i*l
2 楼
【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
（从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
标题：她们出国前面临的最严峻问题
首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
lz有几个朋友收到国外读研offer了，
她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
有的以前有过男朋友但是没发展通透……
所以她们现在面临的重大问题是，怕国外男生见红后吓到然后认为她们不正常……目前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
谱，自己解决又不甘心
好像没啥办法哈
国外的妈妈应该不会要这样的吧……
发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
（从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
标题：她们出国前面临的最严峻问题
首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
lz有几个朋友收到国外读研offer了，
她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
有的以前有过男朋友但是没发展通透……
所以她们现在面临的重大问题是，怕国外男生见红后吓到然后认为她们不正常……目前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
谱，自己解决又不甘心
好像没啥办法哈
国外的妈妈应该不会要这样的吧……
g*5
3 楼
想用talen技术deletion一个基因内含子的一段序列，50-100bp,
是不是要用两对talen质粒？如何设计？online的网站好像都是对外显子的？
我市菜鸟，请问addgene那个kit比较好？
如果找公司做，那家好些？费用呢？有人有经验吗?谢谢
是不是要用两对talen质粒？如何设计？online的网站好像都是对外显子的？
我市菜鸟，请问addgene那个kit比较好？
如果找公司做，那家好些？费用呢？有人有经验吗?谢谢
i*z
4 楼
喜庆有鱼！
【在 i***z 的大作中提到】
: 逛了很多次本版。支持一下。没假，下班后做的，初一还要上班的，
【在 i***z 的大作中提到】
: 逛了很多次本版。支持一下。没假，下班后做的，初一还要上班的，
D*t
5 楼
男人找不到，黄瓜还找不到吗
前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
【在 i******l 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
: 发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
: 标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
: （从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
: 标题：她们出国前面临的最严峻问题
: 首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
: lz有几个朋友收到国外读研offer了，
: 她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
: 有的以前有过男朋友但是没发展通透……
前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
【在 i******l 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
: 发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
: 标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
: （从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
: 标题：她们出国前面临的最严峻问题
: 首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
: lz有几个朋友收到国外读研offer了，
: 她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
: 有的以前有过男朋友但是没发展通透……
l*y
6 楼
现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
【在 g*********5 的大作中提到】
: 想用talen技术deletion一个基因内含子的一段序列，50-100bp,
: 是不是要用两对talen质粒？如何设计？online的网站好像都是对外显子的？
: 我市菜鸟，请问addgene那个kit比较好？
: 如果找公司做，那家好些？费用呢？有人有经验吗?谢谢
【在 g*********5 的大作中提到】
: 想用talen技术deletion一个基因内含子的一段序列，50-100bp,
: 是不是要用两对talen质粒？如何设计？online的网站好像都是对外显子的？
: 我市菜鸟，请问addgene那个kit比较好？
: 如果找公司做，那家好些？费用呢？有人有经验吗?谢谢
g*A
7 楼
不错
l*e
8 楼
organic的不多了
【在 D*********t 的大作中提到】
: 男人找不到，黄瓜还找不到吗
:
: 前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
【在 D*********t 的大作中提到】
: 男人找不到，黄瓜还找不到吗
:
: 前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
J*n
9 楼
正解
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
R*a
10 楼
为啥需要organic的？
难道怕生下来畸形黄瓜？
【在 l******e 的大作中提到】
: organic的不多了
难道怕生下来畸形黄瓜？
【在 l******e 的大作中提到】
: organic的不多了
g*5
11 楼
请问crispr的offtarget 如何？
如果一对能小些吗？谢谢。
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
如果一对能小些吗？谢谢。
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
F*D
12 楼
没事，上面套一个durex，一样好用
【在 l******e 的大作中提到】
: organic的不多了
【在 l******e 的大作中提到】
: organic的不多了
g*5
13 楼
还有一个问题，正常人这个片段是50bp左右，病人的就要1500-3000bp了。
一对crispr能把1500bp敲掉吗？
谢谢。
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
一对crispr能把1500bp敲掉吗？
谢谢。
【在 l***y 的大作中提到】
: 现在都用crispr了，你这个size上个nickase用一对gRNA正好
i*a
14 楼
出国前要籌備的事真多
前没有合适的奉献
对象，随便找也不靠
【在 i******l 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
: 发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
: 标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
: （从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
: 标题：她们出国前面临的最严峻问题
: 首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
: lz有几个朋友收到国外读研offer了，
: 她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
: 有的以前有过男朋友但是没发展通透……
前没有合适的奉献
对象，随便找也不靠
【在 i******l 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
: 发信人: SwalOlow (飞燕), 信区: WaterWorld
: 标 题: 女生出国前的烦恼（转自豆瓣）
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 6 12:36:15 2011, 美东)
: （从豆瓣上转来的，看看国内女生的观念）
: 标题：她们出国前面临的最严峻问题
: 首先，此贴非交友贴……纯属替朋友感到困惑
: lz有几个朋友收到国外读研offer了，
: 她们之前有的一直奋发图强，没参与早恋、正常恋以及晚恋，
: 有的以前有过男朋友但是没发展通透……
T*u
15 楼
两对，四个gRNA
没有一点问题，我们老鼠都做出来了。
【在 g*********5 的大作中提到】
: 还有一个问题，正常人这个片段是50bp左右，病人的就要1500-3000bp了。
: 一对crispr能把1500bp敲掉吗？
: 谢谢。
没有一点问题，我们老鼠都做出来了。
【在 g*********5 的大作中提到】
: 还有一个问题，正常人这个片段是50bp左右，病人的就要1500-3000bp了。
: 一对crispr能把1500bp敲掉吗？
: 谢谢。
B*e
16 楼
以后出国体检又多了一个收费项目。。。
g*5
17 楼
[email protected]!
