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Difficult cloning# Biology - 生物学
x*n
1
1. 中信 x500
2.国信 x500
3. 上海医药 maybe
4. 华润99。 maybe
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b*9
2
☆─────────────────────────────────────☆
renaissance (ole) 于 (Mon Nov 8 19:58:38 2010, 美东) 提到:
谢谢大家
1点半的签证时间,只问了两个问题
- 有几个孩子?
- 退休了?
就批准了
背景父母三年前来过,当时已经退休,顺利一签过,在美国待了6个月,按时回国,这中间没有任何变化,有一个姐姐在国内,自己在美国博士毕业后,工作5年,年初获得绿卡。
再次感谢大家的祝福,给几位发了几个包子。
同样深深祝福所有来签证的老人们,一切顺利。
☆─────────────────────────────────────☆
VEGETARCAT (vegetarcat) 于 (Mon Nov 8 20:19:46 2010, 美东) 提到:
bless
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joanwhy (joan_why) 于 (Mon Nov 8 20:35:53 2010, 美东) 提到:
祝福一起顺利
☆─────────────────────────────────────☆
singe (shi nan) 于 (Mon Nov 8 20:36:44 2010, 美东) 提到:
Bless
☆─────────────────────────────────────☆
joanwhy (joan_why) 于 (Mon Nov 8 20:44:22 2010, 美东) 提到:
祝心想事成!
☆─────────────────────────────────────☆
qianshui (qianshui) 于 (Mon Nov 8 20:51:42 2010, 美东) 提到:
我妈也是今天,已经进去了。希望今天都能水过!
☆─────────────────────────────────────☆
baozi09 (包子拿来) 于 (Mon Nov 8 21:09:31 2010, 美东) 提到:
bless!
☆─────────────────────────────────────☆
LiWan (LiWan) 于 (Mon Nov 8 21:10:40 2010, 美东) 提到:
bless
☆─────────────────────────────────────☆
qqmmpp (最近真忙!) 于 (Mon Nov 8 22:29:26 2010, 美东) 提到:
bless!!!
☆─────────────────────────────────────☆
daxue (开心) 于 (Tue Nov 9 03:44:23 2010, 美东) 提到:
GXGX!
☆─────────────────────────────────────☆
feiyangxiao (小肥羊) 于 (Tue Nov 9 06:40:57 2010, 美东) 提到:
恭喜!托你的好运气,希望我父母也签证顺利!
☆─────────────────────────────────────☆
vonstone (Von) 于 (Tue Nov 9 08:23:57 2010, 美东) 提到:
GXGX~``````````````
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cyyxx76 (icasrbara) 于 (Tue Nov 9 12:16:43 2010, 美东) 提到:
GXGX
☆─────────────────────────────────────☆
sssheep (myohmy) 于 (Tue Nov 9 12:19:00 2010, 美东) 提到:
gx
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w*r
3
天天忙着换尿布,边拍娃边学习。
欢迎大师们多指点,多拍砖,
拍我好了,别拍娃啊:)
day36
day31-1
day31-2
day26
day21
day22
day16
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T*c
4
以前一朋友,书店租的把覆雨翻云,反复看了不过瘾,最后把里面若干部分xxoo撕下来
珍藏了。。。
当然那时候属于上古时期,别说网络,电脑都还不普及。
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t*r
5
要克隆一基因locus,30-50 kb. Genbank没有sequence.大量repetitive segments, PCR
基本不work.好不容易PCR出一4kb片段,TA-cloning总被重组掉80-90%。试用过不同菌
种,30C培养等等。求高人指点。
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s*n
6
我觉得很好
有故事性
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n*m
7
还不如搞个手抄本。。

【在 T***c 的大作中提到】
: 以前一朋友,书店租的把覆雨翻云,反复看了不过瘾,最后把里面若干部分xxoo撕下来
: 珍藏了。。。
: 当然那时候属于上古时期,别说网络,电脑都还不普及。

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b*n
8
这个可能PCR有难度,
如果是细菌来源的DNA,可以尝试一下这个方法
insert一个抗性基因到该locus
然后找合适的酶消化基因组DNA再连接到相应载体
用该抗性标记筛选

PCR

【在 t******r 的大作中提到】
: 要克隆一基因locus,30-50 kb. Genbank没有sequence.大量repetitive segments, PCR
: 基本不work.好不容易PCR出一4kb片段,TA-cloning总被重组掉80-90%。试用过不同菌
: 种,30C培养等等。求高人指点。

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i*t
9
Day 16 is my favorite

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

【在 w********r 的大作中提到】
: 天天忙着换尿布,边拍娃边学习。
: 欢迎大师们多指点,多拍砖,
: 拍我好了,别拍娃啊:)
: day36
: day31-1
: day31-2
: day26
: day21
: day22
: day16

