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哭求帮助：骨组织提totalRNA

哭求帮助：骨组织提totalRNA# Biology - 生物学

g*32013-07-02 07:07

1 楼

If yes, is there any hot gc, such as gas, amazon, visa/mc/AMEX gc? Just want
make some spending with my dusty citi dividend card :)
Thanks.

f*r2013-07-02 07:07

2 楼

各位大大，在下最近在成年小鼠颅骨中提RNA做real time PCR，碰到了很头疼的问题：
虽然产量不高，不过浓度和OD260/280看起来很正常，但是OD260/230 variation很大
，大都不到1.8，做内参18S波动也大到惨不忍睹。看看RNA的各项参数和18S的ct值，千
头万绪，看不出来什么东西影响了RNA的质量，或者RT-PCR。请帮忙出出主意，比如关
于提骨头totalRNA，做反转和real time PCR的trick，等等，跪谢！
ps 试剂部分，最近也有做细胞的提RNA》》real time PCR，看起来挺正常的，所以，
我个人觉得不是试剂的错儿。

c*82013-07-02 07:07

3 楼

day dream

D*s2013-07-02 07:07

4 楼

230的吸收主要受盐和多糖的影响，
你尝试提取的RNA再过一根新的Qiagen柱子纯化看看会不会好点
也就是你第一次抽出来之后不管质量怎么样，先用DNase I处理，
然后用新的Qiagen RNeasy的column纯化一下

【在 f*******r 的大作中提到】

: 各位大大，在下最近在成年小鼠颅骨中提RNA做real time PCR，碰到了很头疼的问题：
: 虽然产量不高，不过浓度和OD260/280看起来很正常，但是OD260/230 variation很大
: ，大都不到1.8，做内参18S波动也大到惨不忍睹。看看RNA的各项参数和18S的ct值，千
: 头万绪，看不出来什么东西影响了RNA的质量，或者RT-PCR。请帮忙出出主意，比如关
: 于提骨头totalRNA，做反转和real time PCR的trick，等等，跪谢！
: ps 试剂部分，最近也有做细胞的提RNA》》real time PCR，看起来挺正常的，所以，
: 我个人觉得不是试剂的错儿。