s*t
2 楼
我用的是iPhone6，家里人用的iPhone7，但是iPhone7的信号，时常还不如iPhone6，后
来说是硬件问题，就是因为苹果和高通的一些知识产权和专利纠纷，导致iPhone从7系
列开始，就从只用高通基带，变成了同时用高通和因特尔基带，结果信号就不行了。
后来iPhone8说是好转了，但是没有买8系列，再就是已经出了iPhone XS系列，又不喜
欢这个屏幕，打算明年看看新款，买个没有刘海屏和黑边的新款了。
基带导致的信号问题，因为太多人抱怨，所以新款应该解决了。
来说是硬件问题，就是因为苹果和高通的一些知识产权和专利纠纷，导致iPhone从7系
列开始，就从只用高通基带，变成了同时用高通和因特尔基带，结果信号就不行了。
后来iPhone8说是好转了，但是没有买8系列，再就是已经出了iPhone XS系列，又不喜
欢这个屏幕，打算明年看看新款，买个没有刘海屏和黑边的新款了。
基带导致的信号问题，因为太多人抱怨，所以新款应该解决了。
v*a
3 楼
最近做一个新gene的siRNA做不出，查阅相关paper都提到：The cells were incubated
in antibiotic-free medium for 24 h。我以前做都没有这步骤，只是在
transfection的时候才antibiotic-free。
请教高手这个跟我无法knock down有关系吗，为什么之前要24小时antibiotic-free？
谢谢！
in antibiotic-free medium for 24 h。我以前做都没有这步骤，只是在
transfection的时候才antibiotic-free。
请教高手这个跟我无法knock down有关系吗，为什么之前要24小时antibiotic-free？
谢谢！
a*n
4 楼
出生证，还有无犯罪记录？
【在 j****n 的大作中提到】
: 除了绿卡、护照以外，还需要带其他的文件吗？
【在 j****n 的大作中提到】
: 除了绿卡、护照以外，还需要带其他的文件吗？
o*r
5 楼
高通基带在新款会用吗
v*a
6 楼
自己顶一下
incubated
【在 v***a 的大作中提到】
: 最近做一个新gene的siRNA做不出，查阅相关paper都提到：The cells were incubated
: in antibiotic-free medium for 24 h。我以前做都没有这步骤，只是在
: transfection的时候才antibiotic-free。
: 请教高手这个跟我无法knock down有关系吗，为什么之前要24小时antibiotic-free？
: 谢谢！
incubated
【在 v***a 的大作中提到】
: 最近做一个新gene的siRNA做不出，查阅相关paper都提到：The cells were incubated
: in antibiotic-free medium for 24 h。我以前做都没有这步骤，只是在
: transfection的时候才antibiotic-free。
: 请教高手这个跟我无法knock down有关系吗，为什么之前要24小时antibiotic-free？
: 谢谢！
b*m
7 楼
别的神马也不需要。
【在 j****n 的大作中提到】
: 除了绿卡、护照以外，还需要带其他的文件吗？
【在 j****n 的大作中提到】
: 除了绿卡、护照以外，还需要带其他的文件吗？
U*C
8 楼
不会。
苹果为省钱，准备自己做基带。 有可能比Intel的还差。
【在 o********r 的大作中提到】
: 高通基带在新款会用吗
苹果为省钱，准备自己做基带。 有可能比Intel的还差。
【在 o********r 的大作中提到】
: 高通基带在新款会用吗
G*s
9 楼
同问。
我以前做过一次siRNA，根据一篇paper和公司寄来的instruction上面都没有提到
antibiotic-free medium。
我以前做过一次siRNA，根据一篇paper和公司寄来的instruction上面都没有提到
antibiotic-free medium。
m*g
10 楼
需要注意的就是别丢了绿卡，呵呵
j*n
11 楼
看你做reverse还是forward method了 通常无所谓提前一天放
r*d
12 楼
dont take it out every 20 mins, then you should be ok.
