NgAgo最新进展 - 未名空间MITBBS历史存档

N*g2016-07-15 07:07

1 楼

☆─────────────────────────────────────☆
NeoEgg (功课) 于 (Tue Jul 14 00:50:25 2009, 美东) 提到:
一共没几台iphone的交易，神医要我的驾照、学校email才肯先付款后drop，555
可粘俺一直这么仰慕这位神医 ~~~~~~~~~~>☆─────────────────────────────────────☆
N007 (N007) 于 (Tue Jul 14 00:52:01 2009, 美东) 提到:
bao id

一共没几台iphone的交易，神医要我的驾照、学校email才肯先付款后drop，555
可粘俺一直这么仰慕这位神医 ~~~~~~~~~~>☆─────────────────────────────────────☆
cruisehot (best lucky) 于 (Tue Jul 14 00:52:26 2009, 美东) 提到:
跟我混吧
☆─────────────────────────

w*t2016-07-15 07:07

2 楼

学校让大家圣诞节给穷孩子们捐一些小玩具和文具用品
我顺口跟他爹说我们捐这个吧，他都不玩，还没撕掉标签
牛牛听到立马说：“不想，这是我的。”
我问你知道什么是捐吗？他说：“捐就是没有了。”
奇怪了，我应该没怎么说过捐这个词啊
然后我blah blah说你有很多玩具啊，有的孩子没有啊，你应该帮助人家等等
人家就是说不想，这是我的。
我只好诱惑之，如果你分给别的小朋友了，圣诞老人会给你更多的玩具。
结果人家指着一辆可以骑的大车说
那好吧，这个给他吧，然后再给我一辆......

c*62016-07-15 07:07

3 楼

From Google 网上论坛
Michael Wilson
2016-07-15 16:54（1 分钟前）
将帖子翻译为中文
Hello,
We have twice attempted to test the NgAgO addgene plasmid in HEK 293 cells
using lipofectamine transfection and the EGXXFP split reporter assay. As
many are aware, this assay requires DNA cleavage in the EGXXFP plasmid to
restore GFP expression.
We ordered oligos with 5' phosphorylation and transfected directly or PNK-
treated an aliquot prior to transfection, just to ensure 5' phosphorylation;
neither of these methods restored GFP expression. In contrast, the positive
controls (Cas9 and gRNA expressed from pX330) gave robust GFP expression.
I will echo others here that there is a discrepancy between what the authors
have shown and what others have been able to repeat. I don't believe anyone
has reported indels yet, correct?

w*t2016-07-15 07:07

4 楼

艺术创作——————
小人丢一堆泡沫条子在门口
然后很激动的牵着妈妈去看，告诉妈妈这是“太阳”。
不能打击小人的艺术创作激情，妈妈我只能违心的说
哇，好大的太阳啊，牛牛你真棒！这个太阳会发光吗？
小人赶紧扛过来打气筒说，这个能让太阳发光。
@￥#%……&%￥&
这哪跟哪啊？妈妈实在follow不下去了
对了，人家还不忘说
妈妈，你拍下来吧，放到网上给爷爷奶奶，还有阿姨看

c*62016-07-15 07:07

5 楼

Genome-editing
下午4:50（6 分钟前）
其他收件人： h********[email protected], c******[email protected], o*****[email protected]
将帖子翻译为中文
- 显示引用文字 -
hello guys,
we tried NgAgo plasmid cotransfection with 5'phospho-ssDNA guides and I must
say cell mortality rates are very high (toxic). We got 5'phospo-ssDNA
guides synthesised from IDT, desalt purification. Does anybody have tested
desalted verus PAGE purified ssOligos and looked for cell viability.
cheers!

r*f2016-07-15 07:07

6 楼

拍吧，以后是甜蜜的回忆

【在 w********t 的大作中提到】

: 艺术创作——————
: 小人丢一堆泡沫条子在门口
: 然后很激动的牵着妈妈去看，告诉妈妈这是“太阳”。
: 不能打击小人的艺术创作激情，妈妈我只能违心的说
: 哇，好大的太阳啊，牛牛你真棒！这个太阳会发光吗？
: 小人赶紧扛过来打气筒说，这个能让太阳发光。
: @￥#%……&%￥&
: 这哪跟哪啊？妈妈实在follow不下去了
: 对了，人家还不忘说
: 妈妈，你拍下来吧，放到网上给爷爷奶奶，还有阿姨看

i*y2016-07-15 07:07

7 楼

小人儿的创意是无限的。

A*H2016-07-15 07:07

8 楼

好聪明狡猾啊

【在 w********t 的大作中提到】

: 学校让大家圣诞节给穷孩子们捐一些小玩具和文具用品
: 我顺口跟他爹说我们捐这个吧，他都不玩，还没撕掉标签
: 牛牛听到立马说：“不想，这是我的。”
: 我问你知道什么是捐吗？他说：“捐就是没有了。”
: 奇怪了，我应该没怎么说过捐这个词啊
: 然后我blah blah说你有很多玩具啊，有的孩子没有啊，你应该帮助人家等等
: 人家就是说不想，这是我的。
: 我只好诱惑之，如果你分给别的小朋友了，圣诞老人会给你更多的玩具。
: 结果人家指着一辆可以骑的大车说
: 那好吧，这个给他吧，然后再给我一辆......

