s*p
2 楼
王祖贤很漂亮么？
我怎么觉得在演员里中下。
有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
我怎么觉得在演员里中下。
有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
c*h
3 楼
ipad 2
我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
有啥内存管理app好推荐的么？
我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
有啥内存管理app好推荐的么？
h*y
4 楼
从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
道是出现了假KO的情况?
给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
道是出现了假KO的情况?
w*k
5 楼
你女ID吧。
王祖贤最著名的是她的腿，不是长相。
李嘉欣属于克夫相。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
王祖贤最著名的是她的腿，不是长相。
李嘉欣属于克夫相。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
l*t
6 楼
系统提示你内存不够还是apps自己crash了你觉得它不够？
我也遇到几次这个问题，昨天用奇艺高清的时候每次都会crash，其他的没问题
我也遇到几次这个问题，昨天用奇艺高清的时候每次都会crash，其他的没问题
h*y
7 楼
如果是假KO,我是不是该去买点彩票了
天啦
天啦
w*k
8 楼
群众意见也分男女。
女人认为是美女的，男人认为一般。
女人认为是骚货狐狸精的，男人认为是美女。
女人认为是美女的，男人认为一般。
女人认为是骚货狐狸精的，男人认为是美女。
x*q
9 楼
浏览器 看漫画都比较吃内存，
尤其是浏览器，后台以后内存好像是不释放的。。。
store，这都能内存不够？？？？
【在 c*****h 的大作中提到】
: ipad 2
: 我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
: 有啥内存管理app好推荐的么？
尤其是浏览器，后台以后内存好像是不释放的。。。
store，这都能内存不够？？？？
【在 c*****h 的大作中提到】
: ipad 2
: 我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
: 有啥内存管理app好推荐的么？
H*N
10 楼
How was the KO made, by homologous recombination or gene trapping? Why is
there cre in it? If the mouse is made by gene trapping, it is possible the
gene is not knocked out completely, depending on where the gene trapping
cassette is located. Another remote possiblity is that there is another
related or duplicated gene in the genome, and thus your results.
there cre in it? If the mouse is made by gene trapping, it is possible the
gene is not knocked out completely, depending on where the gene trapping
cassette is located. Another remote possiblity is that there is another
related or duplicated gene in the genome, and thus your results.
L*a
11 楼
我记得天涯有个帖子有海量的唯美古装剧照，霞玉红贤里面古装最美的还是王祖贤啊，
气场强大。
气场强大。
a*a
12 楼
不是之前这里几位都说从来不关，开几十个后台程序跑着无压力吗。。。
store，这都能内存不够？？？？
【在 c*****h 的大作中提到】
: ipad 2
: 我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
: 有啥内存管理app好推荐的么？
store，这都能内存不够？？？？
【在 c*****h 的大作中提到】
: ipad 2
: 我后台就开了几个而已，一个看漫画，一个app shopper，一个浏览器，一个app store，这都能内存不够？？？？
: 有啥内存管理app好推荐的么？
O*e
13 楼
刚开始拿到老鼠的时候，你们做soutern blot了嘛？
【在 h*****y 的大作中提到】
: 从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
: 给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
: 培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
: 我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
: 感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
: 附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
: 道是出现了假KO的情况?
【在 h*****y 的大作中提到】
: 从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
: 给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
: 培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
: 我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
: 感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
: 附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
: 道是出现了假KO的情况?
o*e
14 楼
霞玉芳红好不好，王祖贤哪有那地位
【在 L*****a 的大作中提到】
: 我记得天涯有个帖子有海量的唯美古装剧照，霞玉红贤里面古装最美的还是王祖贤啊，
: 气场强大。
【在 L*****a 的大作中提到】
: 我记得天涯有个帖子有海量的唯美古装剧照，霞玉红贤里面古装最美的还是王祖贤啊，
: 气场强大。
c*h
15 楼
是app自己crash了
然后mercury那个浏览器也有内存不足提示
【在 l******t 的大作中提到】
: 系统提示你内存不够还是apps自己crash了你觉得它不够？
: 我也遇到几次这个问题，昨天用奇艺高清的时候每次都会crash，其他的没问题
然后mercury那个浏览器也有内存不足提示
【在 l******t 的大作中提到】
: 系统提示你内存不够还是apps自己crash了你觉得它不够？
: 我也遇到几次这个问题，昨天用奇艺高清的时候每次都会crash，其他的没问题
h*y
16 楼
It's a homologous recombination deleting one exon. And this gene is a member
of protein family.
