是否影响蛋白Sumo修饰(已知该蛋白存在SUMO修饰),当然最直接的方
式是 IP WB了,但是实验室没做过,没经验。于是想先通过mRNA 水平看看,比如说
SUMO 相关酶 以及 去SUMO酶 是否发生了变化。 请问是否可行呢? 请做过SUMO的指点
下。
avatar
s*y
3
嗯。。以前一个研究生教授也这么做过。
那时候我初生牛犊比较实事求是。就说他经常提前挺多就下课。
他后来课堂提起。就那么几个人大家猜来猜去。让我很郁闷很惨。
我觉得太过分了。
当时也没办法告他。

【在 a*******s 的大作中提到】
: 今天上课时开了一句玩笑,说上学期你们有人给我的评语说我教的不够challenging,
: 咱今天学的就够难。结果被一个学生举报到管教学的assistant dean那里去了。
: 说大家都喜欢上课简单,虽然没人知道是他写的评语(我也不知道是谁写的),我在班
: 上这么说他感到压力很大。还说我虽然没有指名道姓,但公开讨论某个人的单独评语也
: 违反规定。真心不了解有没有这个规定,太郁闷了。

avatar
y*y
4
这个非直接的方法太不靠谱了,我觉得。
有时候酶的活性跟mRNA水平没啥关系,翻译后修饰的成分太大了,比如磷酸化,泛素化
之类的
没有做过没关系,找到protocol跟着做就是了
对于没做过的实验,不要怵,要胆大心细,把人家protocol好好研究,每一步的所以然
都弄明白,然后硬着头皮就去试。几次不成够之后再想他法。
您现在都还没试呢,就琢磨着用非直接的方法。即便是运气好,被您找到了一些证据,
回来发文章的时候,reviewer一句话说,没有IP的证据结果不可信,您还不得一样回来
重新来过?

【在 b*******0 的大作中提到】
: 处理细胞,想看是否影响蛋白Sumo修饰(已知该蛋白存在SUMO修饰),当然最直接的方
: 式是 IP WB了,但是实验室没做过,没经验。于是想先通过mRNA 水平看看,比如说
: SUMO 相关酶 以及 去SUMO酶 是否发生了变化。 请问是否可行呢? 请做过SUMO的指点
: 下。

avatar
a*s
5
原来真的会这样,我本来还觉得学生意见被重视了会高兴呢。明白了,以后一定会注意
上课不提任何学生反馈。现在我是应该做些什么,还是就让这件事过去?

【在 s****y 的大作中提到】
: 嗯。。以前一个研究生教授也这么做过。
: 那时候我初生牛犊比较实事求是。就说他经常提前挺多就下课。
: 他后来课堂提起。就那么几个人大家猜来猜去。让我很郁闷很惨。
: 我觉得太过分了。
: 当时也没办法告他。

avatar
b*0
6
多谢指教。
受教了。

【在 y***y 的大作中提到】
: 这个非直接的方法太不靠谱了,我觉得。
: 有时候酶的活性跟mRNA水平没啥关系,翻译后修饰的成分太大了,比如磷酸化,泛素化
: 之类的
: 没有做过没关系,找到protocol跟着做就是了
: 对于没做过的实验,不要怵,要胆大心细,把人家protocol好好研究,每一步的所以然
: 都弄明白,然后硬着头皮就去试。几次不成够之后再想他法。
: 您现在都还没试呢,就琢磨着用非直接的方法。即便是运气好,被您找到了一些证据,
: 回来发文章的时候,reviewer一句话说,没有IP的证据结果不可信,您还不得一样回来
: 重新来过?

avatar
n*l
7
啥都不用做啊,多做多错。一般来说学生的意见被重视了的话,学生们应该高兴才对啊。
不过这个学生提了跟大多数人不同的意见,他/她感受到了同学们的压力也是可以理解
的。
我每学期中间都会给学生发个期中评估表,让学生对我的教学发表一下看法。然后我会
在课堂上就学生的疑问和建议谈一下我的看法以及我将要采取什么措施进行改进。从来
没有学生抱怨过。最好笑的是有一次有个学生说我穿的那些T恤衫很好看,我课堂上专
门提了一下,活跃了一下课堂气氛。

【在 a*******s 的大作中提到】
: 原来真的会这样,我本来还觉得学生意见被重视了会高兴呢。明白了,以后一定会注意
: 上课不提任何学生反馈。现在我是应该做些什么,还是就让这件事过去?

avatar
i*g
8
直接扑向IP,这个又不是什么新锐的东西,仔细阅读3个版本protocol,再问问做过的人
不要做mRNA,RNA的事情和蛋白的可以差很远,这不是闲得发慌么
avatar
s*e
9
学生的意见是隐私 当然不能说啦
avatar
b*0
10
哪三个版本?

的人

【在 i*****g 的大作中提到】
: 直接扑向IP,这个又不是什么新锐的东西,仔细阅读3个版本protocol,再问问做过的人
: 不要做mRNA,RNA的事情和蛋白的可以差很远,这不是闲得发慌么

avatar
s*y
11
你这个程度比我的例子轻些,学生也比我那个情况多多了。所以我那个老师更过分。明
显他不认为提前很多下课是一个问题吗?当然是问题了。不负责任。
但老师说出来通常给人一种自己不服的感觉。自己觉得冤屈的感觉。
可能提的时机要小心些,有些美国小孩很敏感。
但我的那个情况倒是每个人都会觉得很难堪。

【在 a*******s 的大作中提到】
: 原来真的会这样,我本来还觉得学生意见被重视了会高兴呢。明白了,以后一定会注意
: 上课不提任何学生反馈。现在我是应该做些什么,还是就让这件事过去?

avatar
l*e
12
没做过没关系,找个善于做IP的实验室合作。想发文章说这种PTM,IP-WB是逃不掉的。
avatar
v*a
13
这个指教做wb吧,文献太多了。
有in vitro sumoylation kit,可以用来做阳性对照。
avatar
g*k
14
PTM和RNA没必然联系啊。最简单的方法,IP下来,直接用sumo的抗体检测。不过有些蛋
白的PTM比例不大,western一般看不到。建议sumo1/2/3和蛋白共转,后面的检测相当
于co-ip。Lysis的时候记得加NEM,保护sumo修饰。
avatar
c*7
15
NEM 对于ubiquitination有没有保护作用?
以前做Ubiquitination的时候,没加过,但最近看sumo的文章,说检测sumolyation是
要加 NEM的,那检测ub的时候,是不是也应该加?还是不加也可?

【在 g********k 的大作中提到】
: PTM和RNA没必然联系啊。最简单的方法,IP下来,直接用sumo的抗体检测。不过有些蛋
: 白的PTM比例不大,western一般看不到。建议sumo1/2/3和蛋白共转,后面的检测相当
: 于co-ip。Lysis的时候记得加NEM,保护sumo修饰。

相关阅读
logo
联系我们隐私协议©2024 redian.news
Redian新闻
Redian.news刊载任何文章,不代表同意其说法或描述,仅为提供更多信息,也不构成任何建议。文章信息的合法性及真实性由其作者负责,与Redian.news及其运营公司无关。欢迎投稿,如发现稿件侵权,或作者不愿在本网发表文章,请版权拥有者通知本网处理。