请教蛋白样品保存是直接冷冻组织好还是冷冻lysis好？ - 未名空间MITBBS历史存档

请教蛋白样品保存是直接冷冻组织好还是冷冻lysis好？# Biology - 生物学

x*t2013-08-02 07:08

1 楼

遇到一个问题，大家帮我看看我想得对不对？
generate random number from a distribution which is skew to left.
假设生成了500个数据，Y_{500}.
现在我在每个数据上都乘上一个positive number,这些positive values都是从
lognormal distribution中生成的。但是每一个数据是从不同的lognormal dist生成
的（mean和SD都不同）。用X_{500}表示。
那么Y_500 * X_500有可能skew to left,也有可能skew to right.是不是这样？
谢谢了。

F*r2013-08-02 07:08

2 楼

这个问题困恼了俺很久。给娃枕什么样的枕头？娃两岁以前医生不让枕枕头。现在娃超
过两岁了，该给娃买什么样的枕头呢？去一般店里像walmart, target, Bed Bath
Beyonds买？还是什么特别的店？
求版上的妈妈指点一下？非常感谢。觉得娃现在喜欢枕头了。

I*82013-08-02 07:08

3 楼

刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
（公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
不发包子的情况下求个bless

g*y2013-08-02 07:08

4 楼

看到第十二集了，高妃还未与皇上谋面

s*x2013-08-02 07:08

5 楼

做了多年的protein，一直都是直接把sample冻在-80，用的时候再lysis。
以为这样组织起码没有受到大的破坏。
但是最近一个同事说应该先lysis，因为buffer里面有各种inhibitor，所以更保险。
不知道有没有哪位大牛知道到底哪种方式比较好。
有没有什么可靠的文献研究？
Thanks！

w*t2013-08-02 07:08

6 楼

我买的这个给儿子，号称2-5岁使用
好处是软，能压得扁
不好的是比较窄，不过我原来用宽的一样被他睡得到处滚
还有就是那个COVER是纯白色，无法吸引孩子喜欢它，我花了一个多月时间才让儿子接
受它
打算去扯点动物布，自己做COVER，但是沃尔玛都是卖的花布
http://www.walmart.com/ip/Relax-Right-Memory-Foam-Kids-Pillow/9

【在 F**********r 的大作中提到】

: 这个问题困恼了俺很久。给娃枕什么样的枕头？娃两岁以前医生不让枕枕头。现在娃超
: 过两岁了，该给娃买什么样的枕头呢？去一般店里像walmart, target, Bed Bath
: Beyonds买？还是什么特别的店？
: 求版上的妈妈指点一下？非常感谢。觉得娃现在喜欢枕头了。

f*u2013-08-02 07:08

7 楼

bless

v*a2013-08-02 07:08

8 楼

我是把组织直接冻-80的。sample lysate时间长了好多protein都降解了。
搭车问一个，lysate用过要放回-20，是直接放呢，还是先拿干冰冻了再放好？区别大
吗？

【在 s********x 的大作中提到】

: 做了多年的protein，一直都是直接把sample冻在-80，用的时候再lysis。
: 以为这样组织起码没有受到大的破坏。
: 但是最近一个同事说应该先lysis，因为buffer里面有各种inhibitor，所以更保险。
: 不知道有没有哪位大牛知道到底哪种方式比较好。
: 有没有什么可靠的文献研究？
: Thanks！

j*a2013-08-02 07:08

9 楼

pillow pet。高度正好。

【在 F**********r 的大作中提到】

: 这个问题困恼了俺很久。给娃枕什么样的枕头？娃两岁以前医生不让枕枕头。现在娃超
: 过两岁了，该给娃买什么样的枕头呢？去一般店里像walmart, target, Bed Bath
: Beyonds买？还是什么特别的店？
: 求版上的妈妈指点一下？非常感谢。觉得娃现在喜欢枕头了。

B*g2013-08-02 07:08

10 楼

bless

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

s*x2013-08-02 07:08

11 楼

我是直接冻回去。速冻可能好些吧。不过考虑都在0度放那么久了。。

D*e2013-08-02 07:08

12 楼

Ikea

l*g2013-08-02 07:08

13 楼

bless. Just curious why not land a job before resign.