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T*c
10
手抄本那也太上古了,那是神话时期

【在 n*****m 的大作中提到】
: 还不如搞个手抄本。。
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t*r
11
DNA来自细胞,没有locus的reference序列。

【在 b******n 的大作中提到】
: 这个可能PCR有难度,
: 如果是细菌来源的DNA,可以尝试一下这个方法
: insert一个抗性基因到该locus
: 然后找合适的酶消化基因组DNA再连接到相应载体
: 用该抗性标记筛选
:
: PCR

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w*r
12
嗯有故事性是目标,但基本都是在抓大头照,
能拍出像flickr上的ta的娃照那样,有故事性,好难啊

【在 s*****n 的大作中提到】
: 我觉得很好
: 有故事性

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r*s
13
xxoo部门一般吧。

【在 T***c 的大作中提到】
: 以前一朋友,书店租的把覆雨翻云,反复看了不过瘾,最后把里面若干部分xxoo撕下来
: 珍藏了。。。
: 当然那时候属于上古时期,别说网络,电脑都还不普及。

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C*e
14
PCR 30-50 kb啊?没听说能PCR那么长的
十几个kb好像已经是极限了
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w*r
15
大师好久不见啊,谢谢点评:)
flickr上新的娃照很赞!

【在 i*****t 的大作中提到】
: Day 16 is my favorite
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

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k*n
16
呵呵。。wsn极品了。。
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X*n
17
有BAC clone 吗?有的话基于BAC clone recombineering delete掉不需要的部分就行
了。
PCR clone是够呛的,基因组不大的话自己做BAC未必不是个选择。
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s*n
18
没办法 美国就是这样

【在 w********r 的大作中提到】
: 嗯有故事性是目标,但基本都是在抓大头照,
: 能拍出像flickr上的ta的娃照那样,有故事性,好难啊

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w*1
19
对港台的人来说不黄,对现在才刚接触的人来说也不黄
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h*e
20
我估计用recombineering不好,repetitive segement太多

【在 X***n 的大作中提到】
: 有BAC clone 吗?有的话基于BAC clone recombineering delete掉不需要的部分就行
: 了。
: PCR clone是够呛的,基因组不大的话自己做BAC未必不是个选择。

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C*o
21
把娃脸上的一些红点retouch一下吧。

【在 w********r 的大作中提到】
: 天天忙着换尿布,边拍娃边学习。
: 欢迎大师们多指点,多拍砖,
: 拍我好了,别拍娃啊:)
: day36
: day31-1
: day31-2
: day26
: day21
: day22
: day16

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i*g
22
这个么,淫者见淫
我看黄易小说,凡是看见言情部分,哗啦哗啦翻过去,极不耐烦
好吧,我承认我撒谎了,我第一次看时,还是每行都看的,后面复习时才那样的
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t*r
23
Fosmid & BAC libray都做了三个了。能筛出其他基因,但从来没找到这clone的影子。
没有
genomic probe, 只有cDNA probe.
PCR是分段进行的。

【在 X***n 的大作中提到】
: 有BAC clone 吗?有的话基于BAC clone recombineering delete掉不需要的部分就行
: 了。
: PCR clone是够呛的,基因组不大的话自己做BAC未必不是个选择。

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w*r
24
记录生活,
我觉得真实比磨皮成白里透红更重要

【在 C********o 的大作中提到】
: 把娃脸上的一些红点retouch一下吧。
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r*r
25
人工合成

PCR

【在 t******r 的大作中提到】
: 要克隆一基因locus,30-50 kb. Genbank没有sequence.大量repetitive segments, PCR
: 基本不work.好不容易PCR出一4kb片段,TA-cloning总被重组掉80-90%。试用过不同菌
: 种,30C培养等等。求高人指点。

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l*m
26
赞纪实!用光也很到位。但是感觉整组照片风格不是很统一,有纪实,有大头照,还有
造型拍。顺便求分享ta的flickr
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w*r
27
http://www.flickr.com/photos/ta-/
嗯风格,包括色调确实不统一,谢谢指出

【在 l******m 的大作中提到】
: 赞纪实!用光也很到位。但是感觉整组照片风格不是很统一,有纪实,有大头照,还有
: 造型拍。顺便求分享ta的flickr

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i*t
28
谢分享!注意了下,大多片子的颜色很淡很淸新。光线应用得很牛,大量的应用了逆光。

【在 w********r 的大作中提到】
: http://www.flickr.com/photos/ta-/
: 嗯风格,包括色调确实不统一,谢谢指出

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w*r
29
呵呵也是alf以前推荐的。
日式小清新啊

光。

【在 i*****t 的大作中提到】
: 谢分享!注意了下,大多片子的颜色很淡很淸新。光线应用得很牛,大量的应用了逆光。
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