包子请教怎么拿到Mus musculus一个基因的cDNA# Biology - 生物学
b*i
1 楼
各方面都不错，后院很大，而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
有什么不好的。大家评一评。
有什么不好的。大家评一评。
j*p
2 楼
对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
了。
再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
经过这仨礼拜的煎熬之后我决定以后种菜必须催芽。
最后感叹一句，当农民真是每天都需要学习。活到老学到老啊。
育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
了。
再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
经过这仨礼拜的煎熬之后我决定以后种菜必须催芽。
最后感叹一句，当农民真是每天都需要学习。活到老学到老啊。
h*r
3 楼
需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
包子酬谢。
拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
包子酬谢。
s*r
4 楼
有车震
【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错，后院很大，而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。
【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错，后院很大，而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。
xt
5 楼
你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。
每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
温度不能太高，否则出芽率低。
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
温度不能太高，否则出芽率低。
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
i*a
6 楼
查有谁用过这个基因的，发邮件要
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
b*d
7 楼
火车旁边的房子就算了.
【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错，后院很大，而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。
【在 b****i 的大作中提到】
: 各方面都不错，后院很大，而且有篱笆隔着。很安全。火车是Metra。不知除了噪音还
: 有什么不好的。大家评一评。
j*p
8 楼
的确是温度不够，所以就需要催芽，
我把泡过水的种子放在电水壶旁边，发芽速度明显快了很多。
育苗盒里的就不行，虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们，还是出得很慢很慢。
【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
: 丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
: 温度不能太高，否则出芽率低。
我把泡过水的种子放在电水壶旁边，发芽速度明显快了很多。
育苗盒里的就不行，虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们，还是出得很慢很慢。
【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
: 丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
: 温度不能太高，否则出芽率低。
h*r
9 楼
多年前的paper.谁帮我PCR一下吧，有paper挂个群众作者。
l*e
10 楼
不会买。人多且杂，噪音大，以后出手也不容易。
m*e
11 楼
催苗好，发芽速度慢的直接扔掉，省得占用个盆
O*a
12 楼
addgene上搜索
xt
13 楼
放在家里的热水炉上
【在 j******p 的大作中提到】
: 的确是温度不够，所以就需要催芽，
: 我把泡过水的种子放在电水壶旁边，发芽速度明显快了很多。
: 育苗盒里的就不行，虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们，还是出得很慢很慢。
【在 j******p 的大作中提到】
: 的确是温度不够，所以就需要催芽，
: 我把泡过水的种子放在电水壶旁边，发芽速度明显快了很多。
: 育苗盒里的就不行，虽然我坚持晚上搬回家白天搬出们，还是出得很慢很慢。
j*n
14 楼
gBlokc
N*r
15 楼
谢谢，我的丝瓜还没有出苗，急死我也，看来也是温度不够，三四周没出会不会烂掉了？
你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最
好30度，茄果类，丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽温度不能太
高，否则出芽率低。
【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
: 丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
: 温度不能太高，否则出芽率低。
你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最
好30度，茄果类，丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽温度不能太
高，否则出芽率低。
【在 xt 的大作中提到】
: 你的发芽温度可能不够，否则应该很快发芽的。
: 每种东西发芽温度都不太一样，苦瓜最好30度，茄果类，
: 丝瓜，冬瓜要25-30度，卷心菜，菠菜，大葱，韭菜发芽
: 温度不能太高，否则出芽率低。
s*s
16 楼
多数老鼠的cDNA应该能买到。记得以前有个某大学某center啥的，可以买
gateway的基因， 好像也就一百多一个，回来gateway一下，两个礼拜病毒就好了
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
gateway的基因， 好像也就一百多一个，回来gateway一下，两个礼拜病毒就好了
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
y*2
17 楼
确实是，前面育的丝瓜子，过了18天才出苗。
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
H*N
18 楼
Search openbiosystem
T*m
19 楼
催芽长出来的苗没有直播的健壮。
s*y
20 楼
最简单的办法就是直接抽取culture mouse cell line的mRNA，然后跑一个逆转录反应
。但是相关试剂大概需要200美元的样子。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
。但是相关试剂大概需要200美元的样子。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 需要在微生物中表达一个来自Mus musculus的基因，没钱合成。有什么办法又快又好的
: 拿到呢？提供可以买的网站也成。附近不认识做mouse genetics的。
: 包子酬谢。
i*e
21 楼
兄弟我一直做农机（主要是tiller, mower)出口到美国的生意，不过一直对美国农民使
用农机的习惯不了解。
请教各位农业达人。
美国农民怎么种蔬菜的啊?都用哪些农机的啊？使用高峰季节是什么时候？国内大部分
还是靠人工，少量用微耕机或者拖拉机加相应attachments。
用农机的习惯不了解。
请教各位农业达人。
美国农民怎么种蔬菜的啊?都用哪些农机的啊？使用高峰季节是什么时候？国内大部分
还是靠人工，少量用微耕机或者拖拉机加相应attachments。
h*r
22 楼
多谢大家！准备gblcok了，顺便把codon也优化下。有个问题，大家都在谁家合成的？
以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候，时不时的会有突变，而且
也不给测序报告，需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错，但是价格也高啊。
以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候，时不时的会有突变，而且
也不给测序报告，需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错，但是价格也高啊。
j*p
23 楼
是自然产和剖腹产的区别吗？
我回头对比一下
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 T*******m 的大作中提到】
: 催芽长出来的苗没有直播的健壮。
我回头对比一下
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 T*******m 的大作中提到】
: 催芽长出来的苗没有直播的健壮。
h*r
24 楼
Thermo的网站上说的：
the average error rate of gBlocks Gene Fragments was determined to
be 1 error per 1,329 bp；
the mean sequence error rate of GeneArt Strings DNA Fragments was 5x lower
than gBlocks Gene Fragments, with 1 error per 6,757 bp.