【在 H****N 的大作中提到】
: How was the KO made, by homologous recombination or gene trapping? Why is
: there cre in it? If the mouse is made by gene trapping, it is possible the
: gene is not knocked out completely, depending on where the gene trapping
: cassette is located. Another remote possiblity is that there is another
: related or duplicated gene in the genome, and thus your results.
of protein family.
【在 H****N 的大作中提到】
: How was the KO made, by homologous recombination or gene trapping? Why is
: there cre in it? If the mouse is made by gene trapping, it is possible the
: gene is not knocked out completely, depending on where the gene trapping
: cassette is located. Another remote possiblity is that there is another
: related or duplicated gene in the genome, and thus your results.
w*k
17 楼
王祖贤亮亮大腿，票房就上去了，古装三级二合一的效果谁能比。
【在 o***e 的大作中提到】
: 霞玉芳红好不好，王祖贤哪有那地位
【在 o***e 的大作中提到】
: 霞玉芳红好不好，王祖贤哪有那地位
x*q
18 楼
如果不是浏览器确实如此，
我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
但是我不觉得那些后台程序都在跑着
【在 a***a 的大作中提到】
: 不是之前这里几位都说从来不关，开几十个后台程序跑着无压力吗。。。
:
: store，这都能内存不够？？？？
我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
但是我不觉得那些后台程序都在跑着
【在 a***a 的大作中提到】
: 不是之前这里几位都说从来不关，开几十个后台程序跑着无压力吗。。。
:
: store，这都能内存不够？？？？
h*y
19 楼
没做过，老大。 不过公司的GENOTYPING 引物有两对，一对设计在敲掉的外显子两侧，
另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
可靠的。
【在 O******e 的大作中提到】
: 刚开始拿到老鼠的时候，你们做soutern blot了嘛？
另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
可靠的。
【在 O******e 的大作中提到】
: 刚开始拿到老鼠的时候，你们做soutern blot了嘛？
z*c
20 楼
刘亦菲给王祖贤提鞋都不配
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
c*h
21 楼
不同时开漫画和浏览器的话，后台几十个貌似没事。
我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
crash。
现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
【在 a***a 的大作中提到】
: 不是之前这里几位都说从来不关，开几十个后台程序跑着无压力吗。。。
:
: store，这都能内存不够？？？？
我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
crash。
现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
【在 a***a 的大作中提到】
: 不是之前这里几位都说从来不关，开几十个后台程序跑着无压力吗。。。
:
: store，这都能内存不够？？？？
D*a
22 楼
既然是cre来ko的，是不是cre的表达量和表达的cell type问题？
w*l
23 楼
王当年号称亚洲第一美腿，
到日本做节目，在街上走的时候，摄像机直接对着黑丝大腿拍，
卫视中文台放的。
【在 w****k 的大作中提到】
: 你女ID吧。
: 王祖贤最著名的是她的腿，不是长相。
: 李嘉欣属于克夫相。
到日本做节目，在街上走的时候，摄像机直接对着黑丝大腿拍，
卫视中文台放的。
【在 w****k 的大作中提到】
: 你女ID吧。
: 王祖贤最著名的是她的腿，不是长相。
: 李嘉欣属于克夫相。
c*h
24 楼
嗯，我的inotia 3，经常挂在后台，如果前台不用大程序大游戏漫画这样的，切换后
inotia 3还是在原来界面，但是如果前台用内存狠，等切换inotia 3的时候，就好像重新打开游戏一样……
而且后台下载有时候也不行，都是因为前台内存用太狠的缘故。
【在 x***q 的大作中提到】
: 如果不是浏览器确实如此，
: 我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
: 但是我不觉得那些后台程序都在跑着
inotia 3还是在原来界面，但是如果前台用内存狠，等切换inotia 3的时候，就好像重新打开游戏一样……
而且后台下载有时候也不行，都是因为前台内存用太狠的缘故。
【在 x***q 的大作中提到】
: 如果不是浏览器确实如此，
: 我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
: 但是我不觉得那些后台程序都在跑着
D*a
25 楼
你的意思是两个loxp外侧还是内侧？
一对设计在敲掉的外显子两侧，
【在 h*****y 的大作中提到】
: 没做过，老大。 不过公司的GENOTYPING 引物有两对，一对设计在敲掉的外显子两侧，
: 另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
: 可靠的。
一对设计在敲掉的外显子两侧，
【在 h*****y 的大作中提到】
: 没做过，老大。 不过公司的GENOTYPING 引物有两对，一对设计在敲掉的外显子两侧，
: 另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
: 可靠的。
f*j
26 楼
看来看去还是王祖贤的小倩最佳。。恩
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
a*a
27 楼
你试试开个overkill试试，哼哼
【在 x***q 的大作中提到】
: 如果不是浏览器确实如此，
: 我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
: 但是我不觉得那些后台程序都在跑着
【在 x***q 的大作中提到】
: 如果不是浏览器确实如此，
: 我的ipad 1经常后台几十个kids app,内存还是很多。。
: 但是我不觉得那些后台程序都在跑着
h*y
28 楼
CRE是公司用的ES细胞转基因带来的为了方便重组,我们拿到老鼠后通过杂交已经把CRE
去掉了,现在我们的老鼠里已经没有CRE了.
