酶动力学的问题:这是什么抑制剂？ - 未名空间MITBBS历史存档

国际科技财经博客移民网络热点娱乐民生时事公众号

Redian新闻

>未名空间

>Chemistry - 化学

酶动力学的问题:这是什么抑制剂？

酶动力学的问题:这是什么抑制剂？# Chemistry - 化学

s*02015-06-10 07:06

1 楼

我的EB3的485正Pending(2006的PD，2007Filed 485)。虽然不影响换工作（已有EAD,AP),但还
是想早点
拿到GC.
我是想换个工作，让新公司给我办个EB2. 请问，新公司要给我办哪些，我才能Relink
EB3的PD到新的EB2上？？
多谢！

t*l2015-06-10 07:06

2 楼

大家帮忙选个台式机 deal 吧，谢谢。
前天，4年的HP A1410y死了，我只不过打开机箱，clean了一下风扇，再用时，没有显
示了，什么也没有，连开机画面都没有了，显示器就是黑的! 赶快卸下硬盘，好在儿子
的动画片和自己的数据都好的，风扇也转，用万用表测电源，也是好的，这是什么原因
呢？
这台HP电脑已经很老了，配置在当时买时就已经不是很好，Intel Celeron D 3.33 GHz
. Memory 512 MB , win HP home 不过一直很皮实，运行很好（当然我也没干什么）所
以想换一台，还是台式机，自己已经有两台laptop了。
主要功能：网上下动画片，电影，连上电视给儿子看，给父母看CCTVBOX, PPLive，自
己有个office就可以了，在就是打diablo II，（这是我唯一会的游戏）。
不看desktop很久了，有些要求不知道合不合理，1）台式机，尽量不要vista,
2）速度当然越快越好，不过我想我的用途现在什么机器都可以满足的。
3）硬盘当然大点好，可是因为现在有俩个硬盘 300G，所以也无所谓

w*e2015-06-10 07:06

3 楼

RNA有OD260，NTP也有OD260，那RNA被degrade的过程OD260会有改变吗？
如果没有的话，有什么其他好办法能不用run gel就看出RNA的integrity呢？
多谢！

j*s2015-06-10 07:06

4 楼

测试一个酶的抑制剂，３０uM 完全没有作用，６０uM完全抑制，反应速度很低。而且
，增加底物浓度反应速度降为０。这是什么抑制剂？如果是uncompetitive inhibitor
，lineweaver burk plot得不到平行线

c*i2015-06-10 07:06

5 楼

新公司要给你办EB2 Perm, and EB2 I-140, EB2 I-140的PD要继承EB3的。

N*w2015-06-10 07:06

6 楼

自己攒，AMD X2 550 开核，hehe
或者去买个二手的 core 2 duo 的机器

GHz

【在 t****l 的大作中提到】

: 大家帮忙选个台式机 deal 吧，谢谢。
: 前天，4年的HP A1410y死了，我只不过打开机箱，clean了一下风扇，再用时，没有显
: 示了，什么也没有，连开机画面都没有了，显示器就是黑的! 赶快卸下硬盘，好在儿子
: 的动画片和自己的数据都好的，风扇也转，用万用表测电源，也是好的，这是什么原因
: 呢？
: 这台HP电脑已经很老了，配置在当时买时就已经不是很好，Intel Celeron D 3.33 GHz
: . Memory 512 MB , win HP home 不过一直很皮实，运行很好（当然我也没干什么）所
: 以想换一台，还是台式机，自己已经有两台laptop了。
: 主要功能：网上下动画片，电影，连上电视给儿子看，给父母看CCTVBOX, PPLive，自
: 己有个office就可以了，在就是打diablo II，（这是我唯一会的游戏）。

a*e2015-06-10 07:06

7 楼

if OD260/280 is bigger than 2.2, there is a possibility of degradation.

c*n2015-06-10 07:06

8 楼

这个得看是不是MECHANISM BASED INHIBITOR啊。还有，到底是REVERSIBLE 还是
IRREVERSIBLE INHIBITOR啊。具体还得多做实验，多点数据看lineweaver burk plot
的PLOT是啥样子。不是平行线，那有交集么？

s*02015-06-10 07:06

9 楼

PERM+140的总费用是大概是多少啊，包括律师广告费的话？

n*k2015-06-10 07:06

10 楼

rationale? I thought organic solvent could make it that or lower? so free
NTP has higher 260/280?

