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预测的miRNA target protein,处理之后发现蛋白不下降,反而明显增加了
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m*n
2
预测的miRNA target protein,处理之后发现蛋白不下降,反而明显增加了
有啥可能性?
第一次做,miRNA 终浓度用到了20nM
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R*n
4
Very normal, hehe
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m*n
5
啊,very normal
请说些潜在可能吧,看3UTR target site 还挺保守的
结果意料之外,提高了估计2-3倍。。。
太意外了

【在 R****n 的大作中提到】
: Very normal, hehe
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R*n
6
computation can't predict everything. you are expecting 80-90% wrong pairs
from the pure computation approach.
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m*n
7
这个理解,所以还从功能上看看两者功能是不是相反才选的
结果令人意外
开始还在想offtaget,或者其他蛋白的影响
不知道这个浓度是不是太高了
记得版上有人用siRNA也遇到相同的问题,虽然siRNA和miRNA机制不一样

【在 R****n 的大作中提到】
: computation can't predict everything. you are expecting 80-90% wrong pairs
: from the pure computation approach.

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c*b
8
miRNA增强translation是已经报道过的吧

【在 m*******n 的大作中提到】
: 预测的miRNA target protein,处理之后发现蛋白不下降,反而明显增加了
: 有啥可能性?
: 第一次做,miRNA 终浓度用到了20nM

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m*n
9
还有这个说法?
能不能给个文献链接,多谢啊
这次增强还挺明显的
重复一下,要是真有这种说法
继续往下做过luciferase report看看是不是这样的

【在 c********b 的大作中提到】
: miRNA增强translation是已经报道过的吧
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m*n
10
要是真是miRNA增强translation的
一定上来发包子
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c*b
11
不要太多。最早好像是一个08年的nature,找不到了。你自己在下面几个里面的ref里
面找。
http://www.nature.com/srep/2012/121113/srep00842/full/srep00842
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18498749
http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.p
http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.p

【在 m*******n 的大作中提到】
: 还有这个说法?
: 能不能给个文献链接,多谢啊
: 这次增强还挺明显的
: 重复一下,要是真有这种说法
: 继续往下做过luciferase report看看是不是这样的

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m*n
12
5’UTR的确找到报道的了
Mol Cell. 2008 May 23;30(4):460-71. doi: 10.1016/j.molcel.2008.05.001.
MicroRNA-10a binds the 5'UTR of ribosomal protein mRNAs and enhances their
translation
不知道有没有binding在3’UTR的报道
多谢啦

【在 c********b 的大作中提到】
: miRNA增强translation是已经报道过的吧
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c*b
15
第一篇是这个: http://www.sciencemag.org/content/318/5858/1931.abstract
在这之前有人就在会议上报告了,圈内大佬也是和你一样的态度:没有mechanism就是
扯淡,知道这位大牛,诺奖得主夫人发了文,才有后面的文章出来。
come on,science本身就不能证明只能证伪,这是一个思路,没有证伪前说不定有用呢?

【在 c**A 的大作中提到】
: 基本上都是扯淡。。。
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u*1
16
predicted miRNA target实在是太多的false positive了;TF binding也是一样
而且我记得在好几年前miRNA bind 3'UTR to suppress mRNA expression的经典theory
就被颠覆了,miRNA可以bind到5‘UTR,CDS,intron,intergenic等等,可以increase
可以decrease表达量,这种研究应该太多了吧
现在都没人单纯做miRNA了吧?都是做lincRNA,或者miRNA和TF搅合到一起的复杂机制
。。。

【在 m*******n 的大作中提到】
: 预测的miRNA target protein,处理之后发现蛋白不下降,反而明显增加了
: 有啥可能性?
: 第一次做,miRNA 终浓度用到了20nM

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m*n
17
估计纯miR是挺少的
当然要结合其他的,不然是有点小儿科了

theory
increase

【在 u*********1 的大作中提到】
: predicted miRNA target实在是太多的false positive了;TF binding也是一样
: 而且我记得在好几年前miRNA bind 3'UTR to suppress mRNA expression的经典theory
: 就被颠覆了,miRNA可以bind到5‘UTR,CDS,intron,intergenic等等,可以increase
: 可以decrease表达量,这种研究应该太多了吧
: 现在都没人单纯做miRNA了吧?都是做lincRNA,或者miRNA和TF搅合到一起的复杂机制
: 。。。

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l*1
18
RE LZ
Did you note that some organism, anti-sense RNA likes RNAi can assist target
protein trans-splicing.
if not , pls go to one
2011 PhD dissertation of Université de Montréal
by Yan YF
pdf web link:
HTTPS double dot //papyrus.bib.umontreal.ca/xmlui/bitstream/handle/1866/5423
/Yan_Yifei_2011_memoire.pdf?sequence=5
its pp24:
>Does anti-sense mRNA assist trans-splicing?
A mechanism was recently identified in the ciliate Oxytricha trifallax
where larger RNA molecules are used as templates to direct the assembly
process of genomic DNA sequences [63]. Such long RNA template could also be
present
in D. papillatum but to direct the assembly of RNA modules. Alternatively,
Diplonema trans-splicing may be directed by small guide RNA (gRNA) in a way
similar to
mitochondrial RNA editing in kinetoplastids.
or
PMID 18046331
Nature, 451: 153-158. (2008)
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18046331
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