Re: 无法解释的结果，有点复杂，有空的同学# Biology - 生物学
s*e
1 楼
Thank you for carefully read my post.
你说的对，我只是将问题简化来说了，实际情况要复杂一些
我设计的vector包含3个loxp sites，前两个夹着一个exon，第二个和第三个夹
着一个neo基因，这是很常规的设计方法，整个insert region很大，有3k左右
我可以通过southern blot来检测homologous recombination，因为这个insert
引入了一个新的EcoRI site
我的确得到了homologous recombinated干细胞，并用它做了老鼠，但当我用这个老鼠
和Cre mouse杂交时，我怎么也看不到Cre－loxp recombination
仔细检查才发现第一个loxp site莫名其妙得丢了
如我前面叙述的，这个loxp site夹在两个NcoI site中间，它前面和后面很近
的DNA都进去了，就是这一段丢了
你说的对，我只是将问题简化来说了，实际情况要复杂一些
我设计的vector包含3个loxp sites，前两个夹着一个exon，第二个和第三个夹
着一个neo基因，这是很常规的设计方法，整个insert region很大，有3k左右
我可以通过southern blot来检测homologous recombination，因为这个insert
引入了一个新的EcoRI site
我的确得到了homologous recombinated干细胞，并用它做了老鼠，但当我用这个老鼠
和Cre mouse杂交时，我怎么也看不到Cre－loxp recombination
仔细检查才发现第一个loxp site莫名其妙得丢了
如我前面叙述的，这个loxp site夹在两个NcoI site中间，它前面和后面很近
的DNA都进去了，就是这一段丢了