【在 a***e 的大作中提到】

: if OD260/280 is bigger than 2.2, there is a possibility of degradation.

s*02015-06-10 07:06

11 楼

自己顶一下。多少钱啊？

w*e2015-06-10 07:06

12 楼

ding. do you know of any easy way to assess RNA integrin? thx

【在 n********k 的大作中提到】

: rationale? I thought organic solvent could make it that or lower? so free
: NTP has higher 260/280?

p*22015-06-10 07:06

13 楼

EB3的老PD可以用在EB2上啊？感觉不太合逻辑啊。

T*t2015-06-10 07:06

14 楼

看RNA degradation好像一般都是用agilent的bioanalyzer比较准，用量很少，结果快
而且直观，就是他家的chip和仪器比较finicky，操作起来要很小心，否则一点小纰漏
就废掉一块chip。
如果是细胞里提的总RNA，bioanalyzer的分析软件能给出RIN数据，叫RNA integrity
number，数字越低，RNA降解得越厉害。
但我估计你看的RNA是short RNA oligo library，可能不会有RIN吧，我没试过。但是
你的sample如果用analyzer跑一下，出来的结果可以像胶一样看，有没有degradation
应该很容易看到吧。只需要几分钟的时间，有条件的话，试试看吧。

s*m2015-06-10 07:06

15 楼

看是什么样的degradation了
一般260/280不是很能说明问题
如果是cleavage的话，还是跑胶比较好
如果是降解成mononucleotide
跑个TLC plate，带正点的那种
理论上也可以吧
可能就是量要多一点

【在 w******e 的大作中提到】

: RNA有OD260，NTP也有OD260，那RNA被degrade的过程OD260会有改变吗？
: 如果没有的话，有什么其他好办法能不用run gel就看出RNA的integrity呢？
: 多谢！

w*e2015-06-10 07:06

16 楼

这个牛。。。多谢啦！

degradation

【在 T**********t 的大作中提到】

: 看RNA degradation好像一般都是用agilent的bioanalyzer比较准，用量很少，结果快
: 而且直观，就是他家的chip和仪器比较finicky，操作起来要很小心，否则一点小纰漏
: 就废掉一块chip。
: 如果是细胞里提的总RNA，bioanalyzer的分析软件能给出RIN数据，叫RNA integrity
: number，数字越低，RNA降解得越厉害。
: 但我估计你看的RNA是short RNA oligo library，可能不会有RIN吧，我没试过。但是
: 你的sample如果用analyzer跑一下，出来的结果可以像胶一样看，有没有degradation
: 应该很容易看到吧。只需要几分钟的时间，有条件的话，试试看吧。

h*n2015-06-10 07:06

17 楼

这个我以前用过, 很爽的.

degradation

【在 T**********t 的大作中提到】

a*e2015-06-10 07:06

18 楼

free NTP should >4, if my memory is right.

【在 n********k 的大作中提到】

: rationale? I thought organic solvent could make it that or lower? so free
: NTP has higher 260/280?

m*M2015-06-10 07:06

19 楼

Of course not. I got perfect ratios of my RNA samples from nanodrop, but when
I checked them on bioanalyser, they were all degraded (around 7 or lower).
A simple example, you can get perfect ratio when you measure DNA primers. I
have done a lot RNA work, trust me or not? It depends on yourself. -:)

w*e2015-06-10 07:06

20 楼

which bioanalyzer do you use? 2100? I'm not sure if I can persuade my boss
to buy this. envy you guys:(

when
.
I

【在 m****M 的大作中提到】

: Of course not. I got perfect ratios of my RNA samples from nanodrop, but when
: I checked them on bioanalyser, they were all degraded (around 7 or lower).
: A simple example, you can get perfect ratio when you measure DNA primers. I
: have done a lot RNA work, trust me or not? It depends on yourself. -:)

s*s2015-06-10 07:06

21 楼

facility没有？

【在 w******e 的大作中提到】

: which bioanalyzer do you use? 2100? I'm not sure if I can persuade my boss
: to buy this. envy you guys:(
:
: when
: .
: I

T*t2015-06-10 07:06

22 楼

就是2100。我们实验室这台好久没人动了呢。:)
Bioanalyzer有很多应用啊。你们实验室开发microfluidics的，说不定可以借鉴一下，
或者在它的基础上开发点别的应用什么的，总之别跟他说你就是为了跑RNA看
degradation，不然他肯定让你自个儿跑个胶就完了。

【在 w******e 的大作中提到】

: which bioanalyzer do you use? 2100? I'm not sure if I can persuade my boss
: to buy this. envy you guys:(
:
: when
: .
: I

C*e2015-06-10 07:06

23 楼

agilent的bioanalyzer现在用的很多
的确又快用量又少
但是说白了其实也就是毛细管胶
一样是跑胶
一样是看rRNA的比例
没有这个条件的其实跑个琼脂糖电泳
照个照片
然后选择显示migrate/intensity
出来的图是一样一样的
只是没有人那样计算“RIN”而已

degradation

【在 T**********t 的大作中提到】

C*e2015-06-10 07:06

24 楼

我手上现在没有RNA跑胶的照片
随便拿一个DNA跑胶的照片演示一下哈
Rf vs Intensity

【在 C*******e 的大作中提到】

: agilent的bioanalyzer现在用的很多
: 的确又快用量又少
: 但是说白了其实也就是毛细管胶
: 一样是跑胶
: 一样是看rRNA的比例
: 没有这个条件的其实跑个琼脂糖电泳
: 照个照片
: 然后选择显示migrate/intensity
: 出来的图是一样一样的
: 只是没有人那样计算“RIN”而已