技术问题：Trizol抽提RNA做RNA-Seq，用DNase处理的问题# Biology - 生物学
n*s
1 楼
没有人干活，对于要做实验的法考题来说就是致命的
尤其小学校，n流，找能干的学生基本没有指望，当地找的人，基本上是PI自己花钱花
时间找闲杂人来做培训，而且培训后，也不一定有能力出活。是不是只能想办法海归了？
尤其小学校，n流，找能干的学生基本没有指望，当地找的人，基本上是PI自己花钱花
时间找闲杂人来做培训，而且培训后，也不一定有能力出活。是不是只能想办法海归了？
d*f
2 楼
妻子外出跟同学一起吃饭，丈夫交代她早点回来；可妻子偏偏彻夜不归，打电话也不接
。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
当日上午10时30分，陈某到妻子的单位接她回家。回家后，二人再次为彻夜不归这事吵
了一架。当日下午4时30分，王某给她亲戚打电话说晚上要去她家吃饭，陈某问她“是
不是今天晚上又不回来”，王某说“是，要不然你要怎样？”随后，二人再次吵起来。
这次，陈某动手打了妻子，最终掐死了妻子。
据陈某交代，他与妻子王某婚后经常因生活琐事吵架。判决后，陈某未提出上诉。
。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
当日上午10时30分，陈某到妻子的单位接她回家。回家后，二人再次为彻夜不归这事吵
了一架。当日下午4时30分，王某给她亲戚打电话说晚上要去她家吃饭，陈某问她“是
不是今天晚上又不回来”，王某说“是，要不然你要怎样？”随后，二人再次吵起来。
这次，陈某动手打了妻子，最终掐死了妻子。
据陈某交代，他与妻子王某婚后经常因生活琐事吵架。判决后，陈某未提出上诉。
b*n
3 楼
上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
Trizol杀灭和去除DNase。
不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
RNA的损失比较大。
请大家发表一下意见。
我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
Trizol杀灭和去除DNase。
不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
RNA的损失比较大。
请大家发表一下意见。
g*t
4 楼
学nieng教授
找国内的大学远程指导，和做科研
招自带干粮的访学
招本科生志愿者
了？
【在 n**s 的大作中提到】
: 没有人干活，对于要做实验的法考题来说就是致命的
: 尤其小学校，n流，找能干的学生基本没有指望，当地找的人，基本上是PI自己花钱花
: 时间找闲杂人来做培训，而且培训后，也不一定有能力出活。是不是只能想办法海归了？
找国内的大学远程指导，和做科研
招自带干粮的访学
招本科生志愿者
了？
【在 n**s 的大作中提到】
: 没有人干活，对于要做实验的法考题来说就是致命的
: 尤其小学校，n流，找能干的学生基本没有指望，当地找的人，基本上是PI自己花钱花
: 时间找闲杂人来做培训，而且培训后，也不一定有能力出活。是不是只能想办法海归了？
H*7
5 楼
所以说还是穆斯林社会好
x*e
6 楼
其实更应该担心是ＤＮＡａｓｅ能否起作用，如何检测ＤＮａｓｅ起作用。有时候问半
天还不如自己做一下，生命短暂，用ｋｉｔ吧，尤其是你的样品是用来做ＲＮＡ-seq。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
天还不如自己做一下，生命短暂，用ｋｉｔ吧，尤其是你的样品是用来做ＲＮＡ-seq。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
o*1
7 楼
干吗掐死人？脑子进水了？你也彻夜不归不就完了。
30
【在 d********f 的大作中提到】
: 妻子外出跟同学一起吃饭，丈夫交代她早点回来；可妻子偏偏彻夜不归，打电话也不接
: 。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
: 厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
: 附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
: 陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
: 前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
: 这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
: 信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
: 分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
: 某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
30
【在 d********f 的大作中提到】
: 妻子外出跟同学一起吃饭，丈夫交代她早点回来；可妻子偏偏彻夜不归，打电话也不接
: 。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
: 厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
: 附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
: 陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
: 前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
: 这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
: 信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
: 分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
: 某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
s*s
8 楼
你trizol, chloroform污染过的水相，DNase不太可能有活性。
反正我都是用kit的。。。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
反正我都是用kit的。。。
净。
【在 b*****n 的大作中提到】
: 上网查了一些内容，发现相当一部分人推荐用DNase处理样品。
: 我想能否在Trizol抽提中加chloroform离心后的水相中加DNase，然后再加0.5ml
: Trizol杀灭和去除DNase。
: 不确定水相中的成分，DNase的活性如何，再用少量Trizol抽提是否能把DNase去除干净。
: 或者用isopropanol沉淀后再加Dnase处理，再用Trizol去除DNase？这样沉淀的步骤对
: RNA的损失比较大。
: 请大家发表一下意见。
L*n
9 楼
他要有这个能耐早就不归了……
【在 o******1 的大作中提到】
: 干吗掐死人？脑子进水了？你也彻夜不归不就完了。
:
: 30
【在 o******1 的大作中提到】
: 干吗掐死人？脑子进水了？你也彻夜不归不就完了。
:
: 30
b*n
10 楼
今天试了一下，这样处理genome DNA全部去除干净，除了RNA量有点损失外，其它一切
都好。
【在 s******s 的大作中提到】
: 你trizol, chloroform污染过的水相，DNase不太可能有活性。
: 反正我都是用kit的。。。
:
: 净。
都好。
【在 s******s 的大作中提到】
: 你trizol, chloroform污染过的水相，DNase不太可能有活性。
: 反正我都是用kit的。。。
:
: 净。
a*s
11 楼
赞这句：就为这点琐事
a*e
12 楼
哇靠，这还叫琐事
30
【在 d********f 的大作中提到】
: 妻子外出跟同学一起吃饭，丈夫交代她早点回来；可妻子偏偏彻夜不归，打电话也不接
: 。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
: 厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
: 附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
: 陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
: 前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
: 这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
: 信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
: 分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
: 某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
30
【在 d********f 的大作中提到】
: 妻子外出跟同学一起吃饭，丈夫交代她早点回来；可妻子偏偏彻夜不归，打电话也不接
: 。就为这点琐事，妻子第二天回家后，被其丈夫掐死。
: 厦门中级法院一审判决，陈某犯故意杀人罪，判处无期徒刑，剥夺政治权利终身；赔偿
: 附带民事经济损失人民币73万余元。昨日，这一判决正式生效。
: 陈某今年27岁，漳州龙海人。去年12月2日晚，其妻子王某外出跟同学一起吃 饭，出门
: 前，陈某交代妻子早点回来。但当晚10点多，陈某回到暂住处，却发现妻子仍未回家。
: 这时，陈某给妻子打了几个电话，但每次电话接通后，都被妻子按断了；陈某就改发短
: 信，但妻子连短信也没有回复，最后，其妻子的手机转入了来电提醒。次日凌晨1时30
: 分许，王某还没有回来，陈某一生气，将家中的电视机屏幕砸了。次日上午8时多，陈
: 某醒来发现妻子仍未回家，立即再给妻子打电话，但后者电话还是来电提醒。
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