【在 D*a 的大作中提到】
: 既然是cre来ko的，是不是cre的表达量和表达的cell type问题？
去掉了,现在我们的老鼠里已经没有CRE了.
【在 D*a 的大作中提到】
: 既然是cre来ko的，是不是cre的表达量和表达的cell type问题？
D*l
29 楼
漂不漂亮都是相对那个时代而说的，审美也变化很多。
现在的小孩也不会太感冒
特别影视圈的红颜易老，新人胜旧人。我们怀念我们的明星，后辈小孩追的也是自己的星
现在的小孩也不会太感冒
特别影视圈的红颜易老，新人胜旧人。我们怀念我们的明星，后辈小孩追的也是自己的星
c*h
30 楼
那玩意儿吃内存么？我下了从来没打过……
【在 a***a 的大作中提到】
: 你试试开个overkill试试，哼哼
【在 a***a 的大作中提到】
: 你试试开个overkill试试，哼哼
h*y
31 楼
第一对引物设计在LOXP外侧,第二对引物中一个引物在外侧另一个在里面
【在 D*a 的大作中提到】
: 你的意思是两个loxp外侧还是内侧？
:
: 一对设计在敲掉的外显子两侧，
【在 D*a 的大作中提到】
: 你的意思是两个loxp外侧还是内侧？
:
: 一对设计在敲掉的外显子两侧，
m*d
32 楼
王祖贤有点傻大姐样，还是邱淑贞sweet
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
x*q
33 楼
有啥app 支持后台下载？一直想要一个。。。
重新打开游戏一样……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 嗯，我的inotia 3，经常挂在后台，如果前台不用大程序大游戏漫画这样的，切换后
: inotia 3还是在原来界面，但是如果前台用内存狠，等切换inotia 3的时候，就好像重新打开游戏一样……
: 而且后台下载有时候也不行，都是因为前台内存用太狠的缘故。
重新打开游戏一样……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 嗯，我的inotia 3，经常挂在后台，如果前台不用大程序大游戏漫画这样的，切换后
: inotia 3还是在原来界面，但是如果前台用内存狠，等切换inotia 3的时候，就好像重新打开游戏一样……
: 而且后台下载有时候也不行，都是因为前台内存用太狠的缘故。
D*a
34 楼
对cre 很好奇，能告诉是什么cre和怎么作用不？
b*l
35 楼
王祖贤还是非常美的，而且腿型特别好，
记得以前看过一个她跟齐秦的mtv， 她腿型特别正！
记得以前看过一个她跟齐秦的mtv， 她腿型特别正！
f*h
36 楼
估计是mercury的问题，偶同时开漫画和icab浏览器就没事
重启试试吧~
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不同时开漫画和浏览器的话，后台几十个貌似没事。
: 我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
: wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
: crash。
: 现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
: ，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
重启试试吧~
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不同时开漫画和浏览器的话，后台几十个貌似没事。
: 我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
: wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
: crash。
: 现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
: ，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
H*N
37 楼
It seems to me that your western is not reliable. As to the RT-PCR, you
should use primers spaning the dedleted exon to check that exon is actually
gone. Remember, after deleting one exon, the rest of the gene can still be
transcribed and make a deleted mRNA.
member
【在 h*****y 的大作中提到】
: It's a homologous recombination deleting one exon. And this gene is a member
: of protein family.