a*g2016-07-15 07:07

9 楼

逗

【在 w********t 的大作中提到】

: 学校让大家圣诞节给穷孩子们捐一些小玩具和文具用品
: 我顺口跟他爹说我们捐这个吧，他都不玩，还没撕掉标签
: 牛牛听到立马说：“不想，这是我的。”
: 我问你知道什么是捐吗？他说：“捐就是没有了。”
: 奇怪了，我应该没怎么说过捐这个词啊
: 然后我blah blah说你有很多玩具啊，有的孩子没有啊，你应该帮助人家等等
: 人家就是说不想，这是我的。
: 我只好诱惑之，如果你分给别的小朋友了，圣诞老人会给你更多的玩具。
: 结果人家指着一辆可以骑的大车说
: 那好吧，这个给他吧，然后再给我一辆......

b*12016-07-15 07:07

10 楼

的确有点sun的意思呢。这是很高级的pretended play哦，你家娃的想象力非常丰富。

【在 w********t 的大作中提到】

: 艺术创作——————
: 小人丢一堆泡沫条子在门口
: 然后很激动的牵着妈妈去看，告诉妈妈这是“太阳”。
: 不能打击小人的艺术创作激情，妈妈我只能违心的说
: 哇，好大的太阳啊，牛牛你真棒！这个太阳会发光吗？
: 小人赶紧扛过来打气筒说，这个能让太阳发光。
: @￥#%……&%￥&
: 这哪跟哪啊？妈妈实在follow不下去了
: 对了，人家还不忘说
: 妈妈，你拍下来吧，放到网上给爷爷奶奶，还有阿姨看

H*62016-07-15 07:07

11 楼

可爱

k*n2016-07-15 07:07

12 楼

你家牛牛还知道你老泡bbs给他作广告呢!

【在 w********t 的大作中提到】

: 艺术创作——————
: 小人丢一堆泡沫条子在门口
: 然后很激动的牵着妈妈去看，告诉妈妈这是“太阳”。
: 不能打击小人的艺术创作激情，妈妈我只能违心的说
: 哇，好大的太阳啊，牛牛你真棒！这个太阳会发光吗？
: 小人赶紧扛过来打气筒说，这个能让太阳发光。
: @￥#%……&%￥&
: 这哪跟哪啊？妈妈实在follow不下去了
: 对了，人家还不忘说
: 妈妈，你拍下来吧，放到网上给爷爷奶奶，还有阿姨看

w*t2016-07-15 07:07

13 楼

不是，是qq空间爷爷奶奶会看到的

【在 k**n 的大作中提到】

: 你家牛牛还知道你老泡bbs给他作广告呢!

g*n2016-07-15 07:07

14 楼

哈哈，太可爱了，小人儿的脑瓜子里有多少奇思妙想啊。

l*a2016-07-15 07:07

15 楼

真的是太阳啊。我看到了

w*t2016-07-15 07:07

16 楼

太感谢了，你们都是善良的妈妈啊，孩子一定都会健康快乐，哈哈

【在 l********a 的大作中提到】

: 真的是太阳啊。我看到了

d*t2016-07-15 07:07

17 楼

我仍然记得汶川地震的时候，我写了check叫小熊去放邮箱，她不愿意，我就选了些小
孩子的照片给看，她哇的就哭了，咚咚的出门去寄check
以后任何的donation她都没说不字

W*n2016-07-15 07:07

18 楼

这个孩纸真的是没有爱心比较自私

l*a2016-07-15 07:07

19 楼

人家才刚满三岁，正是在教育进行中，不好这样贴标签。

【在 W***n 的大作中提到】

: 这个孩纸真的是没有爱心比较自私

q*92016-07-15 07:07

20 楼

我晕,3岁的孩子,他自己都不知道什么叫爱心,什么叫自私,
去daycare看看,哪个不是 it's mine, it's mine 的喊着.
跟自私半毛钱关系都没有.

【在 W***n 的大作中提到】

: 这个孩纸真的是没有爱心比较自私

l*g2016-07-15 07:07

21 楼

太可爱了，你儿子

【在 w********t 的大作中提到】

: 学校让大家圣诞节给穷孩子们捐一些小玩具和文具用品
: 我顺口跟他爹说我们捐这个吧，他都不玩，还没撕掉标签
: 牛牛听到立马说：“不想，这是我的。”
: 我问你知道什么是捐吗？他说：“捐就是没有了。”
: 奇怪了，我应该没怎么说过捐这个词啊
: 然后我blah blah说你有很多玩具啊，有的孩子没有啊，你应该帮助人家等等
: 人家就是说不想，这是我的。
: 我只好诱惑之，如果你分给别的小朋友了，圣诞老人会给你更多的玩具。
: 结果人家指着一辆可以骑的大车说
: 那好吧，这个给他吧，然后再给我一辆......

r*n2016-07-15 07:07

22 楼

靠，你儿子很能透过现象看本质啊，他都知道阳光是很多颜色的光混到一起出来的，你
应该奖他一块三棱镜，当然加上墨镜保护眼睛

【在 w********t 的大作中提到】

: 艺术创作——————
: 小人丢一堆泡沫条子在门口
: 然后很激动的牵着妈妈去看，告诉妈妈这是“太阳”。
: 不能打击小人的艺术创作激情，妈妈我只能违心的说
: 哇，好大的太阳啊，牛牛你真棒！这个太阳会发光吗？
: 小人赶紧扛过来打气筒说，这个能让太阳发光。
: @￥#%……&%￥&
: 这哪跟哪啊？妈妈实在follow不下去了
: 对了，人家还不忘说
: 妈妈，你拍下来吧，放到网上给爷爷奶奶，还有阿姨看

w*t2016-07-15 07:07

23 楼

那亏死了，爹妈实在太弱，只能埋没孩子这份天分了，哈哈

【在 r********n 的大作中提到】

: 靠，你儿子很能透过现象看本质啊，他都知道阳光是很多颜色的光混到一起出来的，你
: 应该奖他一块三棱镜，当然加上墨镜保护眼睛