w*j
2 楼
前辈们指教一下:
我有一个A flox/flox 的mice,需要和Tek-Cre杂交,得到血液系统敲除的A -/- mice。
Breeding程序如下:
1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种:
"Rictor wt/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek-"
"Rictor flox/wt Tek-"
"Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
"是我的对照,称为Hem_A +/+,是不是这样?
做实验是不是最好还要wild-type? 那么wild-type是哪个?
叩谢!
我有一个A flox/flox 的mice,需要和Tek-Cre杂交,得到血液系统敲除的A -/- mice。
Breeding程序如下:
1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种:
"Rictor wt/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek+"
"Rictor flox/flox Tek-"
"Rictor flox/wt Tek-"
"Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
"是我的对照,称为Hem_A +/+,是不是这样?
做实验是不是最好还要wild-type? 那么wild-type是哪个?
叩谢!
i*0
3 楼
理论上其他的都可以当作control。只要你的gene不是haploinsufficiency.
D*a
4 楼
我们只用A flox/flox ; Cre 和 A flox flox交配,一半cre+,另一半对照
i*0
5 楼
if you Af/f cre+ is not lethal, it is better to do as Dua said. but bear in
mind that some cre line already has effect in the tissues or cells they
express.
mind that some cre line already has effect in the tissues or cells they
express.
n*n
6 楼
Usually mate wt/lox cre+ each other and then use wt/wt cre+ as control to
compare lox/lox cre+ one. One question: how can you get wt/lox Tek- mice if
you just mate lox/lox with Tek one?
mice。
Tek-
【在 w***j 的大作中提到】
: 前辈们指教一下:
: 我有一个A flox/flox 的mice,需要和Tek-Cre杂交,得到血液系统敲除的A -/- mice。
: Breeding程序如下:
: 1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
: 2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种:
: "Rictor wt/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek-"
: "Rictor flox/wt Tek-"
: "Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
compare lox/lox cre+ one. One question: how can you get wt/lox Tek- mice if
you just mate lox/lox with Tek one?
mice。
Tek-
【在 w***j 的大作中提到】
: 前辈们指教一下:
: 我有一个A flox/flox 的mice,需要和Tek-Cre杂交,得到血液系统敲除的A -/- mice。
: Breeding程序如下:
: 1. A flox/flox mating with Tek+ 得到 "A wt/lox Tek+" and "A wt/lox Tek-"
: 2. "A flox/flox" mating with "A wt/flox Tek+" 得到以下四种:
: "Rictor wt/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek+"
: "Rictor flox/flox Tek-"
: "Rictor flox/wt Tek-"
: "Rictor flox/flox Tek+"是我要的KO, 称为Hem_A -/-, 那么"Rictor flox/flox Tek-
h*n
7 楼
我觉得最终的比较组:
Rictor wt/flox Tek+
Rictor flox/flox Tek+
Rictor wt/wt Tek+
Rictor wt/flox Tek+
Rictor flox/flox Tek+
Rictor wt/wt Tek+
i*0
8 楼
亲代tek-cre 又不一定是homozygote,子代可以是+也可以是-。
D*a
9 楼
control说起来可以到四五个组,不过你光control就别想做实验了
我建议你看看你的cre都有谁用,有没有副作用,没有就算了,人家能发一个对照的,
你也能发。另外自己稍微留心下你主要的phenotype是不是cre的作用,留点data, 你
到时候引一下别人的,再data not shown一下就行了。
就算你最后要发cns,也别还没思路的时候第一个实验就上一堆对照,你先有点思路了
,再想想怎么加对照也不迟。
我建议你看看你的cre都有谁用,有没有副作用,没有就算了,人家能发一个对照的,
你也能发。另外自己稍微留心下你主要的phenotype是不是cre的作用,留点data, 你
到时候引一下别人的,再data not shown一下就行了。
就算你最后要发cns,也别还没思路的时候第一个实验就上一堆对照,你先有点思路了
,再想想怎么加对照也不迟。
w*j
11 楼
说句实话 我有点晕
这个Cre的事情确实太复杂 Control的用法几乎每篇文章都不一样
我就想 到时候Reviewer想毙掉这篇文章,随便找个control不够的理由不就拒掉了吗
嗨!
这个Cre的事情确实太复杂 Control的用法几乎每篇文章都不一样
我就想 到时候Reviewer想毙掉这篇文章,随便找个control不够的理由不就拒掉了吗
嗨!
w*j
12 楼
Dua说的是最简洁的一种,最后的就是A flox/flox;Cre和A flox/flox,后者是对照组
,但这种做法完全不考虑Cre的影响。
htscorpion的方法比较复杂,还要同A wt/wt;Cre作对照,可能更为严格一些,但也更
为复杂。
,但这种做法完全不考虑Cre的影响。
htscorpion的方法比较复杂,还要同A wt/wt;Cre作对照,可能更为严格一些,但也更
为复杂。
w*j
13 楼
无论怎样 都要谢谢大家!
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