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帮忙troubleshooting一下我的culture contamination问题
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帮忙troubleshooting一下我的culture contamination问题# Biology - 生物学
f*d
1
因为公司比较小,没有inhouse的律师专门负责移民事务,所以虽然愿意资助我的H1B申
请,但是需要我自己来操作。我也在bbs上找了一些前人自己成功申请的案例,但是还
是有一些点觉得不清晰,所以在此跪求各位达人指点了!
根据公司那边,job offer和H1B申请所需要的petition letter已经寄出了,但是现在
还在等physical copy。
在此有几个问题:
1. 根据前人的经验,是否把以下几个材料准备好然后寄给公司所在地的INS就行?
"a.Check in the amount of $190;
b.Form I-129;
c.Certified Form ETA 9035 and 9035 CP;
d.Petition Letter;
e.Copy of your resume, Passport, I-94, Visa, Social Security Card,
Form I-20, Diploma"
但是我现在还没有毕业所以没有拿到学位证,所以没有diploma,这样可以吗?
2. 材料是必须经由公司寄出吗?还是自己寄往INS即可?
3.LCA的申请表格中的联系人和邮箱是不是一定要留公司相关部门头头的?这样的话LCA
得到批准后,批准会直接发送到公司头头的邮箱里是吗?所以一旦批准后,再请公司的
负责人在自己存档的pending LCA form pdf file上签字就可以是吗?
4. 我已经申请了OPT但是还没有拿到,这样的话H1B的申请材料中就会缺失OPT获准的支
持材料,是否会造成麻烦呢?
拜托各位大牛给予指点了,小妹不胜感激~~~~
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T*t
2
这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture
就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能
确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。
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n*y
3
留信了
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T*t
4
另外我还有个culture,长得速度正常,可是会出现这种团状悬浮物,摇也摇不散。我
以前有culture overgrow的时候也没有这种情况出现,看着又不像是真菌污染,这个又
会是什么情况呢?

culture

【在 T**********t 的大作中提到】
: 这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture
: 就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能
: 确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。

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c*g
6
你在长啥菌

culture

【在 T**********t 的大作中提到】
: 这个culture开始长得好像正常,虽然慢一点。可是过了大概十三四个小时之后culture
: 就开始变清,然后出现这种短线状悬浮物。我怀疑是phage contamination,可是不能
: 确定,有没有人有经验的?如果真是phage就惨了。。。

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T*t
7
E.coli的BL21(DE3)pLysS strain。带的质粒是个小质粒,表达的蛋白不大,只有7kD,
没有细胞毒性。用的培养基是LB+M9 salts,抗生素是Amp+Chloramphenicol。关键是以
前摇菌(同一个strain)都没有这个问题,最近屡屡出现,我不知道是哪里
contaminate了,如果是phage的话,就恐慌了,据说很难清除phage。

【在 c********g 的大作中提到】
: 你在长啥菌
:
: culture

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c*g
8
你有没有streak for isolation 以后 take single colony,然后把antibiotics和
medium都换过吗?
inoculate的时候小心些,不要用什么牙签之类的,也不要用wire loop。。试试用长的
sterile的pipette
看着跟bacilli似的

【在 T**********t 的大作中提到】
: E.coli的BL21(DE3)pLysS strain。带的质粒是个小质粒,表达的蛋白不大,只有7kD,
: 没有细胞毒性。用的培养基是LB+M9 salts,抗生素是Amp+Chloramphenicol。关键是以
: 前摇菌(同一个strain)都没有这个问题,最近屡屡出现,我不知道是哪里
: contaminate了,如果是phage的话,就恐慌了,据说很难清除phage。

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T*t
9
我都是从streak的fresh plate上挑的单菌落。Medium和antibiotics肯定是好的。
inoculate我都是用sterile pipette tips。
如果是bacilli,为什么一开始会是正常的cloudy的菌液,然后慢慢变清出现这种悬浮
纤维状物质呢?我没养过bacilli,不知道它的生长状况是如何的。
第二张图里那种一团团的菌体是什么呢?除了它之外,那管菌液本身的生长状态和浊度
倒是挺正常的。

【在 c********g 的大作中提到】
: 你有没有streak for isolation 以后 take single colony,然后把antibiotics和
: medium都换过吗?
: inoculate的时候小心些,不要用什么牙签之类的,也不要用wire loop。。试试用长的
: sterile的pipette
: 看着跟bacilli似的

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