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问题请教：如何比较某个受体在不同物种之间表达的差异？

问题请教：如何比较某个受体在不同物种之间表达的差异？# Biology - 生物学

g*y2013-09-05 07:09

1 楼

还有pending。
是先AC后pending还是可以直接pending？

o*u2013-09-05 07:09

2 楼

现在实验有个问题请教大家：某受体已经知道在所有哺乳动物都表达，现在我比较感兴
趣它在人和老鼠之间表达，或者是对其内源配体的结合活性上有无差异，该如何设计实
验来证明？我自己能想到的是用传统的Western 或FACS来半定量，但问题是如何区分抗
体结合活性的差异？求教大家，谢谢了。

i*l2013-09-05 07:09

3 楼

1. normalized mRNA or protein levels in different species:
qpcr for mRNA (easier &faster)
WB for protein
using actin for normalization
2. in vitro expression of target homologs from species and campare the
binding efficiency side by side

【在 o******u 的大作中提到】

: 现在实验有个问题请教大家：某受体已经知道在所有哺乳动物都表达，现在我比较感兴
: 趣它在人和老鼠之间表达，或者是对其内源配体的结合活性上有无差异，该如何设计实
: 验来证明？我自己能想到的是用传统的Western 或FACS来半定量，但问题是如何区分抗
: 体结合活性的差异？求教大家，谢谢了。

g*n2013-09-05 07:09

4 楼

这个比较能说明什么问题？

【在 o******u 的大作中提到】

o*u2013-09-05 07:09

5 楼

谢谢icool的回复。WB 的问题是我们无法确定不同的抗体对于不同物种来源的蛋白的结
合活性。譬如同一样品，用不同公司的抗体作出的WB信号有时差异很大，即使loading
control是一致的。就是我能找到可以同时识别这两种物种的蛋白的抗体，我也无法保
证抗体对于该受体具有相同的结合活性。想过用qPCR来半定量，但如何保证引物具有相
似的扩增效果？
回复ganggan，我比较感兴趣某种疾病在人和动物的发病原因是否与这受体表达有关。