问下Baculovirius感染的Sf9细胞症状的问题 - 未名空间MITBBS历史存档

问下Baculovirius感染的Sf9细胞症状的问题# Biology - 生物学

N*L2013-04-01 07:04

1 楼

http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
EB总名额14万，实批139,302，少了698。
EB1总名额4万，实批25,229
EB2总名额4万，实批66,804，其中超额部分26,764是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点
EB3的名额。
EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
EB4总名额1万，实批6381，
EB5总名额1万，实批3463.
EB2C总名额2803，实批8257，拿到SO=5454
EB2I总名额2803，实批23997，拿到SO=21194
EB2CI总共拿到SO=26648，也就是说EB-1，3，4，5过来的26764中有116给了EB-2ROW，
以保证EB-2ROW ALL C，剩下的全给了EB-2CI。
EB2 ROW 实批 34550，数量相当可观，如果没有EB-1,4,5过来的名额，光靠EB-2自己的
4万，扣掉EB-2CI的名额，EB2-ROW是无法保持All C的。
EB3C总名额2503，实批2542，多拿39
EB3I总名额2803，实批4002，多拿1199，EB3-CI多拿部分应该是从EB3-ROW那里扣出来
的。
综上，EB-3 ROW最悲催，不仅给EB2-CI贡献2600,还给EB-3CI贡献1238，自己却还在慢
慢排期.菲墨情况还未分析。FB还未分析。

m*i2013-04-01 07:04

2 楼

当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
时侯就注定了的。
一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大
的激发了我们种菜的兴趣，一发不可收拾地在美国当起了农民，并把好多的朋友拖下了
水。
记得又一次朋友集会，大家少不了会互相交流些种菜的乐趣，一个同学给我们讲了个笑
话，说是他的一个朋友也迷上了种菜，可是老也种不好，就想到自己的老爸是种菜高手
，就立马给老爸打电话咨询，没想到问题还没问完，就听他老爸在电话那头咆哮到“我
让你出国搞科学研究，你怎么当上了农民呢？对不起国家对不起党啊。。。。。。”
哈哈哈哈，困死了，赶在活动草草结束之前把包子挣到手，呼呼去了

m*r2013-04-01 07:04

3 楼

最近在用invitrogen的bac to bac做表达，gene克隆到bacmid了之后，现在在转染（
transfection, 不知道翻译准不准）。前一次做的感染细胞放了一星期，monolayer都
要100%了，还没死，怀疑感染效率低。现在试第二次，已经转染后72-96小时了，发现
转染了bacmid的细胞除了长得比不加bacmid的对照长的慢点，好像很难看出来
invitrogen册子上说的细胞变大，出芽（这个我尤其难分辨）什么的（我平时也就用
200X inverted microscope观察），大家有比较明显的感染细胞和不感染细胞的对照图
推荐我瞧瞧么？我不想一直等到细胞dislodge了，或者裂解了才能知道感染成功没有。

H*i2013-04-01 07:04

4 楼

抽签四大国：梦加拉国、埃及、埃塞俄比亚、乌兹别克斯坦
贴数据应该感谢！
麻烦解释EB2要按照什么原则才能够吃到EB3的名额？

http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
EB总名额14万，实批139,302，少了698。
EB1总名额4万，实批25,229
EB2总名额4万，实批66,804，其中26000多是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点EB3的名
额。
EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
EB4总名额1万，实批6381，
EB5总名额1万，实批3463.
EB2C总名额2803，实批8257，拿到SO=5454
EB2I总名额2803，实批23997，拿到SO=21194
EB3C总名额2503，实批2542，多拿39
EB3I总名额2803，实批4002，多拿1199，EB3-CI多拿部分应该是从EB3-ROW那里扣出来
的。

【在 N*********L 的大作中提到】

: http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: EB总名额14万，实批139,302，少了698。
: EB1总名额4万，实批25,229
: EB2总名额4万，实批66,804，其中超额部分26,764是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点
: EB3的名额。
: EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
: EB4总名额1万，实批6381，
: EB5总名额1万，实批3463.

