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问个蛋白保存的问题
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问个蛋白保存的问题# Biology - 生物学
b*k
1
我想象挤酸汤子那么挤面条,刷刷刷地面条很方便地就下锅多好。
可不知道,这个面得和得多干多稀才能既省事儿,掉沸水里又能
成条(而不是化成浆糊),也许面里加点蛋液能有助于迅速成型
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m*o
2
我目前的贷款利率是5%, 不知道值不值得refinance成4.75(no point). 利率还可能降
吗?
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s*e
3
一直用VEGF作angiogenesis assay,每次我拿到厂家寄来的pwder,用PBS配成 20ng/uL
的solution,aliquote, 冻在-20冰箱。
每次最开始的动物或者细胞实验都很好,几个星期后用很多时候就没有效果。最近刚刚
因为这损失大批老鼠。
问朋友,朋友说是因为我配的溶液太稀,蛋白都负在了eppendorf tube的壁上面。问大
家谁做过的怎么解决的?
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t*s
4
如果是完全no cost总是值的。但是省的不多。
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m*D
5
类似的情况下,我们会加BSA(Roche的比较好,也比较贵)。另外,stock solution总
是高浓度一些,要用的时候再dilute。有些protein,还用silanized tube来长齐-70度
保存的。
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b*d
6
如果是No cost的,能省到0.25%以上的就值。最近的利率还算稳定,应该涨不到哪里去。

【在 m***o 的大作中提到】
: 我目前的贷款利率是5%, 不知道值不值得refinance成4.75(no point). 利率还可能降
: 吗?

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D*s
7
要配成stock solution,最好存储在-80度,能加glycerol会更好,使用时再稀释
低浓度的蛋白质很容易变性

uL

【在 s**********e 的大作中提到】
: 一直用VEGF作angiogenesis assay,每次我拿到厂家寄来的pwder,用PBS配成 20ng/uL
: 的solution,aliquote, 冻在-20冰箱。
: 每次最开始的动物或者细胞实验都很好,几个星期后用很多时候就没有效果。最近刚刚
: 因为这损失大批老鼠。
: 问朋友,朋友说是因为我配的溶液太稀,蛋白都负在了eppendorf tube的壁上面。问大
: 家谁做过的怎么解决的?

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s*e
8
非常感谢
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s*y
9
对,应该配在0.2% BSA/PBS里。
而且楼主配的stock solution浓度也太低了,我们一般至少也要搞个5ug/ul stock.
20ng/ul 太过分的低了

【在 m*********D 的大作中提到】
: 类似的情况下,我们会加BSA(Roche的比较好,也比较贵)。另外,stock solution总
: 是高浓度一些,要用的时候再dilute。有些protein,还用silanized tube来长齐-70度
: 保存的。

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s*e
10
买的蛋白每次只有5 ug,250美元左右

【在 s******y 的大作中提到】
: 对,应该配在0.2% BSA/PBS里。
: 而且楼主配的stock solution浓度也太低了,我们一般至少也要搞个5ug/ul stock.
: 20ng/ul 太过分的低了

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s*y
11
哦,这么贵。。。
相比之下我们用的HGF太便宜了。

【在 s**********e 的大作中提到】
: 买的蛋白每次只有5 ug,250美元左右
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s*e
12
别的公司有便宜的,用过一次,动物实验完全没有效果,就一直在用R&D的。
做薄厚的时候,动物实验砸了,就当没有发生过,反正实验室很大;自己独立半年到现
在,动物实验砸一次,会压力很大,不仅是science也是money的大问题。

【在 s******y 的大作中提到】
: 哦,这么贵。。。
: 相比之下我们用的HGF太便宜了。

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