v*a
13 楼
自己在网上搜了一把，说使用antibiotic-free medium是为了减少cell death，还有
complex froming的时候也不能有antibiotic。
【在 G**********s 的大作中提到】
: 同问。
: 我以前做过一次siRNA，根据一篇paper和公司寄来的instruction上面都没有提到
: antibiotic-free medium。
complex froming的时候也不能有antibiotic。
【在 G**********s 的大作中提到】
: 同问。
: 我以前做过一次siRNA，根据一篇paper和公司寄来的instruction上面都没有提到
: antibiotic-free medium。
f*n
14 楼
裤衩缝个兜放进去，再封上。紧紧捂住。
v*a
15 楼
谢谢高手
【在 j******n 的大作中提到】
: 看你做reverse还是forward method了 通常无所谓提前一天放
【在 j******n 的大作中提到】
: 看你做reverse还是forward method了 通常无所谓提前一天放
f*f
16 楼
是的，抗生素一般跟干涉效率无关，无抗培养基只是为了减少细胞死亡，而且一般只是
lipofectamine 相关试剂。很多公司出的转染试剂，可以直接用含抗生素培养基，如
Hiperfect。即使是lipo，除基因本身外，影响cell death因素：如cell type，
density, etc. Lipo RNAimax也比lipo 2000效率高和毒性小。我一般用rnaimax直接用
含antibotics的medium。
【在 v***a 的大作中提到】
: 自己在网上搜了一把，说使用antibiotic-free medium是为了减少cell death，还有
: complex froming的时候也不能有antibiotic。
lipofectamine 相关试剂。很多公司出的转染试剂，可以直接用含抗生素培养基，如
Hiperfect。即使是lipo，除基因本身外，影响cell death因素：如cell type，
density, etc. Lipo RNAimax也比lipo 2000效率高和毒性小。我一般用rnaimax直接用
含antibotics的medium。
【在 v***a 的大作中提到】
: 自己在网上搜了一把，说使用antibiotic-free medium是为了减少cell death，还有
: complex froming的时候也不能有antibiotic。
v*a
17 楼
这个回答赞，多谢！
再请教一下高手，试了好几家公司的共8个siRNA duplex，我要看的gene都无法被
knockdown，查到的paper也都使用的我试的其中一家公司的pool，现在有点无计可施了
。RT-PCR和WB都看不到表达有下降。不知道哪儿出了问题。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 是的，抗生素一般跟干涉效率无关，无抗培养基只是为了减少细胞死亡，而且一般只是
: lipofectamine 相关试剂。很多公司出的转染试剂，可以直接用含抗生素培养基，如
: Hiperfect。即使是lipo，除基因本身外，影响cell death因素：如cell type，
: density, etc. Lipo RNAimax也比lipo 2000效率高和毒性小。我一般用rnaimax直接用
: 含antibotics的medium。
再请教一下高手，试了好几家公司的共8个siRNA duplex，我要看的gene都无法被
knockdown，查到的paper也都使用的我试的其中一家公司的pool，现在有点无计可施了
。RT-PCR和WB都看不到表达有下降。不知道哪儿出了问题。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 是的，抗生素一般跟干涉效率无关，无抗培养基只是为了减少细胞死亡，而且一般只是
: lipofectamine 相关试剂。很多公司出的转染试剂，可以直接用含抗生素培养基，如
: Hiperfect。即使是lipo，除基因本身外，影响cell death因素：如cell type，
: density, etc. Lipo RNAimax也比lipo 2000效率高和毒性小。我一般用rnaimax直接用
: 含antibotics的medium。
f*f
18 楼
拿一个干涉有效的positive control sirna检测，排除是否转染原因。
pool都不行的话，单个希望几乎没有，就只有换pool了。
【在 v***a 的大作中提到】
: 这个回答赞，多谢！
: 再请教一下高手，试了好几家公司的共8个siRNA duplex，我要看的gene都无法被
: knockdown，查到的paper也都使用的我试的其中一家公司的pool，现在有点无计可施了
: 。RT-PCR和WB都看不到表达有下降。不知道哪儿出了问题。
pool都不行的话，单个希望几乎没有，就只有换pool了。
【在 v***a 的大作中提到】
: 这个回答赞，多谢！
: 再请教一下高手，试了好几家公司的共8个siRNA duplex，我要看的gene都无法被
: knockdown，查到的paper也都使用的我试的其中一家公司的pool，现在有点无计可施了
: 。RT-PCR和WB都看不到表达有下降。不知道哪儿出了问题。
K*g
19 楼
是啊。如果你的转染试剂坏了，你死活也做不出来的。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 拿一个干涉有效的positive control sirna检测，排除是否转染原因。
: pool都不行的话，单个希望几乎没有，就只有换pool了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 拿一个干涉有效的positive control sirna检测，排除是否转染原因。
: pool都不行的话，单个希望几乎没有，就只有换pool了。
v*a
20 楼
转染试剂一般坏是因为什么原因？很容易发生吗？
最近siRNA做得很多，都是新买的一到马上就做。这次又换了一瓶新的，在等结果。
【在 K********g 的大作中提到】
: 是啊。如果你的转染试剂坏了，你死活也做不出来的。
最近siRNA做得很多，都是新买的一到马上就做。这次又换了一瓶新的，在等结果。
【在 K********g 的大作中提到】
: 是啊。如果你的转染试剂坏了，你死活也做不出来的。
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