D*12013-04-01 07:04

5 楼

怎么又是丝瓜！ LOL

【在 m*****i 的大作中提到】

: 当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
: 阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
: 夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
: 妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
: 时侯就注定了的。
: 一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
: 自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
: 新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
: 瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
: 正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大

B*m2013-04-01 07:04

6 楼

转染后状态改变不大。
如果不确定的话，可以先表达GFP试试。
另外我的一个小tip：提bacmid的时候不需要用公司的盒子，提质粒的碱裂解法效果很
好。提取过程中动作轻柔点就行。

N*L2013-04-01 07:04

7 楼

按照原则是不应该EB-3给EB-2吃，但事实就是如此，奥本工作失误。

【在 H******i 的大作中提到】

: 抽签四大国：梦加拉国、埃及、埃塞俄比亚、乌兹别克斯坦
: 贴数据应该感谢！
: 麻烦解释EB2要按照什么原则才能够吃到EB3的名额？
:
: http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: EB总名额14万，实批139,302，少了698。
: EB1总名额4万，实批25,229
: EB2总名额4万，实批66,804，其中26000多是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点EB3的名

N*D2013-04-01 07:04

8 楼

丝瓜，只有丝瓜，是推动抢包子狂潮的唯一动力！

【在 D*******1 的大作中提到】

: 怎么又是丝瓜！ LOL

m*r2013-04-01 07:04

9 楼

多谢回复，我这次准备感染后120小时后把上清提了测下titer，不理想的话下次试试你
说的tip看能不能提高感染效率。

【在 B****m 的大作中提到】

: 转染后状态改变不大。
: 如果不确定的话，可以先表达GFP试试。
: 另外我的一个小tip：提bacmid的时候不需要用公司的盒子，提质粒的碱裂解法效果很
: 好。提取过程中动作轻柔点就行。

m*i2013-04-01 07:04

10 楼

老印EB1-ＥＢ5 的总和占14万的百分比有统计吗？

D*12013-04-01 07:04

11 楼

LOL

【在 N****D 的大作中提到】

: 丝瓜，只有丝瓜，是推动抢包子狂潮的唯一动力！

d*y2013-04-01 07:04

12 楼

看来没有HR 3012，烙印EB3真的是没有出头之日了。

【在 N*********L 的大作中提到】

: http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: EB总名额14万，实批139,302，少了698。
: EB1总名额4万，实批25,229
: EB2总名额4万，实批66,804，其中超额部分26,764是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点
: EB3的名额。
: EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
: EB4总名额1万，实批6381，
: EB5总名额1万，实批3463.

y*n2013-04-01 07:04

13 楼

是不是老开着灯照着，植物容易长不好？

【在 m*****i 的大作中提到】

: 当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
: 阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
: 夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
: 妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
: 时侯就注定了的。
: 一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
: 自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
: 新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
: 瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
: 正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大

d*y2013-04-01 07:04

14 楼

另外再说一点，估计明年夏天会开放EB2C的PD2010下半年的排期。对他们来讲，HR3012
到明年就没有太大意义了。

【在 N*********L 的大作中提到】

: http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: EB总名额14万，实批139,302，少了698。
: EB1总名额4万，实批25,229
: EB2总名额4万，实批66,804，其中超额部分26,764是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点
: EB3的名额。
: EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
: EB4总名额1万，实批6381，
: EB5总名额1万，实批3463.