should use primers spaning the dedleted exon to check that exon is actually
gone. Remember, after deleting one exon, the rest of the gene can still be
transcribed and make a deleted mRNA.
member
【在 h*****y 的大作中提到】
: It's a homologous recombination deleting one exon. And this gene is a member
: of protein family.
w*k
38 楼
大腿是人类永恒的追求。
的星
【在 D******l 的大作中提到】
: 漂不漂亮都是相对那个时代而说的，审美也变化很多。
: 现在的小孩也不会太感冒
: 特别影视圈的红颜易老，新人胜旧人。我们怀念我们的明星，后辈小孩追的也是自己的星
的星
【在 D******l 的大作中提到】
: 漂不漂亮都是相对那个时代而说的，审美也变化很多。
: 现在的小孩也不会太感冒
: 特别影视圈的红颜易老，新人胜旧人。我们怀念我们的明星，后辈小孩追的也是自己的星
l*e
39 楼
看漫画的利器
请问是看PDF的，还是图片儿的？
请问是看PDF的，还是图片儿的？
D*a
40 楼
那这个 deleted mRNA 能翻译成蛋白吗？
actually
【在 H****N 的大作中提到】
: It seems to me that your western is not reliable. As to the RT-PCR, you
: should use primers spaning the dedleted exon to check that exon is actually
: gone. Remember, after deleting one exon, the rest of the gene can still be
: transcribed and make a deleted mRNA.
:
: member
actually
【在 H****N 的大作中提到】
: It seems to me that your western is not reliable. As to the RT-PCR, you
: should use primers spaning the dedleted exon to check that exon is actually
: gone. Remember, after deleting one exon, the rest of the gene can still be
: transcribed and make a deleted mRNA.
:
: member
d*n
41 楼
在那个时代，她算很漂亮的了。
现在生活水平提高，美女数量也多了，不能用现在的眼光看以前的美女。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
现在生活水平提高，美女数量也多了，不能用现在的眼光看以前的美女。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
c*h
42 楼
难道我还得再花钱去买个icab？呃……
所以说，没有试用真烦，买软件前连比较都不能……
【在 f********h 的大作中提到】
: 估计是mercury的问题，偶同时开漫画和icab浏览器就没事
: 重启试试吧~
所以说，没有试用真烦，买软件前连比较都不能……
【在 f********h 的大作中提到】
: 估计是mercury的问题，偶同时开漫画和icab浏览器就没事
: 重启试试吧~
O*e
43 楼
Is this possible that your targeting cassette was inserted somewhere else?
Make sure the primers you were using can tell you if they are amplifying
your gene locus, not the targeting cassette.
One round of Southern blot should answer all your questions.
【在 h*****y 的大作中提到】
: 没做过，老大。 不过公司的GENOTYPING 引物有两对，一对设计在敲掉的外显子两侧，
: 另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
: 可靠的。
Make sure the primers you were using can tell you if they are amplifying
your gene locus, not the targeting cassette.
One round of Southern blot should answer all your questions.
【在 h*****y 的大作中提到】
: 没做过，老大。 不过公司的GENOTYPING 引物有两对，一对设计在敲掉的外显子两侧，
: 另一个设计在敲掉的外显子上，感觉这两对引物PCR检测外显子有没有被KO掉，还是蛮
: 可靠的。
s3
44 楼
更准确的说，现在是人造美女数量多了
【在 d*****n 的大作中提到】
: 在那个时代，她算很漂亮的了。
: 现在生活水平提高，美女数量也多了，不能用现在的眼光看以前的美女。
【在 d*****n 的大作中提到】
: 在那个时代，她算很漂亮的了。
: 现在生活水平提高，美女数量也多了，不能用现在的眼光看以前的美女。
c*h
45 楼
看rar里的图片，我用bookman。
【在 l*******e 的大作中提到】
: 看漫画的利器
: 请问是看PDF的，还是图片儿的？
【在 l*******e 的大作中提到】
: 看漫画的利器
: 请问是看PDF的，还是图片儿的？
H*N
46 楼
It depends. If the rest of the mRNA is still in frame, a truncated protein
can still be produced. Remember that lz does not have definitive evidence
that a protein can still be produced from the ko allele.
【在 D***a 的大作中提到】
: 那这个 deleted mRNA 能翻译成蛋白吗？
:
: actually
can still be produced. Remember that lz does not have definitive evidence
that a protein can still be produced from the ko allele.