the average error rate of gBlocks Gene Fragments was determined to
be 1 error per 1,329 bp；
the mean sequence error rate of GeneArt Strings DNA Fragments was 5x lower
than gBlocks Gene Fragments, with 1 error per 6,757 bp.
T*y
25 楼
haha,好比喻
【在 j******p 的大作中提到】
: 是自然产和剖腹产的区别吗？
: 我回头对比一下
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
j*n
26 楼
多挑几个克隆去测序
【在 h**********r 的大作中提到】
: 多谢大家！准备gblcok了，顺便把codon也优化下。有个问题，大家都在谁家合成的？
: 以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候，时不时的会有突变，而且
: 也不给测序报告，需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错，但是价格也高啊。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 多谢大家！准备gblcok了，顺便把codon也优化下。有个问题，大家都在谁家合成的？
: 以前在IDT,刚刚看到GeneArt价格也不错。在IDT合成的时候，时不时的会有突变，而且
: 也不给测序报告，需要AT克隆然后自己测。当然genscript的不错，但是价格也高啊。
y*8
27 楼
我的种子几乎都催芽。
C*4
28 楼
GBlock 2KB以下很少出错，除非GC rich或特殊原因，但是你可以自己改三码平衡GC和
AT的比例，否则公司不给你合成。好处是快，还可以随意加两头的酶切位点。推荐IDT
，他们网上有个预测/筛选的程序告诉你GC和其它参数是否不利于合成。2KB也不超过
200刀（折扣不同）。我组里已经用过上百个，同时送两个克隆测序基本都能拿到正确
的克隆。收到样一周左右，做多10天左右，完成克隆最多两周。最后要提醒你一下，老
鼠的基因在肠菌里表达最好做一下CODON优化，否则可能造成蛋白表达不高。网上好多
程序可以用，自己搜索一下。
AT的比例，否则公司不给你合成。好处是快，还可以随意加两头的酶切位点。推荐IDT
，他们网上有个预测/筛选的程序告诉你GC和其它参数是否不利于合成。2KB也不超过
200刀（折扣不同）。我组里已经用过上百个，同时送两个克隆测序基本都能拿到正确
的克隆。收到样一周左右，做多10天左右，完成克隆最多两周。最后要提醒你一下，老
鼠的基因在肠菌里表达最好做一下CODON优化，否则可能造成蛋白表达不高。网上好多
程序可以用，自己搜索一下。
a*y
29 楼
怎么催芽？
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
【在 j******p 的大作中提到】
: 对于我这种黑手指来说，最最要紧的一点就是一定要催芽，不要直接育苗，特别是那些
: 育苗发芽时间很长的比如丝瓜辣椒西红柿，明显催芽更快，而且肉眼可见。育苗的话，
: 那种子埋在土里啥也看不见，只恨自己的眼睛没有XRAY的功能。
: 像我这种没耐心的，育苗俩礼拜没动静我心里就难受的跟蚂蚁爬似的。
: 催芽是上个周末开始的，现在已经有四颗丝瓜，若干辣椒向日葵，5颗茄子催芽成功并
: 且已经埋到育苗盒里了，虽然说这不代表百分之百最后会出苗，但是心里起码有点着落
: 了。
: 再说回来直接育苗的种子，前两天拔开育苗盒子的土看了一下，四月初下去的迟迟没有
: 动静的西红柿其实也已经在发芽了，只不过埋在土里看不见。估计辣椒也快了。但是这
: 其中的折磨真是只有我自己才能体会，还被某人嘲笑我走火入魔。
h*r
30 楼
多谢分享经验！2kb很难拿到200刀的deal吧。可能是你们合成的多的原因。
l*o
31 楼
co-ask. Soak in water, put in warm place?
【在 a*****y 的大作中提到】
: 怎么催芽？
【在 a*****y 的大作中提到】
: 怎么催芽？
j*p
32 楼
现在不在家，不好回帖，回头贴一个我催芽的方法
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 l*****o 的大作中提到】
: co-ask. Soak in water, put in warm place?
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.6
【在 l*****o 的大作中提到】
: co-ask. Soak in water, put in warm place?
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