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包子请教怎么拿到Mus musculus一个基因的cDNA
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包子请教怎么拿到Mus musculus一个基因的cDNA# Biology - 生物学
b*i
1
各方面都不错,后院很大,而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
有什么不好的。大家评一评。
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j*p
2
对于我这种黑手指来说,最最要紧的一点就是一定要催芽,不要直接育苗,特别是那些
育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿,明显催芽更快,而且肉眼可见。育苗的话,
那种子埋在土里啥也看不见,只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
像我这种没耐心的,育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
催芽是上个周末开始的,现在已经有四颗丝瓜,若干辣椒向日葵,5颗茄子催芽成功并
且已经埋到育苗盒里了,虽然说这不代表百分之百最后会出苗,但是心里起码有点着落
了。
再说回来直接育苗的种子,前两天拔开育苗盒子的土看了一下,四月初下去的迟迟没有
动静的西红柿其实也已经在发芽了,只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
其中的折磨真是只有我自己才能体会,还被某人嘲笑我走火入魔。
经过这仨礼拜的煎熬之后我决定以后种菜必须催芽。
最后感叹一句,当农民真是每天都需要学习。活到老学到老啊。
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h*r
3
需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因,没钱合成。有什么办法又快又好的
拿到呢?提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
包子酬谢。
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s*r
4
有车震

【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错,后院很大,而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。

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xt
5
你的发芽温度可能不够,否则应该很快发芽的。
每种东西发芽温度都不太一样,苦瓜最好30度,茄果类,
丝瓜,冬瓜要25-30度,卷心菜,菠菜,大葱,韭菜发芽
温度不能太高,否则出芽率低。

【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说,最最要紧的一点就是一定要催芽,不要直接育苗,特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿,明显催芽更快,而且肉眼可见。育苗的话,
: 那种子埋在土里啥也看不见,只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的,育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的,现在已经有四颗丝瓜,若干辣椒向日葵,5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了,虽然说这不代表百分之百最后会出苗,但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子,前两天拔开育苗盒子的土看了一下,四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了,只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会,还被某人嘲笑我走火入魔。

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i*a
6
查有谁用过这个基因的,发邮件要

【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因,没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢?提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。

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b*d
7
火车旁边的房子就算了.

【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错,后院很大,而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。

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j*p
8
的确是温度不够,所以就需要催芽,
我把泡过水的种子放在电水壶旁边,发芽速度明显快了很多。
育苗盒里的就不行,虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们,还是出得很慢很慢。

【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够,否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样,苦瓜最好30度,茄果类,
: 丝瓜,冬瓜要25-30度,卷心菜,菠菜,大葱,韭菜发芽
: 温度不能太高,否则出芽率低。

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h*r
9
多年前的paper.谁帮我PCR一下吧,有paper挂个群众作者。
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l*e
10
不会买。人多且杂,噪音大,以后出手也不容易。
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m*e
11
催苗好,发芽速度慢的直接扔掉,省得占用个盆
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O*a
12
addgene上搜索
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xt
13
放在家里的热水炉上

【在 j******p 的大作中提到】
: 的确是温度不够,所以就需要催芽,
: 我把泡过水的种子放在电水壶旁边,发芽速度明显快了很多。
: 育苗盒里的就不行,虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们,还是出得很慢很慢。

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j*n
14
gBlokc
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N*r
15
谢谢,我的丝瓜还没有出苗,急死我也,看来也是温度不够,三四周没出会不会烂掉了?

你的发芽温度可能不够,否则应该很快发芽的。每种东西发芽温度都不太一样,苦瓜最
好30度,茄果类,丝瓜,冬瓜要25-30度,卷心菜,菠菜,大葱,韭菜发芽温度不能太
高,否则出芽率低。

【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够,否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样,苦瓜最好30度,茄果类,
: 丝瓜,冬瓜要25-30度,卷心菜,菠菜,大葱,韭菜发芽
: 温度不能太高,否则出芽率低。

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s*s
16
多数老鼠的cDNA应该能买到。记得以前有个某大学某center啥的,可以买
gateway的基因, 好像也就一百多一个,回来gateway一下,两个礼拜病毒就好了

