h*y
2 楼
On site的时候对于hr问的期望薪水这样的问题应该怎样回答最保险？
f*f
3 楼
以前一直是bradford测浓度来保证loading一致。cell lysis buffer含NP40，DTT等。
两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
min后测量读数差别挺大的。
最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
min后测量读数差别挺大的。
最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
e*0
4 楼
哦，快找活干吧。等明年初，中部的2大神户同时杀向休斯顿的时候，你可能就得下岗
拉。
【在 N*****h 的大作中提到】
: 扫货，送货，拧箱子，看仓库都行，哈哈。
: 男，在休斯敦。
拉。
【在 N*****h 的大作中提到】
: 扫货，送货，拧箱子，看仓库都行，哈哈。
: 男，在休斯敦。
s*a
5 楼
可以不说实际数字，就说看重工作兴趣和group，希望公司提供有竞争力的市场价格。
可以查下这个网站，对公司的工资水平心里有数。
http://www.h1bwage.com/index.php
可以查下这个网站，对公司的工资水平心里有数。
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V*t
6 楼
楼主是280直接测吗
[发表自未名空间手机版 - m.mitbbs.com]
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c*0
7 楼
which 2?
e*s
8 楼
我觉得Braford好很多。A280对成分巨多的lysis buffer和混合蛋白不可能准确，个人
认为干扰因素较大。
Bradford的话，通常Cell lysate的浓度是很高的，会有几百倍的稀释，NP40,DTT等的
影响就不大了。每次同做Standard line的话，1 min 或者20 min的incubation time影
响就不大了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 以前一直是bradford测浓度来保证loading一致。cell lysis buffer含NP40，DTT等。
: 两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
: 另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
: min后测量读数差别挺大的。
: 最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
: 而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
: 根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
: 么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
认为干扰因素较大。
Bradford的话，通常Cell lysate的浓度是很高的，会有几百倍的稀释，NP40,DTT等的
影响就不大了。每次同做Standard line的话，1 min 或者20 min的incubation time影
响就不大了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 以前一直是bradford测浓度来保证loading一致。cell lysis buffer含NP40，DTT等。
: 两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
: 另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
: min后测量读数差别挺大的。
: 最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
: 而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
: 根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
: 么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
N*h
9 楼
我也想知道啊！我给他们当车夫+搬运工去。大神透露一下吧。
【在 e**********0 的大作中提到】
: 哦，快找活干吧。等明年初，中部的2大神户同时杀向休斯顿的时候，你可能就得下岗
: 拉。
【在 e**********0 的大作中提到】
: 哦，快找活干吧。等明年初，中部的2大神户同时杀向休斯顿的时候，你可能就得下岗
: 拉。
r*t
10 楼
qbit 测蛋白的那个功能如何？是不是好些？
a*a
11 楼
没什么问题，我一直是10%sds裂了nano drop测一下。
如果是同样的样品，不同细胞或者组织之间比较，直接称重裂解就行了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 以前一直是bradford测浓度来保证loading一致。cell lysis buffer含NP40，DTT等。
: 两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
: 另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
: min后测量读数差别挺大的。
: 最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
: 而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
: 根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
: 么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
如果是同样的样品，不同细胞或者组织之间比较，直接称重裂解就行了。
【在 f*****f 的大作中提到】
: 以前一直是bradford测浓度来保证loading一致。cell lysis buffer含NP40，DTT等。
: 两个样品A595差得比较远时比如0.4和0.1，线性不是很好，感觉定量不是很准。
: 另外，测A595（普通分光光度计）时，cell lysis加入到Bradford 1 min后测量和20
: min后测量读数差别挺大的。
: 最近用nanodrop直接测A280同一个样品，不同时候测variation要比bradford小得多。
: 而且同一个样品，线性也挺好的，而且样品比较多的时候，比bradford方便。
: 根据A280来loading control，进而比较同一细胞系不同处理或比较不同细胞系有问题
: 么？你们平时一般用什么定量？谢谢。
f*f
12 楼
是直接测。
谢谢上面各位了：）
【在 V******t 的大作中提到】
: 楼主是280直接测吗
: [发表自未名空间手机版 - m.mitbbs.com]
谢谢上面各位了：）
【在 V******t 的大作中提到】
: 楼主是280直接测吗
: [发表自未名空间手机版 - m.mitbbs.com]
x*e
13 楼
Bio-rad BCA kit
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