H*92013-04-01 07:04

15 楼

强啊，还是丝瓜

【在 m*****i 的大作中提到】

: 当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
: 阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
: 夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
: 妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
: 时侯就注定了的。
: 一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
: 自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
: 新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
: 瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
: 正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大

N*g2013-04-01 07:04

16 楼

铁定超7%，吃SO是无上限的。

★ 发自iPhone App: ChineseWeb - 中文网站浏览器

【在 m***i 的大作中提到】

: 老印EB1-ＥＢ5 的总和占14万的百分比有统计吗？

p*y2013-04-01 07:04

17 楼

我怎么看着像豆苗呢

D*g2013-04-01 07:04

18 楼

能解释一下这个论断的来源嘛？

HR3012

【在 d*********y 的大作中提到】

: 另外再说一点，估计明年夏天会开放EB2C的PD2010下半年的排期。对他们来讲，HR3012
: 到明年就没有太大意义了。

h*e2013-04-01 07:04

19 楼

你朋友的老爸真是死脑筋一个

【在 m*****i 的大作中提到】

: 当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
: 阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
: 夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
: 妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
: 时侯就注定了的。
: 一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
: 自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
: 新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
: 瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
: 正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大

M*n2013-04-01 07:04

20 楼

FY2011的数据对分析FY2013的走势有多大的参考价值啊？

l*n2013-04-01 07:04

21 楼

我也觉得丝瓜怎么就变成了荷兰豆呢？

u*s2013-04-01 07:04

22 楼

EB2C今年批了8000多。。。。现在库存还8000多。。。那不是明年这个时候能批到2010
年5月.虽然SO会有变化，但是不至于significantly....

T*m2013-04-01 07:04

23 楼

哈哈，这个朋友的爸爸好玩！

记得又一次朋友集会，大家少不了会互相交流些种菜的乐趣，一个同学给我们讲了个笑
话，说是他的一个朋友也迷上了种菜，可是老也种不好，就想到自己的老爸是种菜高手
，就立马给老爸打电话咨询，没想到问题还没问完，就听他老爸在电话那头咆哮到“我
让你出国搞科学研究，你怎么当上了农民呢？对不起国家对不起党啊。。。。。。”

【在 m*****i 的大作中提到】

: 当年俺也跟许多人一样怀揣着美丽的梦想来到了美国。那是一个凉爽的夏日的夜晚，阵
: 阵的微风吹走了一路的旅途劳顿，兴奋的坐上了朋友的车，期盼着看到美丽的美国都市
: 夜景，可是一路上除了几盏昏暗的路灯外，连个霓虹灯都没见到。当时心里的感叹是，
: 妈呀，这哪是传说中的美国大城市，分明就是中国的农村嘛。俺在美国当农民就是那个
: 时侯就注定了的。
: 一次偶然的朋友聚会，让我们对种菜触电。朋友是一对来美多年的夫妇，有一个小小的
: 自留地，他们很陶醉地为每一个去他们家的客人介绍他家的菜园，并让我们品尝了他家
: 新鲜美味的蔬菜，临走还分享了一些种子给我们。第二年在反复咨询了朋友后把十棵丝
: 瓜种子全部种了下去，当年风调雨顺，没怎么管就获得大丰收。这丝瓜可真能结啊，真
: 正把我们全家和几个好朋友家都吃伤了，到后来朋友们都求我们别再送了。同时也大大

r*82013-04-01 07:04

24 楼

2类也有可能批3000个不到，这个会是3012后遗症。

2010

【在 u**********s 的大作中提到】

: EB2C今年批了8000多。。。。现在库存还8000多。。。那不是明年这个时候能批到2010
: 年5月.虽然SO会有变化，但是不至于significantly....

