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shRNA resistant mutant# Biology - 生物学
m*i
1
感觉烤出来就是无油dinner roll啊……
有人试过没?没人试我下次试试……觉得超有意思……
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t*n
2
请问如果在OPT期间(OPT今年12月份到期)提交了H1B申请(4月递交申请),并获得批准,在H1B生效前(10月以前),还可以换工作吗?如果换了工作后,新的雇主重新提交H1B申请,审批会不会受到影响,因为上一个H1B还没生效就放弃了。
谢谢大家的回复!
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F*K
3
Hi all,
I plan to rescue knockdown of a mouse gene with human cDNA.
However, the human gene only mismatches the 21nt shRNA on #2, 17 and 20
positions. I am wondering if it is ok for rescue?
thanks
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g*e
4
我做麻花的时候这样想过,但是没付诸实践
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t*n
5
ding!
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s*s
6
你是问只mismatch3个能不能表达么?顺转下做western就好啦。
要是不表达就再多mutate几个位点
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s*n
7
馒头是蒸的,烤箱里没有水分,还要再烤,如果用同样的配方,肯定又干又硬。。。
如果你还是用一次发酵的方法,我觉得质地也不对
是烤馒头,而不会是餐包。。。

【在 m******i 的大作中提到】
: 感觉烤出来就是无油dinner roll啊……
: 有人试过没?没人试我下次试试……觉得超有意思……

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l*7
8
同问
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F*K
9
Yes, I want to know if 3 mismatch at those positions are enough to be
resistant to shRNA. the KD cell line is hard to transfect, so cannot test.

【在 s******s 的大作中提到】
: 你是问只mismatch3个能不能表达么?顺转下做western就好啦。
: 要是不表达就再多mutate几个位点

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m*i
10
:(
被打枪……
要进烤箱肯定是二次发酵法了。水量应该也会相应的多一点。我就是想知道不放油会有
什么效果~

【在 s**n 的大作中提到】
: 馒头是蒸的,烤箱里没有水分,还要再烤,如果用同样的配方,肯定又干又硬。。。
: 如果你还是用一次发酵的方法,我觉得质地也不对
: 是烤馒头,而不会是餐包。。。

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G*i
11
版主友情提示:
H-1B批准之后就可以transfer,不需等到生效。

批准,在H1B生效前(10月以前),还可以换工作吗?如果换了工作后,新的雇主重新
提交H1B申请,审批会不会受到影响,因为上一个H1B还没生效就放弃了。

【在 t*********n 的大作中提到】
: 请问如果在OPT期间(OPT今年12月份到期)提交了H1B申请(4月递交申请),并获得批准,在H1B生效前(10月以前),还可以换工作吗?如果换了工作后,新的雇主重新提交H1B申请,审批会不会受到影响,因为上一个H1B还没生效就放弃了。
: 谢谢大家的回复!

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w*r
12
你这个情况我觉得很难讲。
我以前做siRNA resistant的cDNA mutant,是根据SiRNA的序列,对应的每个codon都做
silent mutation,绝大部分都work。直到有一次,虽然突变了,但是仍然可以被siRNA
干掉。
后来我做rescue就设计target 3'UTR的siRNA,然后直接用wt cDNA做rescue就可以了。
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t*x
13
我考过,一个硬疙瘩
不放油的面包是法棍,人家那个因为和面的时候筋度要求比馒头高,水分也高,烤的时
候面包表面还要喷水,所以表皮是酥的。
但是直接馒头的dough去烤就是个硬硬的疙瘩,法棍那种烘焙出来的面包香

【在 m******i 的大作中提到】
: :(
: 被打枪……
: 要进烤箱肯定是二次发酵法了。水量应该也会相应的多一点。我就是想知道不放油会有
: 什么效果~

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l*7
14
Great,
那如果批准之后,失业一段时间,在找到下家,也叫transfer么?还需要重新申请h1B
呢?万分感谢!!

