Redian新闻
>
问一个简单的引物分装的问题
avatar
问一个简单的引物分装的问题# Biology - 生物学
b*g
1
【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: blueraindang (blueraindang), 信区: Biology
标 题: Position available: Assitant/Associate/Full Professor, Xiamen University
发信站: BBS 未名空间站 (Mon Jul 25 21:13:06 2016, 美东)
Description:
The School of Pharmaceutical Sciences at Xiamen University, China is seeking
a highly motivated and talented protein crystallographer to join the
faculty team. Job position will be commensurate with the candidate's
qualifications. http://pharm.xmu.edu.cn/
http://hr.xmu.edu.cn/zpNew/newsInfo.do?key=29e488c9-7537-4f03-83cf-8613af5551b8&flag=1&id=22cd5a34-5986-4f26-8ad2-0adc688a118a)
Qualifications include, but are not limited to:
• A Ph.D. in structural biology or a closely related discipline
• Extensive experience in expressing and purifying protein from
insect cell/baculovirus systems
• Extensive experience in protein crystallography
• Experience with biophysical techniques such as SPR, CD and ITC
• Ability to work independently and collaboratively
• Good track record of publications
Application materials should be submitted to [email protected]/* */ The
application must include a cover letter, curriculum vitae, summary of
research accomplishments, a plan for future research, and names and contact
information of three references.
avatar
a*o
2
父亲腿脚不方便,站立时间长了都不行,这次给申请了轮椅服务,请问轮椅服务能把他送
到我接他的地方吗?他坐上海到芝加哥的直达,不用转机.如果能送到的话就好了,轮椅服
务的小费就可以我给了,那样父亲就不用去找银行换美元了.有经验的朋友给答疑一下,
十分感谢.
avatar
c*0
3
第一次拿到设计的引物。想问问大家干粉引物稀释后应该怎么分装保存?
网上说先稀释成100uM保存,工作时稀释为10uM。这个意思是不是说应该把100uM的引物
溶液分装在N个小离心管中然后冻起来,然后用的时候先稀释一个管到10uM,用完这个
管以后再稀释下一个管到10uM? 如果是这样的话那每个分装多少适合呀?
我担心分装太多了反复冻融影响寿命。
avatar
a*5
4
不是吧,万一在路上遇到点什么事情,一点美元没有,多没底啊。
avatar
a*o
5
prepare one tube of 100uM and one tube of 10uM. when you run out of 10uM
working primer, make new one from the 100uM stock. DNA oligo is very tough.
don't worry about it.
avatar
C*e
6
补充一句:除非你做很多反应,比如realtime PCR之类的
一般来说一管50-100ul左右的10 uM的都很少有用完的情况哈

tough.

【在 a****o 的大作中提到】
: prepare one tube of 100uM and one tube of 10uM. when you run out of 10uM
: working primer, make new one from the 100uM stock. DNA oligo is very tough.
: don't worry about it.

avatar
M*e
7
网上说先稀释成100uM保存,工作时稀释为10uM。
按字面理解,意思是,引物stock是100uM,如果你的PCR反应体系是20ul,就向PCR
mixture中加2ul的引物stock。
不过,我们做PCR,引物的工作浓度(在PCR反应体系中的浓度)是0.5uM. 我们会把引
物稀释成5uM,每管100ul保存。反复冻融没什么问题。

【在 c*****0 的大作中提到】
: 第一次拿到设计的引物。想问问大家干粉引物稀释后应该怎么分装保存?
: 网上说先稀释成100uM保存,工作时稀释为10uM。这个意思是不是说应该把100uM的引物
: 溶液分装在N个小离心管中然后冻起来,然后用的时候先稀释一个管到10uM,用完这个
: 管以后再稀释下一个管到10uM? 如果是这样的话那每个分装多少适合呀?
: 我担心分装太多了反复冻融影响寿命。

avatar
n*w
8
我都是直接稀释成40uM用的。。。。这就是work solution。。。没有做stock。。。
avatar
c*0
9

.
这样的话100uM的stock不是会反复冻融N多次了吗?没有事吗?

【在 a****o 的大作中提到】
: prepare one tube of 100uM and one tube of 10uM. when you run out of 10uM
: working primer, make new one from the 100uM stock. DNA oligo is very tough.
: don't worry about it.

avatar
c*0
10
就是real time哈……

【在 C*******e 的大作中提到】
: 补充一句:除非你做很多反应,比如realtime PCR之类的
: 一般来说一管50-100ul左右的10 uM的都很少有用完的情况哈
:
: tough.

avatar
c*0
11

谢谢,我突然好像明白了……

【在 M****e 的大作中提到】
: 网上说先稀释成100uM保存,工作时稀释为10uM。
: 按字面理解,意思是,引物stock是100uM,如果你的PCR反应体系是20ul,就向PCR
: mixture中加2ul的引物stock。
: 不过,我们做PCR,引物的工作浓度(在PCR反应体系中的浓度)是0.5uM. 我们会把引
: 物稀释成5uM,每管100ul保存。反复冻融没什么问题。

avatar
v*a
12
我一般是直接加水成50uM的,然后放在4C。。。有一次碰到引物不好用了的情况

【在 c*****0 的大作中提到】
: 第一次拿到设计的引物。想问问大家干粉引物稀释后应该怎么分装保存?
: 网上说先稀释成100uM保存,工作时稀释为10uM。这个意思是不是说应该把100uM的引物
: 溶液分装在N个小离心管中然后冻起来,然后用的时候先稀释一个管到10uM,用完这个
: 管以后再稀释下一个管到10uM? 如果是这样的话那每个分装多少适合呀?
: 我担心分装太多了反复冻融影响寿命。

avatar
B*l
13
我一般用TE配100 uM stock solution,然后用水稀释成10 uM working solution。
相关阅读
logo
联系我们隐私协议©2024 redian.news
Redian新闻
Redian.news刊载任何文章,不代表同意其说法或描述,仅为提供更多信息,也不构成任何建议。文章信息的合法性及真实性由其作者负责,与Redian.news及其运营公司无关。欢迎投稿,如发现稿件侵权,或作者不愿在本网发表文章,请版权拥有者通知本网处理。