Re: who makes the Competent cell called NM522?# Biology - 生物学
R*s
1 楼
ft. 你们用英文是讲不清楚了, 要不就是相互都没pay attention好好看。
GENESIS的意思是不管你用多少细胞，如果你的细胞好，antibiotics质量也好，
ligation做得也clean,那你negative control就应该很clean, 没什么clonie.
跟用了多少细胞没关系。同时ligation plates里应该有大量colonies而且
false positive的比例也应该很少。所以没必要降低细胞量。也没必要因为
clonies多而多做miniprep.
除非你切了后的vector超级sticky, 而且CIP不干净,
导致self-ligation很多（这句偶加的，呵呵）。
当然偶自己做cloning很烂，经常ligation plate才长一个，
一挑还真有insert. 哈哈，倒是省miniprep.
GENESIS的意思是不管你用多少细胞，如果你的细胞好，antibiotics质量也好，
ligation做得也clean,那你negative control就应该很clean, 没什么clonie.
跟用了多少细胞没关系。同时ligation plates里应该有大量colonies而且
false positive的比例也应该很少。所以没必要降低细胞量。也没必要因为
clonies多而多做miniprep.
除非你切了后的vector超级sticky, 而且CIP不干净,
导致self-ligation很多（这句偶加的，呵呵）。
当然偶自己做cloning很烂，经常ligation plate才长一个，
一挑还真有insert. 哈哈，倒是省miniprep.