【在 D***a 的大作中提到】
: 那这个 deleted mRNA 能翻译成蛋白吗？
:
: actually
P*l
47 楼
游园惊梦里那叫一个丑
f*h
48 楼
也说不定是你down得太狠了，呵呵
【在 c*****h 的大作中提到】
: 难道我还得再花钱去买个icab？呃……
: 所以说，没有试用真烦，买软件前连比较都不能……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 难道我还得再花钱去买个icab？呃……
: 所以说，没有试用真烦，买软件前连比较都不能……
D*a
49 楼
还有要看你们当时是怎么决定的KO的strategy吧
像我们的老鼠敲掉的是跨膜蛋白的ligand结合位点的exon，然后敲掉之后在下一个exon
中造成移码突变，然后造成几个stop，这样就确保蛋白质没有作用。
还有我们的引物设计是这样的
引物a －－loxp－exon－－引物b－－loxp－－反向引物c
这样wt和lox是靠bc来区别，ac相比之下太长扩增效率很低，ko之后就是ac扩增，这样
wt lox excised都可以用这三个引物来区分。我觉得这种pcr比你的好些，要不你自己
重新设计引物试试吧。
像我们的老鼠敲掉的是跨膜蛋白的ligand结合位点的exon，然后敲掉之后在下一个exon
中造成移码突变，然后造成几个stop，这样就确保蛋白质没有作用。
还有我们的引物设计是这样的
引物a －－loxp－exon－－引物b－－loxp－－反向引物c
这样wt和lox是靠bc来区别，ac相比之下太长扩增效率很低，ko之后就是ac扩增，这样
wt lox excised都可以用这三个引物来区分。我觉得这种pcr比你的好些，要不你自己
重新设计引物试试吧。
w*0
50 楼
李嘉欣漂亮是漂亮，演技和气质（在电影里的气质）差王祖贤不是一点半点。
中下太夸张啦，个人认为王绝对是个大美女，而且耐看，刘亦菲当年刚出来时我觉得很
漂亮，怎么越看越一般。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
中下太夸张啦，个人认为王绝对是个大美女，而且耐看，刘亦菲当年刚出来时我觉得很
漂亮，怎么越看越一般。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
c*h
51 楼
不down也被mercury提示内存不足啊，它有这个提示功能……
我run了一个内存软件看，的确，512mb的内存没剩下多少……
【在 f********h 的大作中提到】
: 也说不定是你down得太狠了，呵呵
我run了一个内存软件看，的确，512mb的内存没剩下多少……
【在 f********h 的大作中提到】
: 也说不定是你down得太狠了，呵呵
a*g
52 楼
what kind of Cre did you use?
If you happened to have SOX2-Cre, you will be able to get good KO( of target
ed site).
I'm assuming you are doing appropriate control of the genotyping, with both
WT primers and recombinant primers...
How big was the targeted exon? where is your qRT-PCR targeting? Having one p
rimer locating in the exon may help to clarify whether deletion of the exon
occurred...
【在 h*****y 的大作中提到】
: 从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
: 给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
: 培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
: 我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
: 感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
: 附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
: 道是出现了假KO的情况?
If you happened to have SOX2-Cre, you will be able to get good KO( of target
ed site).
I'm assuming you are doing appropriate control of the genotyping, with both
WT primers and recombinant primers...
How big was the targeted exon? where is your qRT-PCR targeting? Having one p
rimer locating in the exon may help to clarify whether deletion of the exon
occurred...
【在 h*****y 的大作中提到】
: 从公司订制的KO老鼠,带CRE基因,大半年折腾下来去掉CRE并拿到大量杂合子,按照公司
: 给的DATA SHEET, GENOTYPING双引物鉴定老鼠各基因表型正常,符合孟德尔遗传,但在对
: 培养的野生型和纯合子MEF细胞鉴定时,我发现虽然公司给的GENOTYPING鉴定没问题,但
: 我用RT-PCR和WB鉴定KO纯合子细胞时却都能发现该基因蛋白表达(重复多次),所以现在
: 感到非常困惑,我鉴定做WB的抗体是找公司制备的,非特异条带虽然有点多,但目的大小
: 附近有条带,而REAL-TIME PCR我之前一直用来鉴定SIRNA的KNOCKDOWN,效果也非常好,难
: 道是出现了假KO的情况?