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

F*r2013-08-02 07:08

14 楼

嗯，这个看起来不错。娃会不会roll off the pillow at night? 如果小的话，娃会滚
下来吧。有没有大一号的？
你在店里买的？还是网上？
谢谢你的回复。

【在 w********t 的大作中提到】

: 我买的这个给儿子，号称2-5岁使用
: 好处是软，能压得扁
: 不好的是比较窄，不过我原来用宽的一样被他睡得到处滚
: 还有就是那个COVER是纯白色，无法吸引孩子喜欢它，我花了一个多月时间才让儿子接
: 受它
: 打算去扯点动物布，自己做COVER，但是沃尔玛都是卖的花布
: http://www.walmart.com/ip/Relax-Right-Memory-Foam-Kids-Pillow/9

M*U2013-08-02 07:08

15 楼

cannot stand the current employer any more?

【在 l******g 的大作中提到】

: bless. Just curious why not land a job before resign.

F*r2013-08-02 07:08

16 楼

能不能说的详细一点？恕我愚钝。你说的是小动物的枕头吗？
在哪买？娃枕着硌不硌脖子？

【在 j*******a 的大作中提到】

: pillow pet。高度正好。

a*92013-08-02 07:08

17 楼

bless

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

F*r2013-08-02 07:08

18 楼

专门给小孩子用的？没看见啊。能详细说说？

【在 D***e 的大作中提到】

: Ikea

o*l2013-08-02 07:08

19 楼

bless
不过这样裸奔也行？
我一直以为180天后辞职必须有新工作呢

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

r*f2013-08-02 07:08

20 楼

小孩bedding set有pillow case呀。
我们不讲究，买的卡通图案的非全棉的，小孩都喜欢

【在 w********t 的大作中提到】

: 我买的这个给儿子，号称2-5岁使用
: 好处是软，能压得扁
: 不好的是比较窄，不过我原来用宽的一样被他睡得到处滚
: 还有就是那个COVER是纯白色，无法吸引孩子喜欢它，我花了一个多月时间才让儿子接
: 受它
: 打算去扯点动物布，自己做COVER，但是沃尔玛都是卖的花布
: http://www.walmart.com/ip/Relax-Right-Memory-Foam-Kids-Pillow/9

W*t2013-08-02 07:08

21 楼

够勇, good luck on the EAD man! (and the 485, too!!)
BTW, I don't think the lawyer/company can withdraw/reappeal the 485.

r*f2013-08-02 07:08

22 楼

什么店里都是好多pillow pet啊。
让小孩选花样吧，一次选一个，哈哈。

【在 F**********r 的大作中提到】

: 能不能说的详细一点？恕我愚钝。你说的是小动物的枕头吗？
: 在哪买？娃枕着硌不硌脖子？

r*u2013-08-02 07:08

23 楼

Bless

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

F*r2013-08-02 07:08

24 楼

恕我愚钝，pillow pet指的是小动物形状的枕头是吗？比如像小狗形状的，小熊形状的
？要是这样，睡觉枕着舒服吗？
还是枕套是小动物的？
有点不懂。

【在 r*f 的大作中提到】

: 什么店里都是好多pillow pet啊。
: 让小孩选花样吧，一次选一个，哈哈。

s*22013-08-02 07:08

25 楼

bless. brave man.

w*t2013-08-02 07:08

26 楼

沃尔玛网上买的，没有大号，6岁可以用普通枕头了吧？？我觉得还好，滚也无所谓，
这个基本什么枕头他都滚

【在 F**********r 的大作中提到】

: 嗯，这个看起来不错。娃会不会roll off the pillow at night? 如果小的话，娃会滚
: 下来吧。有没有大一号的？
: 你在店里买的？还是网上？
: 谢谢你的回复。

t*12013-08-02 07:08

27 楼

真勇敢。。。

w*t2013-08-02 07:08

28 楼

我看到的都是长毛的，觉得娃伏着睡对鼻子不好

【在 r*f 的大作中提到】

: 什么店里都是好多pillow pet啊。
: 让小孩选花样吧，一次选一个，哈哈。

l*32013-08-02 07:08

29 楼

so brave!! but I can understand.

