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质粒中提问题

质粒中提问题# Biology - 生物学

C*g2015-04-03 07:04

1 楼

华子春，你这样灌Oncotarget来应付基金，对得起党国和人民吗？要脸吗？
送你陈老总的两句诗：教尔做人不做人，教你不苟竟狗苟
Oncotarget, 2017, 8: 115526-115545，通讯作者，致谢基金18项
Oncotarget, 2017, 8: 26941-26958，通讯作者，致谢基金10项
Oncotarget, 2017, 8: 13898-13908，通讯作者，致谢基金13项
Oncotarget, 2016, 7: 24572-24584，通讯作者，致谢基金12项
Oncotarget, 2016, 7: 14940-14950，通讯作者，致谢基金12项
Oncotarget, 2015, 6: 19469-19482，通讯作者，致谢基金11项

i*02015-04-03 07:04

2 楼

lenti viral系统（amp resistence）的质粒，加上insert差不多10-12kb左右，小提用
自己配的p1,p2,p3，一点问题没有，酶切和测序都没有问题；但是从小提中取了700ul
，放到80ml做overnight culture，做中提（用的是qiagen的mid plus vacum的kit），
就怎么也提不出来质粒。
各位有没有啥建议？
谢谢！

r*72015-04-03 07:04

3 楼

华子春只是中国成千上万科学家的典型代表而已。
你骂它何用？
就像中国的贪官一样是一种文化，随便查一个就是贪官。
随便查一个就是一个腐败科学家

h*y2015-04-03 07:04

4 楼

细菌长过了。从700ul放大到80ml这一步不要做overnight culture，5-6个小时就好了。

700ul

【在 i*********0 的大作中提到】

: lenti viral系统（amp resistence）的质粒，加上insert差不多10-12kb左右，小提用
: 自己配的p1,p2,p3，一点问题没有，酶切和测序都没有问题；但是从小提中取了700ul
: ，放到80ml做overnight culture，做中提（用的是qiagen的mid plus vacum的kit），
: 就怎么也提不出来质粒。
: 各位有没有啥建议？
: 谢谢！

C*g2015-04-03 07:04

5 楼

就是佩服一下牛批而已

【在 r*******7 的大作中提到】

: 华子春只是中国成千上万科学家的典型代表而已。
: 你骂它何用？
: 就像中国的贪官一样是一种文化，随便查一个就是贪官。
: 随便查一个就是一个腐败科学家