s*y
53 楼
王祖贤的确有点男相，不过好几个特别著名的美女都有一点点男相，
比方说林青霞，米雪，钟楚红等，都有点男人轮廓
李嘉欣。。。怎么说好呢？单独看很漂亮，但是把她和王祖贤或者林青霞
放在一起就觉得比她们差很多。。。
但是很奇怪的是把王或者林单独放出来的话又觉得她们好像不是很漂亮。。。
可能是因为这种有一点点男相的美女因为有特色，所以和别人比就很漂亮吧？
女相的美女中，我觉得赵雅芝是最漂亮的，其次是陈玉莲，还有整容前的
关之琳算一个吧（她整容后把下巴拉长了突然就丑了很多）
李嘉欣，说实话很漂亮，李嘉欣整容前脸很大，下巴很大，颧骨也很高的，
其实也倒不难看。但是现在整容整得挺狠的，现在根本不是她原来的样子
看起来特别端正，但就是总觉得不是那么舒服，总有点，好像，那里
不对劲的感觉。大概就是有点像看到一只充气娃娃的感觉吧？总觉得不是真人。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
比方说林青霞，米雪，钟楚红等，都有点男人轮廓
李嘉欣。。。怎么说好呢？单独看很漂亮，但是把她和王祖贤或者林青霞
放在一起就觉得比她们差很多。。。
但是很奇怪的是把王或者林单独放出来的话又觉得她们好像不是很漂亮。。。
可能是因为这种有一点点男相的美女因为有特色，所以和别人比就很漂亮吧？
女相的美女中，我觉得赵雅芝是最漂亮的，其次是陈玉莲，还有整容前的
关之琳算一个吧（她整容后把下巴拉长了突然就丑了很多）
李嘉欣，说实话很漂亮，李嘉欣整容前脸很大，下巴很大，颧骨也很高的，
其实也倒不难看。但是现在整容整得挺狠的，现在根本不是她原来的样子
看起来特别端正，但就是总觉得不是那么舒服，总有点，好像，那里
不对劲的感觉。大概就是有点像看到一只充气娃娃的感觉吧？总觉得不是真人。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
f*h
54 楼
那就怪了，mercury能用多少内存啊，想当年奔4的256mb台式机都run得好好的……
你sure后台程序都关了么？
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不down也被mercury提示内存不足啊，它有这个提示功能……
: 我run了一个内存软件看，的确，512mb的内存没剩下多少……
你sure后台程序都关了么？
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不down也被mercury提示内存不足啊，它有这个提示功能……
: 我run了一个内存软件看，的确，512mb的内存没剩下多少……
h*y
55 楼
Thanks everybody for many useful suggestion!
I guess maybe it's my identifying problem because my ab is not good and my Q
-PCR primers are also just targeting another exon. I will try to design new
identifying primers tageting the deleted exon.
I guess maybe it's my identifying problem because my ab is not good and my Q
-PCR primers are also just targeting another exon. I will try to design new
identifying primers tageting the deleted exon.
s*y
56 楼
c*h
57 楼
后台颇有几个app在，但不是说后台十几个都没问题的吗？以前ipad 1貌似没问题的。
【在 f********h 的大作中提到】
: 那就怪了，mercury能用多少内存啊，想当年奔4的256mb台式机都run得好好的……
: 你sure后台程序都关了么？
【在 f********h 的大作中提到】
: 那就怪了，mercury能用多少内存啊，想当年奔4的256mb台式机都run得好好的……
: 你sure后台程序都关了么？
s*p
58 楼
我也从来没觉得林青霞，米雪多漂亮。
感觉我的审美有点问题。不过发现绝大多数人都公认李嘉欣很漂亮。就像公认演郝思嘉
的女演员漂亮一样。
附了几张王祖贤的图。
感觉她脸型不很标致，因此有些镜头照出来就不好看。