r*f2013-08-02 07:08

30 楼

http://mypillowpets.com/

【在 F**********r 的大作中提到】

: 恕我愚钝，pillow pet指的是小动物形状的枕头是吗？比如像小狗形状的，小熊形状的
: ？要是这样，睡觉枕着舒服吗？
: 还是枕套是小动物的？
: 有点不懂。

t*12013-08-02 07:08

31 楼

虽然公司不能revoke，但是一旦他们跟移民局说了，移民局就知道你走了，有可能会
RFE你的employment status，结果你还没找到工作。就提个醒，你可能也知道了

w*t2013-08-02 07:08

32 楼

我知道这个很火，但真的大家都不介意那个长毛毛吗？
而且不是棉的，是化纤的

【在 r*f 的大作中提到】

: http://mypillowpets.com/

b*i2013-08-02 07:08

33 楼

Bless。

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

r*f2013-08-02 07:08

34 楼

厄，我家用的类似你家那种

【在 w********t 的大作中提到】

: 我知道这个很火，但真的大家都不介意那个长毛毛吗？
: 而且不是棉的，是化纤的

m*e2013-08-02 07:08

35 楼

bless

p*o2013-08-02 07:08

36 楼

我给我娃弄了个荞麦皮枕头

t*e2013-08-02 07:08

37 楼

bless

j*a2013-08-02 07:08

38 楼

原来只是给孩子们买来玩的，老二那时候还刚刚开始用枕头，反正睡觉到处游泳，也睡
不到枕头上几分钟，他要pillow pet我就让他用了。把小动物的头放在最床头的地方，
这样小动物的身体是平的，可以睡，而且高度正好。没想到他一用pillow pet就睡得特
别安稳，总是能一晚上睡在上面。而且他一直是仰睡的，所以我不担心化纤。（唯一的
缺点是早上头发很乱，哈哈。）
当然这个是因人而异啦。老大趴着睡，而且皮肤不好，我肯定不让她用pillow pet.

【在 w********t 的大作中提到】

: 我知道这个很火，但真的大家都不介意那个长毛毛吗？
: 而且不是棉的，是化纤的

m*t2013-08-02 07:08

39 楼

必须 bless

w*c2013-08-02 07:08

40 楼

关键是热，到时候捂得一头汗

【在 w********t 的大作中提到】

: 我看到的都是长毛的，觉得娃伏着睡对鼻子不好

z*c2013-08-02 07:08

41 楼

Bless

t*d2013-08-02 07:08

42 楼

就是身体卷起来是个小动物，铺开来是个枕头，小动物头在枕头正中央。基本每家店都
有这种枕头吧，但是MM买的时候还是要打开来看一下的，我们家有两个，一个是costco
的，很软，看上去厚厚的，宝宝枕上去，压的平平的，不会很高。另外一个，里面不知
道装的什么东西，压不平，这个就是平时宝宝拿着玩的。

【在 F**********r 的大作中提到】

: 恕我愚钝，pillow pet指的是小动物形状的枕头是吗？比如像小狗形状的，小熊形状的
: ？要是这样，睡觉枕着舒服吗？
: 还是枕套是小动物的？
: 有点不懂。

w*h2013-08-02 07:08

43 楼

Bless

az2013-08-02 07:08

44 楼

我就用普通的枕头给娃用，比较平的，这个有问题吗，枕头还有讲究啊。。。关键是买
了娃不一定要啊

【在 F**********r 的大作中提到】

: 这个问题困恼了俺很久。给娃枕什么样的枕头？娃两岁以前医生不让枕枕头。现在娃超
: 过两岁了，该给娃买什么样的枕头呢？去一般店里像walmart, target, Bed Bath
: Beyonds买？还是什么特别的店？
: 求版上的妈妈指点一下？非常感谢。觉得娃现在喜欢枕头了。

t*b2013-08-02 07:08

45 楼

bless.

l*e2013-08-02 07:08

46 楼

bless

y*m2013-08-02 07:08

47 楼

485 pending 180天后失业，是不是理论上out of status啦？

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

l*n2013-08-02 07:08

48 楼

bless, man

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

r*02013-08-02 07:08

49 楼

Bless

s*a2013-08-02 07:08

50 楼

bless

b*g2013-08-02 07:08

51 楼

bless
赞勇气裸奔

y*02013-08-02 07:08

52 楼

Bless

M*U2013-08-02 07:08

53 楼

My understanding is that Green Card is for future employment. As long as you
can find some permanent similar job later, it is fine.