【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因,没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢?提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。

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y*2
17
确实是,前面育的丝瓜子,过了18天才出苗。

【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说,最最要紧的一点就是一定要催芽,不要直接育苗,特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿,明显催芽更快,而且肉眼可见。育苗的话,
: 那种子埋在土里啥也看不见,只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的,育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的,现在已经有四颗丝瓜,若干辣椒向日葵,5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了,虽然说这不代表百分之百最后会出苗,但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子,前两天拔开育苗盒子的土看了一下,四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了,只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会,还被某人嘲笑我走火入魔。

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H*N
18
Search openbiosystem
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T*m
19
催芽长出来的苗没有直播的健壮。
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s*y
20
最简单的办法就是直接抽取culture mouse cell line的mRNA,然后跑一个逆转录反应
。但是相关试剂大概需要200美元的样子。

【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因,没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢?提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。

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i*e
21
兄弟我一直做农机(主要是tiller, mower)出口到美国的生意,不过一直对美国农民使
用农机的习惯不了解。
请教各位农业达人。
美国农民怎么种蔬菜的啊?都用哪些农机的啊?使用高峰季节是什么时候?国内大部分
还是靠人工,少量用微耕机或者拖拉机加相应attachments。
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h*r
22
多谢大家!准备gblcok了,顺便把codon也优化下。有个问题,大家都在谁家合成的?
以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候,时不时的会有突变,而且
也不给测序报告,需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错,但是价格也高啊。
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j*p
23
是自然产和剖腹产的区别吗?
我回头对比一下

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6

【在 T*******m 的大作中提到】
: 催芽长出来的苗没有直播的健壮。
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h*r
24
Thermo的网站上说的:
the average error rate of gBlocks Gene Fragments was determined to
be 1 error per 1,329 bp;
the mean sequence error rate of GeneArt Strings DNA Fragments was 5x lower
than gBlocks Gene Fragments, with 1 error per 6,757 bp.
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T*y
25

haha,好比喻

【在 j******p 的大作中提到】
: 是自然产和剖腹产的区别吗?
: 我回头对比一下
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6

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j*n
26
多挑几个克隆去测序

【在 h**********r 的大作中提到】
: 多谢大家!准备gblcok了,顺便把codon也优化下。有个问题,大家都在谁家合成的?
: 以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候,时不时的会有突变,而且
: 也不给测序报告,需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错,但是价格也高啊。

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y*8
27
我的种子几乎都催芽。
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C*4
28
GBlock 2KB以下很少出错,除非GC rich或特殊原因,但是你可以自己改三码平衡GC和
AT的比例,否则公司不给你合成。好处是快,还可以随意加两头的酶切位点。推荐IDT
,他们网上有个预测/筛选的程序告诉你GC和其它参数是否不利于合成。2KB也不超过
200刀(折扣不同)。我组里已经用过上百个,同时送两个克隆测序基本都能拿到正确
的克隆。收到样一周左右,做多10天左右,完成克隆最多两周。最后要提醒你一下,老
鼠的基因在肠菌里表达最好做一下CODON优化,否则可能造成蛋白表达不高。网上好多
程序可以用,自己搜索一下。
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a*y
29
怎么催芽?

【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说,最最要紧的一点就是一定要催芽,不要直接育苗,特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿,明显催芽更快,而且肉眼可见。育苗的话,
: 那种子埋在土里啥也看不见,只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的,育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的,现在已经有四颗丝瓜,若干辣椒向日葵,5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了,虽然说这不代表百分之百最后会出苗,但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子,前两天拔开育苗盒子的土看了一下,四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了,只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会,还被某人嘲笑我走火入魔。

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h*r
30
多谢分享经验!2kb很难拿到200刀的deal吧。可能是你们合成的多的原因。
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l*o
31
co-ask. Soak in water, put in warm place?

【在 a*****y 的大作中提到】
: 怎么催芽?
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j*p
32
现在不在家,不好回帖,回头贴一个我催芽的方法

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6

【在 l*****o 的大作中提到】
: co-ask. Soak in water, put in warm place?
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