标致的人，是很多镜头都经得起照的。
比如刘亦菲，正面，侧面都不错。但是半侧面，再加上笑，就觉得包子脸特别突出。
【在 s******y 的大作中提到】
: 王祖贤的确有点男相，不过好几个特别著名的美女都有一点点男相，
: 比方说林青霞，米雪，钟楚红等，都有点男人轮廓
: 李嘉欣。。。怎么说好呢？单独看很漂亮，但是把她和王祖贤或者林青霞
: 放在一起就觉得比她们差很多。。。
: 但是很奇怪的是把王或者林单独放出来的话又觉得她们好像不是很漂亮。。。
: 可能是因为这种有一点点男相的美女因为有特色，所以和别人比就很漂亮吧？
: 女相的美女中，我觉得赵雅芝是最漂亮的，其次是陈玉莲，还有整容前的
: 关之琳算一个吧（她整容后把下巴拉长了突然就丑了很多）
: 李嘉欣，说实话很漂亮，李嘉欣整容前脸很大，下巴很大，颧骨也很高的，
: 其实也倒不难看。但是现在整容整得挺狠的，现在根本不是她原来的样子
感觉我的审美有点问题。不过发现绝大多数人都公认李嘉欣很漂亮。就像公认演郝思嘉
的女演员漂亮一样。
附了几张王祖贤的图。
感觉她脸型不很标致，因此有些镜头照出来就不好看。
标致的人，是很多镜头都经得起照的。
比如刘亦菲，正面，侧面都不错。但是半侧面，再加上笑，就觉得包子脸特别突出。
【在 s******y 的大作中提到】
: 王祖贤的确有点男相，不过好几个特别著名的美女都有一点点男相，
: 比方说林青霞，米雪，钟楚红等，都有点男人轮廓
: 李嘉欣。。。怎么说好呢？单独看很漂亮，但是把她和王祖贤或者林青霞
: 放在一起就觉得比她们差很多。。。
: 但是很奇怪的是把王或者林单独放出来的话又觉得她们好像不是很漂亮。。。
: 可能是因为这种有一点点男相的美女因为有特色，所以和别人比就很漂亮吧？
: 女相的美女中，我觉得赵雅芝是最漂亮的，其次是陈玉莲，还有整容前的
: 关之琳算一个吧（她整容后把下巴拉长了突然就丑了很多）
: 李嘉欣，说实话很漂亮，李嘉欣整容前脸很大，下巴很大，颧骨也很高的，
: 其实也倒不难看。但是现在整容整得挺狠的，现在根本不是她原来的样子
f*h
59 楼
无解……偶后台十几个好像是没问题的……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 后台颇有几个app在，但不是说后台十几个都没问题的吗？以前ipad 1貌似没问题的。
【在 c*****h 的大作中提到】
: 后台颇有几个app在，但不是说后台十几个都没问题的吗？以前ipad 1貌似没问题的。
D*n
60 楼
林青霞我也是從來不覺得漂亮，後來看了她17歲時候的樣子才知道，我看到的都是她老
了的樣子，17歲或者更早時比較漂亮。
王祖賢以前覺得漂亮，現在會看，覺得很一般，臉部線條很粗，特別是早期的片子，眉
毛那個粗啊。。。
【在 s****p 的大作中提到】
: 我也从来没觉得林青霞，米雪多漂亮。
: 感觉我的审美有点问题。不过发现绝大多数人都公认李嘉欣很漂亮。就像公认演郝思嘉
: 的女演员漂亮一样。
: 附了几张王祖贤的图。
: 感觉她脸型不很标致，因此有些镜头照出来就不好看。
: 标致的人，是很多镜头都经得起照的。
: 比如刘亦菲，正面，侧面都不错。但是半侧面，再加上笑，就觉得包子脸特别突出。
了的樣子，17歲或者更早時比較漂亮。
王祖賢以前覺得漂亮，現在會看，覺得很一般，臉部線條很粗，特別是早期的片子，眉
毛那個粗啊。。。
【在 s****p 的大作中提到】
: 我也从来没觉得林青霞，米雪多漂亮。
: 感觉我的审美有点问题。不过发现绝大多数人都公认李嘉欣很漂亮。就像公认演郝思嘉
: 的女演员漂亮一样。
: 附了几张王祖贤的图。
: 感觉她脸型不很标致，因此有些镜头照出来就不好看。
: 标致的人，是很多镜头都经得起照的。
: 比如刘亦菲，正面，侧面都不错。但是半侧面，再加上笑，就觉得包子脸特别突出。
c*h
61 楼
你用mercury不？
【在 f********h 的大作中提到】
: 无解……偶后台十几个好像是没问题的……
【在 f********h 的大作中提到】
: 无解……偶后台十几个好像是没问题的……
G*p
62 楼
是很漂亮，很有气质，她演的白蛇很媚。
现在都是一类美女：锥子脸，睫毛弄得卷卷的，没有特点。
现在都是一类美女：锥子脸，睫毛弄得卷卷的，没有特点。
l*t
63 楼
mercury是啥？用来download？
p*n
64 楼
f*h
65 楼
不用，只是icab...可能是mercury的问题……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 你用mercury不？
