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FokI-dCas9编辑效率和特异性
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FokI-dCas9编辑效率和特异性# Biology - 生物学
b*k
1
Nature biotechnology 去年6月同时发表了2篇用dimeric FokI-dCas9来提高基因组编辑
的特异性。特异性总体上都比paired Cas9 nickase 要好。Joung 实验室的编辑效率要
高一点,但是可能和他们采用的转染方法也有关系。另外一篇是David Liu 实验室的。
不知道版上有没有人用过FokI-dCas9系统?我只是用来KO一个基因,建一株细胞。但是
,老板很担心off—target.
Joung 实验室用了Csy4来剪辑同一个启动子转录出来的2个guide RNA,这样克隆2个guid
e RNA应该比一般的载体要方便一点。但是,需要和表达Csy4的FokI-dCas9载体一起使用
。他们的FokI-dCas9是人codon优化的,不知道在小鼠细胞里面表达效率如何?
先谢谢了!
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l*e
2
担心off-target就建2个independent的clone
别的都是扯

编辑
guid
使用

【在 b******k 的大作中提到】
: Nature biotechnology 去年6月同时发表了2篇用dimeric FokI-dCas9来提高基因组编辑
: 的特异性。特异性总体上都比paired Cas9 nickase 要好。Joung 实验室的编辑效率要
: 高一点,但是可能和他们采用的转染方法也有关系。另外一篇是David Liu 实验室的。
: 不知道版上有没有人用过FokI-dCas9系统?我只是用来KO一个基因,建一株细胞。但是
: ,老板很担心off—target.
: Joung 实验室用了Csy4来剪辑同一个启动子转录出来的2个guide RNA,这样克隆2个guid
: e RNA应该比一般的载体要方便一点。但是,需要和表达Csy4的FokI-dCas9载体一起使用
: 。他们的FokI-dCas9是人codon优化的,不知道在小鼠细胞里面表达效率如何?
: 先谢谢了!

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b*k
3
呵呵,这个也很有道理 :)

【在 l********e 的大作中提到】
: 担心off-target就建2个independent的clone
: 别的都是扯
:
: 编辑
: guid
: 使用

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