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求助,western 结果# Biology - 生物学
c*e
1
2003年 小硕毕业去一个小公司A。
2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
办。
2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收
拾行装,擦去眼泪,掩埋好尸体,准备回国。
2009年 年初和A公司同事告别,被告知A公司老板听说我被雷,愿意OFFER SENIOR
POSITION,欣喜之余,假装清高告之如果不能在1个半月之内FILE PERM,我回去也没有
用。老板同意,1个半月之内FILE了PERM,尼玛我心里骂“你大爷的!!!以前两年都
没有FILE,现在不到两个月就FILE了”
2010年 成功拿到 H1B 7 YEAR EXTENSION,并拿到了I140.排期09年2月
2011年 等!
2012年 公司律师装傻不给办485,遂威胁离开,公司马上出钱FILE了485,拿到了EAD/
AP
2013年 照了照镜子,尼玛尘满面,鬓如霜了已经!!!
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q*n
2
先心疼一下张若昀唐艺昕花了也是白花的热搜费,被实红的双宋和范李轮番吊打,热度
抢的一毛不剩。
再感慨一句,你冰冰就是你冰冰。
永远都能找到机会,然后稳准狠的艹出一波最大的热度。
比如,她在今天选择公开和李晨分手。
这个操作真的牛叉到爆炸,2019年截止至今,再没有比今天更好的官宣时机了。
首先呢,这是充斥着结婚(张若昀唐艺昕)和离婚(宋仲基宋慧乔),感情战混乱的一
天,她的分手消息夹杂其中,显得既合群又出挑,比之前几次试水复出安全的多。
其次呢,她的分手消息在双宋离婚刷屏后推出,不但成功降低了抢头条和热度的观感,
还让今天变得更加戏剧性,最大幅度的勾起了吃瓜群众的兴致。
你们看,是不是这个道理?
从公开恋情到官宣分手,这一对都非常有仪式感,而且画风也很明显的是走“再见亦是
朋友”的体面路线,不同于那边暗撕的双宋。
知道是为了押韵,还是想吐槽一句,你们还是你们,你们分手干啥?
两人感情似乎是从范冰冰税务风波开始就不断有情变传闻,当然中间他们还低调秀了几
回恩爱,直到19年1月,李晨被爆退出了和范冰冰合资的公司,夫妻店结束之后,两人
就独来独往,也许那时候就分手了吧,只不过没有好时机公布而已。
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U*8
3
箭头处的蛋白带怎么拖尾啊?什么原因?loading样品太多?还是被旁边的样品挤的?
还是处理不完全?谢谢
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f*u
4
Re
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o*a
5
是的,跟东风趁机复出!
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z*8
6
条带胖瘦不一,是互相挤压所致。
有拖尾应该不是,觉得是loading太多或者上层胶太少?
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m*a
7
恭喜了,终于熬出来了啊。这个肯定得发包子啊,吃!
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S*s
8
盐浓度不一样。
1,3
2.4
不同的样品的buffer调成一样的。
S100, P1, P100 fraction放一起跑的时候就会这样。
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c*e
9
这叫熬出来了?不还没绿么!!!

【在 m**a 的大作中提到】
: 恭喜了,终于熬出来了啊。这个肯定得发包子啊,吃!
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d*m
10
见过最难看的western条带了,哈哈
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t*r
11
可怜的人。祝你早日拿到绿卡!
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a*n
12
搭车问一下,有时候高分子量的蛋白条带不均匀或者不直是什么原因?
另外,高分子量的蛋白(200KD左右)如何做到转膜效率一致br />
多谢!

【在 U**8 的大作中提到】
: 箭头处的蛋白带怎么拖尾啊?什么原因?loading样品太多?还是被旁边的样品挤的?
: 还是处理不完全?谢谢

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r*r
13
每个人都有一部血泪史啊

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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s*i
14
用梯度胶会不会好些?转膜效率好像也跟胶的浓度相关

【在 a*****n 的大作中提到】
: 搭车问一下,有时候高分子量的蛋白条带不均匀或者不直是什么原因?
: 另外,高分子量的蛋白(200KD左右)如何做到转膜效率一致br />
: 多谢!