【在 y*****m 的大作中提到】

: 485 pending 180天后失业，是不是理论上out of status啦？

x*n2013-08-02 07:08

54 楼

bless

s*62013-08-02 07:08

55 楼

Big bless

R*n2013-08-02 07:08

56 楼

bless

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

r*t2013-08-02 07:08

57 楼

我的理解是180天后可以换工作
只是180天后就辞职不知道了
只是都忍了这么多年了，再忍几个月都很困难吗。。。

b*g2013-08-02 07:08

58 楼

说不定还要再忍一两年吧

【在 r*****t 的大作中提到】

: 我的理解是180天后可以换工作
: 只是180天后就辞职不知道了
: 只是都忍了这么多年了，再忍几个月都很困难吗。。。

j*12013-08-02 07:08

59 楼

祝福。找个自己喜欢的工作。不用和那群捏着你的绿卡申请折磨你的王八蛋共事是一种
解脱。

s*p2013-08-02 07:08

60 楼

Bless

s*32013-08-02 07:08

61 楼

Big Bless~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~

s*82013-08-02 07:08

62 楼

bless!

a*42013-08-02 07:08

63 楼

这得多大的深仇大恨呀

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

p*82013-08-02 07:08

64 楼

a brave man!

t*r2013-08-02 07:08

65 楼

祝福

j*a2013-08-02 07:08

66 楼

i think i understand

【在 a*******4 的大作中提到】

: 这得多大的深仇大恨呀

j*a2013-08-02 07:08

67 楼

bless lz

【在 j*a 的大作中提到】

: i think i understand

A*a2013-08-02 07:08

68 楼

Bless
现在有啥updates？
也想辞职

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

w*h2013-08-02 07:08

69 楼

bless

w*62013-08-02 07:08

70 楼

wow, bless
but i wouldn't have done this: 裸奔

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

t*e2013-08-02 07:08

71 楼

bless

e*n2013-08-02 07:08

72 楼

理论上不是OOS。
USCIS的政策是发给你RFE的30天内必须回复，你只需证明你在那一刻有工作。既往不咎。
只有苦大仇深的才会裸本，我想，但是没这个胆。
问个问题，这种情况（跟地主翻脸）是不是应该立即打电话给USCIS要求撤销该律师的G
-28（终止代表你的485）。这样它完全碰不了你的485了。

【在 y*****m 的大作中提到】

: 485 pending 180天后失业，是不是理论上out of status啦？

c*e2013-08-02 07:08

73 楼

Bless 一下

c*22013-08-02 07:08

74 楼

the worse case senario is employer withdraws I-140 leading to I-485
wrongfully denied. And you have to file I-290B to correct this mistake.
This happened to several people around 2010-11.
However, if you don't have a new job meeting AC21 requirements, the appeal
won't go through.

c*e2013-08-02 07:08

75 楼

赞勇气！！！
BIG BLESS

【在 I****8 的大作中提到】

: 刚递交了辞职信，雇主律师打来电话说辞职就会撤销我的绿卡。我说撤吧。
: （公司律师搞不清楚绿卡还是140什么的，所以说会撤销我的绿卡申请）
: 丫还说不撤销是不行的，非法什么的。
: 昨天刚寄出EAD/AP renew, 希望不会有太多麻烦。
: 工作下家还没找到，我是准备裸奔的。
: 不发包子的情况下求个bless

I*82013-08-02 07:08

76 楼

谢谢大家的bless，没想到这贴又被顶上去了，我来update一下吧。
其实也没什么好update的，什么事情也没有发生。
仍然在等EAD/AP
我没再跟公司律师联系，希望他们把这事儿给忘了，呵呵
没有收到RFE什么的。
就像楼上几位所说，尽量不要裸奔，这样太冒险。我的情况特殊，我总能找到比我现在
差的工作，所以我不担心RFE，工作性质也不可能变。只是，我在找比我现在好的工作
，还没找到。所以我是有backup plan的。
我也没有特别苦大仇深，只是不愿意再等下去了。这事情我计划了1－2年了。
我建议，08年PD的再等等，09年自己看着办，10年后的PD可以有一些计划。