表达质粒pSC101温敏型的问题求教# Biology - 生物学
H*1
1 楼
最近想用pSC101质粒，发现有温敏型的质粒pSC101ts，常用于基因编辑后用高温消除
pSC101质粒。
我想了解一下哪些突变造成了温敏型。在温敏型pKD46质粒和原始pSC101比较序列，发
现在ori位置有个NotI位点的插入，是否是造成温敏型的原因。另外，在Rep101有两个
碱基序列不一致的地方（原始质粒的碱基6042 G/A、碱基6137 C/T和Rep101编码区后面
的碱基6299 G/C），在pKD46中，CGT编码R257而原始pSC101是CAT编码H257，有文章说
是原始质粒测序有错误，应该是如pKD46质粒中的CGT编码R257 （碱基6042 G/A）。另
外一处是pKD46的Y289（TAT密码子，碱基6137 C/T），而原质粒是H289（CAT密码子）
。有人说这个突变造成pKD46成温敏型的原因。在Rep101之后还有一个点突变，原始质
粒的G突变成温敏型质粒的C （碱基6299 G/C）。
感谢有经验的同学指教。谢谢。
pSC101质粒。
我想了解一下哪些突变造成了温敏型。在温敏型pKD46质粒和原始pSC101比较序列，发
现在ori位置有个NotI位点的插入，是否是造成温敏型的原因。另外，在Rep101有两个
碱基序列不一致的地方（原始质粒的碱基6042 G/A、碱基6137 C/T和Rep101编码区后面
的碱基6299 G/C），在pKD46中，CGT编码R257而原始pSC101是CAT编码H257，有文章说
是原始质粒测序有错误，应该是如pKD46质粒中的CGT编码R257 （碱基6042 G/A）。另
外一处是pKD46的Y289（TAT密码子，碱基6137 C/T），而原质粒是H289（CAT密码子）
。有人说这个突变造成pKD46成温敏型的原因。在Rep101之后还有一个点突变，原始质
粒的G突变成温敏型质粒的C （碱基6299 G/C）。
感谢有经验的同学指教。谢谢。