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b*m
15
唉。
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s*i
16
个人觉得是loading样品的时候体积不同导致的,也有可能是样品中蛋白浓度不同导致
。体积小的可以用1xloading buffer补足。

【在 U**8 的大作中提到】
: 箭头处的蛋白带怎么拖尾啊?什么原因?loading样品太多?还是被旁边的样品挤的?
: 还是处理不完全?谢谢

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u*r
17
re

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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d*0
18
胶做得貌似也有问题
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r*u
19
re
早日拿到卡

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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R*g
20
Overloaded.
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M*O
21
pat pat

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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k*n
22
蛋白或盐浓度差异很大导致的
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c*s
23
祝早日拿卡!
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m*0
24
蛋白没有处理好 有的蛋白没有变成线性
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C*8
25
安慰一下。
雨后可能有彩虹!

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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j*l
26
二当家,你为什么说“可能”?
我的经历也很悲惨:A公司答应办,拖着一直不办;跳到B公司答应给办,拖着一直不办
;跳到c公司答应给办,拖着一直不办;跳到D公司答应给办,拖着一直不办;H1b6年到
期前D公司终于给办了。
nnd 美国这些破烂公司不把你的6年h1b耗完再办绿卡都不好意思和隔壁公司打招呼。

【在 C*****8 的大作中提到】
: 安慰一下。
: 雨后可能有彩虹!

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a*a
27
美国是奴隶资本主义,奴隶制度根深蒂固,H1B是奴隶制度的衍生物。

【在 j******l 的大作中提到】
: 二当家,你为什么说“可能”?
: 我的经历也很悲惨:A公司答应办,拖着一直不办;跳到B公司答应给办,拖着一直不办
: ;跳到c公司答应给办,拖着一直不办;跳到D公司答应给办,拖着一直不办;H1b6年到
: 期前D公司终于给办了。
: nnd 美国这些破烂公司不把你的6年h1b耗完再办绿卡都不好意思和隔壁公司打招呼。

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D*I
28
"2012年 公司律师装傻不给办485"什么情况?
什么情况下可以FILE 485? 要依PD 等EB2 名额吗?还是140批了就能 FILE 485?
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d*p
29
485和公司无关,如果你想办,自己交就是了,你想省钱让公司律师给办,那么被拖点
时间也正常啊
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t*l
30
终于熬到头了,我还没办呢!比你惨。人生有时候真不知道会怎么样。
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i*s
31
我也不明白。
我140在2010批了,律师说因为没名额/排期的问题,要等可能好几年。485一直也没递
交。
递交485应该由名额/排期决定的,而不是140批了之后就可以递交吧? 难道我的律师和
我的理解都有错误?

"2012年 公司律师装傻不给办485"什么情况?
什么情况下可以FILE 485? 要依PD 等EB2 名额吗?还是140批了就能 FILE 485?

【在 d*******p 的大作中提到】
: 485和公司无关,如果你想办,自己交就是了,你想省钱让公司律师给办,那么被拖点
: 时间也正常啊

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Y*o
32
大难不死,必有后福!
avatar
G*r
33
Bless楼主早日拿到绿卡
avatar
g*n
34
还要坐一年移民监
avatar
j*s
35
LZ的口吻很好玩,恭喜!
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c*a
36
谢谢楼主在这个寒冷的冬天给我们带来温暖.

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

avatar
c*e
37
这个是我想让公司花钱办,因为以前他们承诺过给办,结果2012年初排期到了以后一直不
办直到我催促。

【在 D*****I 的大作中提到】
: "2012年 公司律师装傻不给办485"什么情况?
: 什么情况下可以FILE 485? 要依PD 等EB2 名额吗?还是140批了就能 FILE 485?

