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(包子问)ex vivo培养的组织提RNA后,用什么内参比较靠谱?
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(包子问)ex vivo培养的组织提RNA后,用什么内参比较靠谱?# Biology - 生物学
i*k
1
什么传销,什么宣传,什么对人的忽悠和哄骗。这不都是商家惯用的伎俩吗?这次全都
给放在电视剧里了。虽然是胡歌演出来的。但是你们仔细看看这种社会职场尤其是诈骗
市场里这样的人和事儿真的是不少的。
尤其是说虫草的那块。真的是看着特别可笑。但是你们想想那些传销组织的人不也都是
这么给人洗脑的吗?
一直让你想象之后你的人生有多好。之后的未来给你画大饼。传销画完你自己因为每天
都在这种环境里所以就一直被熏陶,时间长了自然就习惯了这种说辞。为了你伟大的明
天自然要带着你的小伙伴来挣钱了。你那个时候想的肯定不是这东西坑人,而是这东西
有发展。
再来就是商场门口做宣传的。你说的天花乱坠的。人不给你钱你又能怎么样。觉得这种
做宣传的人给不了几个钱。其实人也在宣传的时候努力了喊了还给你拉了生意了。但是
公司的头头也好还有人也好就是这么想的。感觉做推广的人就这个价格。说白了就是卖
吆喝的你有什么能力。其实忘记了吆喝的价值和能力其实也是最高的。
反正越看猎场就越觉得这个社会在职场上的缩影就越具象化。在那个上面看到了很多以
前在国内我自己做工作的时候遇到的瓶颈。真的是挺心酸的。
所以这个剧目不错。真的要多看看。提醒一下自己。
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l*g
2
我现在在做些ex vivo的实验,就是把mouse的主动脉分离出来后,放在培养基里养三天
,同时加药。三天后收集样品提rna,然后profiling下各基因的表达,看是否和in
vitro的结果一致。
如果分离主动脉后立刻提rna,结果一直很好。但现在ex vivo养了几天后,碰到了些问
题。
1,培养几天后,能提出来的rna量急剧减少,感觉养几天后组织不是很健康的原因。少
归少,但还是够做rt之类的后续。
2,我通常用18S和gapdh做realtime pcr的内参。但郁闷的是,在加药处理的样品里,这
两个基因的表达也呼呼的往上升,甚至比要检测的其他基因升得都要高。以至于
normalize后,根本看不到变化,甚至是相反的变化。ps,在做rt的时候,每个样品我
都加了相同量的rna,按经验来说,内参应该非常接近,曲线几乎都重合在一起才对。
现求问怎么破?
我感觉技术上没什么问题,最简单的就是换一个比较stable的内参(尤其是心血管系统
内的)。
求有经验的推荐!一经验证work的话,双黄包奉上!
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g*n
3
咱们面试水平太差,根本都够不上猎场的级别,去面试职介所都不会有人要。哎,感叹
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