成对应该用的是nickase减少脱靶效应吧。
请问载体是找公司作的吗？
还是自己设计？
我要用在病人细胞上，要把质粒转进去，四个质粒不知道好转不。
【在 T****u 的大作中提到】
: 两对，四个gRNA
: 没有一点问题，我们老鼠都做出来了。
成对应该用的是nickase减少脱靶效应吧。
请问载体是找公司作的吗？
还是自己设计？
我要用在病人细胞上，要把质粒转进去，四个质粒不知道好转不。
【在 T****u 的大作中提到】
: 两对，四个gRNA
: 没有一点问题，我们老鼠都做出来了。
l*e
18 楼
农药太多了
【在 R***a 的大作中提到】
: 为啥需要organic的？
: 难道怕生下来畸形黄瓜？
【在 R***a 的大作中提到】
: 为啥需要organic的？
: 难道怕生下来畸形黄瓜？
T*u
19 楼
自己做的。两天做好载体。一般一个半月拿到细胞。
挑单克隆 10%-20%的complete KO.
【在 g*********5 的大作中提到】
: [email protected]!
: 成对应该用的是nickase减少脱靶效应吧。
: 请问载体是找公司作的吗？
: 还是自己设计？
: 我要用在病人细胞上，要把质粒转进去，四个质粒不知道好转不。
挑单克隆 10%-20%的complete KO.
【在 g*********5 的大作中提到】
: [email protected]!
: 成对应该用的是nickase减少脱靶效应吧。
: 请问载体是找公司作的吗？
: 还是自己设计？
: 我要用在病人细胞上，要把质粒转进去，四个质粒不知道好转不。
R*a
20 楼
condom上的药更多啊
【在 l******e 的大作中提到】
: 农药太多了
【在 l******e 的大作中提到】
: 农药太多了
g*5
21 楼
牛啊。羡慕中。请问您用的那个载体？
又没有一下子能装几个RNA的载体？
要么就用一个hCas9 D10A, 和4个gRNA_Cloning Vectors？
【在 T****u 的大作中提到】
: 自己做的。两天做好载体。一般一个半月拿到细胞。
: 挑单克隆 10%-20%的complete KO.
又没有一下子能装几个RNA的载体？
要么就用一个hCas9 D10A, 和4个gRNA_Cloning Vectors？
【在 T****u 的大作中提到】
: 自己做的。两天做好载体。一般一个半月拿到细胞。
: 挑单克隆 10%-20%的complete KO.
l*e
22 楼
残留农药多半是不能降解的
【在 R***a 的大作中提到】
: condom上的药更多啊
【在 R***a 的大作中提到】
: condom上的药更多啊
D*D
23 楼
见过黄瓜吗?
hoho
【在 F**D 的大作中提到】
: 没事，上面套一个durex，一样好用
hoho
【在 F**D 的大作中提到】
: 没事，上面套一个durex，一样好用
a*g
24 楼
第一次都用茄子
质地手感都比较好
【在 D*********t 的大作中提到】
: 男人找不到，黄瓜还找不到吗
:
: 前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
质地手感都比较好
【在 D*********t 的大作中提到】
: 男人找不到，黄瓜还找不到吗
:
: 前没有合适的奉献对象，随便找也不靠
m*n
25 楼
回帖们够强。
i*a
26 楼
騎自行車最有效
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