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l*a
38
140批了可以跳了
什么专业的?还等啥呢

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

avatar
c*d
39
bless~~~
一定会拿到!很快会拿到!!必须要拿到!!!
avatar
s*s
40
一声叹息,希望以后好运吧
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m*t
41
bless!
排期跟楼主同一个月
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s*3
42
真的挺坎坷,bless~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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q*i
43
bless
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p*e
44
bless to us a.......life is not easy
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t*e
45
跟你很象。2002-3参加革命,长征啊抗战的,2008年倒是找到了工作,h1b被audit,
害得绿卡晚了,还是EB3, 2012小放水时正在新工作。汪洋兴叹。现140正在办理中。
孩子都13了,现在不敢得罪,尼玛等18岁后给老子办移民巴。

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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S*C
46
你2003工作,只错过了一次大潮,好歹已经拿到EAD,
我是2004开始工作,错过了两次大潮,现在连485都还没交,EAD的影子都还没见着,不
是更惨。

【在 c*****e 的大作中提到】
: 2003年 小硕毕业去一个小公司A。
: 2004年 和公司打招呼自己找律师办绿卡,马上要FILE,公司换头,说必须由公司律师
: 办。
: 2005年 给公司律师发EMAIL打电话均被拒绝直接联系,找HR,HR说律师正在办。
: 2006年 尼玛办了两年连PERM都没有FILE,遂毅然离开公司,去了大公司B,虽然A公司
: 答应马上FILE PERM,我说去你妈的,我不需要!!!
: 2007年 07大潮,B公司的律师事务所因为作假被移民局调查,所有经过这个律师事务
: 所的PERM全部被AUDIT。大潮来临我仰天长叹.
: 2008年 PERM一直在AUDIT 状态, 08年12月,金融风暴波及B公司,导致B公司关闭地
: 区OFFICE,所有人全部裁员,当然会有我。。当时离我H1B 第六年只有两个月时间。收

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c*e
47
唉,都是命。。。。



【在 t***e 的大作中提到】
: 跟你很象。2002-3参加革命,长征啊抗战的,2008年倒是找到了工作,h1b被audit,
: 害得绿卡晚了,还是EB3, 2012小放水时正在新工作。汪洋兴叹。现140正在办理中。
: 孩子都13了,现在不敢得罪,尼玛等18岁后给老子办移民巴。

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c*e
48
你的确比我惨,不过你排期也还好,BLESS....

【在 S**********C 的大作中提到】
: 你2003工作,只错过了一次大潮,好歹已经拿到EAD,
: 我是2004开始工作,错过了两次大潮,现在连485都还没交,EAD的影子都还没见着,不
: 是更惨。

avatar
H*G
49
比你还掺, 说不得
----
cocaine (cocaine), 信区: EB23
标 题: 来比比惨
avatar
c*e
50
为啥说不得?说吧,面对惨淡的人生,直面淋漓的鲜血。。。

【在 H**G 的大作中提到】
: 比你还掺, 说不得
: ----
: cocaine (cocaine), 信区: EB23
: 标 题: 来比比惨

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w*1
51
祝早日拿卡!
avatar
c*l
52
bless!
avatar
i*7
53
同惨同惨。。。我连perm都还没有交呢。。。
哎,TM的在美国,非法移民过的都比我们遵纪守法的过的好。。。

【在 S**********C 的大作中提到】
: 你2003工作,只错过了一次大潮,好歹已经拿到EAD,
: 我是2004开始工作,错过了两次大潮,现在连485都还没交,EAD的影子都还没见着,不
: 是更惨。

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c*t
54
相对lz的排期,这速度不慢了
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l*g
55
什么是法? 还不是人订的? 这移民法早过时了
有钱有势就可以修改法律
事在人为啊!

【在 i******7 的大作中提到】
: 同惨同惨。。。我连perm都还没有交呢。。。
: 哎,TM的在美国,非法移民过的都比我们遵纪守法的过的好。。。

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