【在 G******i 的大作中提到】
: 版主友情提示:
: H-1B批准之后就可以transfer,不需等到生效。
:
: 批准,在H1B生效前(10月以前),还可以换工作吗?如果换了工作后,新的雇主重新
: 提交H1B申请,审批会不会受到影响,因为上一个H1B还没生效就放弃了。

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b*8
15
有道理,学习了

siRNA

【在 w********r 的大作中提到】
: 你这个情况我觉得很难讲。
: 我以前做siRNA resistant的cDNA mutant,是根据SiRNA的序列,对应的每个codon都做
: silent mutation,绝大部分都work。直到有一次,虽然突变了,但是仍然可以被siRNA
: 干掉。
: 后来我做rescue就设计target 3'UTR的siRNA,然后直接用wt cDNA做rescue就可以了。

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m*i
16
:(
T_T

【在 t*****x 的大作中提到】
: 我考过,一个硬疙瘩
: 不放油的面包是法棍,人家那个因为和面的时候筋度要求比馒头高,水分也高,烤的时
: 候面包表面还要喷水,所以表皮是酥的。
: 但是直接馒头的dough去烤就是个硬硬的疙瘩,法棍那种烘焙出来的面包香

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G*i
17
请先考古吧
类似的问题本版很多
考完古你要是还不明白再来问
呵呵

h1B

【在 l******7 的大作中提到】
: Great,
: 那如果批准之后,失业一段时间,在找到下家,也叫transfer么?还需要重新申请h1B
: 呢?万分感谢!!

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l*1
18
Mark!
btw, if alternative splicing 3'UTR case might need double or multiple all 3
'UTR regions siRNA then it works
is it seems correct?

siRNA

【在 w********r 的大作中提到】
: 你这个情况我觉得很难讲。
: 我以前做siRNA resistant的cDNA mutant,是根据SiRNA的序列,对应的每个codon都做
: silent mutation,绝大部分都work。直到有一次,虽然突变了,但是仍然可以被siRNA
: 干掉。
: 后来我做rescue就设计target 3'UTR的siRNA,然后直接用wt cDNA做rescue就可以了。

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s*n
19
可能会偏干
但是要看具体的方子
你有兴趣可以看看这本书,laurel's kitchen bread book
全部都是100%全麦面包蛋糕的配方
里面有一款cottage cheese面团
750克全麦面粉只配2大勺的黄油
可是成品非常松软可口(cheese里面的油脂多哈)
但是蛋白质含量很高,所以营养蛮好的
也不太甜
她的配方我试了好多个了,都非常好,是我们家现在的大爱,赫赫
她开首就说,普通白面粉的方子,还有面点的做法
是不能简单地套用到全麦面团上的
全麦面团需要特殊的配方和做法
她的配方确实都很好吃。。。

【在 m******i 的大作中提到】
: :(
: T_T

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l*7
20
是精华 还是搜本版啊

【在 G******i 的大作中提到】
: 请先考古吧
: 类似的问题本版很多
: 考完古你要是还不明白再来问
: 呵呵
:
: h1B

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m*i
21
太赞了!!
我要去搞这本书!
我现在就是不用白面粉了的说~

【在 s**n 的大作中提到】
: 可能会偏干
: 但是要看具体的方子
: 你有兴趣可以看看这本书,laurel's kitchen bread book
: 全部都是100%全麦面包蛋糕的配方
: 里面有一款cottage cheese面团
: 750克全麦面粉只配2大勺的黄油
: 可是成品非常松软可口(cheese里面的油脂多哈)
: 但是蛋白质含量很高,所以营养蛮好的
: 也不太甜
: 她的配方我试了好多个了,都非常好,是我们家现在的大爱,赫赫

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t*n
22
up up!!!
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f*r
23
为啥非要做成团? 你擀薄一点扔进去不就烧饼了?

【在 m******i 的大作中提到】
: 感觉烤出来就是无油dinner roll啊……
: 有人试过没?没人试我下次试试……觉得超有意思……

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l*e
24
看着都觉得脸颊的肌肉发酸。。。
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e*n
25
做过。外表硬,内部水分锁住了。还可以,不是特好吃

【在 m******i 的大作中提到】
: 感觉烤出来就是无油dinner roll啊……
: 有人试过没?没人试我下次试试……觉得超有意思……

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c*e
26
而且是新疆烧饼。

【在 f*****r 的大作中提到】
: 为啥非要做成团? 你擀薄一点扔进去不就烧饼了?
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s*m
27
试过,成品很硬咬不动……
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