D*12013-04-01 07:04

25 楼

因为包子 LOL

【在 l*n 的大作中提到】

: 我也觉得丝瓜怎么就变成了荷兰豆呢？

N*L2013-04-01 07:04

26 楼

最新计算表明，墨西哥违反了7%上限。
EB+FB Mexico Grand Total 54079,其中FB2A 34363，FB2A的75%是exempt from
country limit，所以34363X75%=25772是不计入7%上限的。
54079-25772=28307
EB+FB总名额14万+22万6=36万6
单一国家上限= 7% X 366000 = 25620
墨西哥违法超过上限28307-25620 = 2687
中印也超过7%上限，但是是合法超过，因为中印EB2吃了SO，吃了SO就可以合法突破7%
上限，墨西哥没有吃SO，所以不可以突破7%上限，奥本给其开了小灶。受害的是其他FB
国家和EB3-ROW。

m*i2013-04-01 07:04

27 楼

知音

【在 D*******1 的大作中提到】

: 因为包子 LOL

s*d2013-04-01 07:04

28 楼

据此能不能让奥傻滚蛋？

FB

【在 N*********L 的大作中提到】

: 最新计算表明，墨西哥违反了7%上限。
: EB+FB Mexico Grand Total 54079,其中FB2A 34363，FB2A的75%是exempt from
: country limit，所以34363X75%=25772是不计入7%上限的。
: 54079-25772=28307
: EB+FB总名额14万+22万6=36万6
: 单一国家上限= 7% X 366000 = 25620
: 墨西哥违法超过上限28307-25620 = 2687
: 中印也超过7%上限，但是是合法超过，因为中印EB2吃了SO，吃了SO就可以合法突破7%
: 上限，墨西哥没有吃SO，所以不可以突破7%上限，奥本给其开了小灶。受害的是其他FB
: 国家和EB3-ROW。

m*i2013-04-01 07:04

29 楼

LOL LOL 眼泪都下来了
嘿，那是真的噢

【在 N****D 的大作中提到】

: 丝瓜，只有丝瓜，是推动抢包子狂潮的唯一动力！

f*u2013-04-01 07:04

30 楼

不能。

【在 s**d 的大作中提到】

: 据此能不能让奥傻滚蛋？
:
: FB

m*i2013-04-01 07:04

31 楼

嘿嘿，我们当时都笑翻了

【在 h******e 的大作中提到】

: 你朋友的老爸真是死脑筋一个

s*t2013-04-01 07:04

32 楼

Indian EB3 1199 extra, couple not Indian? Possible?

【在 N*********L 的大作中提到】

: http://www.travel.state.gov/visa/statistics/statistics_5641.htm
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: http://www.travel.state.gov/pdf/FY11AnnualReport-Table%20V-Part
: EB总名额14万，实批139,302，少了698。
: EB1总名额4万，实批25,229
: EB2总名额4万，实批66,804，其中超额部分26,764是EB1，4，5过来的，甚至吃了一点
: EB3的名额。
: EB3总名额4万，实批37,425，少分了大约2600，给EB2吃了。
: EB4总名额1万，实批6381，
: EB5总名额1万，实批3463.

m*i2013-04-01 07:04

33 楼

双簧包啊

【在 p*****y 的大作中提到】

: 我怎么看着像豆苗呢

m*i2013-04-01 07:04

34 楼

包子，包子。
这不现在就种得多样化了吗

【在 l*n 的大作中提到】

: 我也觉得丝瓜怎么就变成了荷兰豆呢？

m*i2013-04-01 07:04

35 楼

You got it. 可惜文字没有语气，当时说得可逗了，所有人全笑趴下了

【在 T*******m 的大作中提到】

: 哈哈，这个朋友的爸爸好玩！
:
: 记得又一次朋友集会，大家少不了会互相交流些种菜的乐趣，一个同学给我们讲了个笑
: 话，说是他的一个朋友也迷上了种菜，可是老也种不好，就想到自己的老爸是种菜高手
: ，就立马给老爸打电话咨询，没想到问题还没问完，就听他老爸在电话那头咆哮到“我
: 让你出国搞科学研究，你怎么当上了农民呢？对不起国家对不起党啊。。。。。。”

p*y2013-04-01 07:04

36 楼

哈哈这个有点意思

【在 m*****i 的大作中提到】

: You got it. 可惜文字没有语气，当时说得可逗了，所有人全笑趴下了