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求救: Fe-S SAM蛋白在细胞中的表达
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求救: Fe-S SAM蛋白在细胞中的表达# Biology - 生物学
s*y
1
B&H, J&R算吗?
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D*r
2
签了一个foreclosure bank-owned house。在home inspection后发现一些不大不小的
问题。请问如果拿着contractor的quote和银行再negotiate价格或者要credit,银行接
受的可能性大不大?
房主2006年买入价是386K,房子银行287K foreclosure买入,给我们的价格是270K.另外
,seller agent和银行都非常想把这个房子赶快卖掉.
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y*8
3
我要在细胞中表达一个Fe-S cluster SAM的蛋白, 这个蛋白活性对oxygen极为敏感,
至少有氧的情况下在E.coli中没有任何活性。
第一次把此蛋白在细胞质中表达,没有酶活。想问大家如何有何方法让此蛋白在细胞中
有酶活?把它在mitochondria中表达, 是否有帮助?
谢谢!!!
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c*4
4
in store应该算的

【在 s****y 的大作中提到】
: B&H, J&R算吗?
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c*r
5
关SELLER什么事呢
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j*n
6
厌氧没法做?不然细胞里或多或少有氧气吧,加上你的是极为敏感。。。
ps haoqiwemxia蛋白,是pfl?


★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7

【在 y********8 的大作中提到】
: 我要在细胞中表达一个Fe-S cluster SAM的蛋白, 这个蛋白活性对oxygen极为敏感,
: 至少有氧的情况下在E.coli中没有任何活性。
: 第一次把此蛋白在细胞质中表达,没有酶活。想问大家如何有何方法让此蛋白在细胞中
: 有酶活?把它在mitochondria中表达, 是否有帮助?
: 谢谢!!!

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i*a
7
bank is the seller ba

【在 c*********r 的大作中提到】
: 关SELLER什么事呢
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y*8
8
yes
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D*r
9
bank就是seller.
但是bank有个agent.
有什么建议呢?

【在 c*********r 的大作中提到】
: 关SELLER什么事呢
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e*s
10
这个估计只能在无氧条件下提,
还原态的Fe才是有活性的,O2是底物之一吧?你的铁已经是三价了,失去了被氧化的能
力,也就没有活性了。
如果没有无氧的条件,试试看提纯过程中加入适量DTT之类,同时把Buffer都Degas一下
。测活的时候再输入额外的O2。



【在 y********8 的大作中提到】
: 我要在细胞中表达一个Fe-S cluster SAM的蛋白, 这个蛋白活性对oxygen极为敏感,
: 至少有氧的情况下在E.coli中没有任何活性。
: 第一次把此蛋白在细胞质中表达,没有酶活。想问大家如何有何方法让此蛋白在细胞中
: 有酶活?把它在mitochondria中表达, 是否有帮助?
: 谢谢!!!

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i*a
11
case by case. each bank, or even each case can be different.

【在 D****r 的大作中提到】
: 签了一个foreclosure bank-owned house。在home inspection后发现一些不大不小的
: 问题。请问如果拿着contractor的quote和银行再negotiate价格或者要credit,银行接
: 受的可能性大不大?
: 房主2006年买入价是386K,房子银行287K foreclosure买入,给我们的价格是270K.另外
: ,seller agent和银行都非常想把这个房子赶快卖掉.

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l*3
12
找有glove box的实验室才能做
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D*r
13
wells fargo is the bank.
is there a chance?
thanks.

【在 i****a 的大作中提到】
: case by case. each bank, or even each case can be different.
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j*n
14
如果是在yeast等耗氧厉害的host做
可以直接加到厌氧管 密封好
少量氧气很快被消耗掉 就成厌氧环境了
用这个至少pfl可以功能表达 我们做过 其他类型protein的就不知道了

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7

【在 y********8 的大作中提到】
: yes
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i*a
15
you'll have to talk to an agent who's dealt with wells fargo before

【在 D****r 的大作中提到】
: wells fargo is the bank.
: is there a chance?
: thanks.

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f*w
16
it doesn't hurt to ask. If the seller bank doesn't agree, so be it if you
still like the house.
don't feel bad to ask for money or credit. That's business. and business is
just business.
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n*9
17
you can ask and they can say no to you. no harm for trying, but the chance
that you can get anything is almost 0.

【在 D****r 的大作中提到】
: 签了一个foreclosure bank-owned house。在home inspection后发现一些不大不小的
: 问题。请问如果拿着contractor的quote和银行再negotiate价格或者要credit,银行接
: 受的可能性大不大?
: 房主2006年买入价是386K,房子银行287K foreclosure买入,给我们的价格是270K.另外
: ,seller agent和银行都非常想把这个房子赶快卖掉.

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D*r
18
Why is almost 0?
thanks.

【在 n*******9 的大作中提到】
: you can ask and they can say no to you. no harm for trying, but the chance
: that you can get anything is almost 0.

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n*9
19
what kind of contract have you signed with the bank? is there any words like
sold 'as is'? bank normally will not do anything for the repairing and they
put it up front on the contract.

【在 D****r 的大作中提到】
: Why is almost 0?
: thanks.

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D*r
20
Yes. There is "sold as is" in the contract, but we can declare the contract
null and walk away in 7 days.

like
they

【在 n*******9 的大作中提到】
: what kind of contract have you signed with the bank? is there any words like
: sold 'as is'? bank normally will not do anything for the repairing and they
: put it up front on the contract.

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n*9
21
then you truly get nothing.

contract

【在 D****r 的大作中提到】
: Yes. There is "sold as is" in the contract, but we can declare the contract
: null and walk away in 7 days.
:
: like
: they

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D*r
22
True, but the bank also wants to keep the deal alive.
Anyway, I will try to ask them for credit and see how it goes.
Thanks.

【在 n*******9 的大作中提到】
: then you truly get nothing.
:
: contract

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