chromatin immunoprecipitation做了一个多月了,可是在最开始的步骤上就迈不开步
子。我是用的SDS free lysis buffer:1% Triton-X 100, 0.1% sodium deoxycholate
. 超声后离心,14000 rpm 10min,DNA 总是在离心后的沉淀里,上清很少。但是DNA的
大小都超声的大概300bp 了。是我离心速度太快吗, 因为DNA上有蛋白,比较大?还是
说细胞核没有裂好?因为我用1%SDS buffer 裂解细胞核,再超声,离心就没这个问题
。如果DNA 大小在几百个bp了,是不是说明核已经裂了呢?我可以干脆省掉离心这步吗
?或者就用4000rpm 离心beads的速度离?有哪位知道吗?怎么我老是碰到一些看起来
对别人根本不是问题的问题呢?十分十分感谢您的任何建议回答!