【在 c*****h 的大作中提到】
: 你用mercury不？
f*r
66 楼
还是张曼玉漂亮，基本上大家都没意见
f*h
67 楼
browser，功能比safari强大的多！
【在 l******t 的大作中提到】
: mercury是啥？用来download？
【在 l******t 的大作中提到】
: mercury是啥？用来download？
r*n
68 楼
李嘉欣长得实在是太端正了，但是从来不觉得她美。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
【在 s****p 的大作中提到】
: 王祖贤很漂亮么？
: 我怎么觉得在演员里中下。
: 有些男像。很多镜头都不大好看。当然，肯定也有不少镜头很好看，但是占少数。
: 张曼玉不标志。但是女像（就是说一看就女性的五官）
: 李嘉欣我认为很漂亮。像那个演Scarlet的演员那种类型的漂亮。
: 肯定有人拍。就是看看群众怎么个青菜萝卜各有所爱，呵呵。
c*h
69 楼
那看来俺只能再去买icab来当小白鼠咯……
没试用真烦，总不能全买下来测试……还有atomic和啥啥啥……
【在 f********h 的大作中提到】
: 不用，只是icab...可能是mercury的问题……
没试用真烦，总不能全买下来测试……还有atomic和啥啥啥……
【在 f********h 的大作中提到】
: 不用，只是icab...可能是mercury的问题……
c*e
70 楼
倩女幽魂系列里李嘉欣演小倩的妹妹，跟王祖贤在姐妹俩的对手戏里还是王祖贤漂亮。
虽然两个美女分开看好像李嘉欣更标致一些。
话说演倩女幽魂的时候王祖贤才20岁上下，在戏里边挑大梁很大气。
虽然两个美女分开看好像李嘉欣更标致一些。
话说演倩女幽魂的时候王祖贤才20岁上下，在戏里边挑大梁很大气。
f*h
71 楼
呵呵，icab界面比mercury差远了，不过有的时候简单可能省点内存
同意所有软件都应该有lite版……不过偶用过lite版的软件大多没再买正版，呵呵
【在 c*****h 的大作中提到】
: 那看来俺只能再去买icab来当小白鼠咯……
: 没试用真烦，总不能全买下来测试……还有atomic和啥啥啥……
同意所有软件都应该有lite版……不过偶用过lite版的软件大多没再买正版，呵呵
【在 c*****h 的大作中提到】
: 那看来俺只能再去买icab来当小白鼠咯……
: 没试用真烦，总不能全买下来测试……还有atomic和啥啥啥……
c*h
72 楼
我用lite的不爽，如果需要用，一定去买的。
【在 f********h 的大作中提到】
: 呵呵，icab界面比mercury差远了，不过有的时候简单可能省点内存
: 同意所有软件都应该有lite版……不过偶用过lite版的软件大多没再买正版，呵呵
【在 f********h 的大作中提到】
: 呵呵，icab界面比mercury差远了，不过有的时候简单可能省点内存
: 同意所有软件都应该有lite版……不过偶用过lite版的软件大多没再买正版，呵呵
f*h
73 楼
大部分情况下是用了lite版，发现原来如此，呵呵，就不买了……
好多游戏是这样的……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 我用lite的不爽，如果需要用，一定去买的。
好多游戏是这样的……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 我用lite的不爽，如果需要用，一定去买的。
c*h
74 楼
那就是还不够好，或者不太需要用。
【在 f********h 的大作中提到】
: 大部分情况下是用了lite版，发现原来如此，呵呵，就不买了……
: 好多游戏是这样的……
【在 f********h 的大作中提到】
: 大部分情况下是用了lite版，发现原来如此，呵呵，就不买了……
: 好多游戏是这样的……
f*h
75 楼
嗯，大多够好的或者知道人需要用的，都没有lite版……咳……
【在 c*****h 的大作中提到】
: 那就是还不够好，或者不太需要用。
【在 c*****h 的大作中提到】
: 那就是还不够好，或者不太需要用。
P*e
76 楼
哪下mp4电影呢， 懒得找了
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不同时开漫画和浏览器的话，后台几十个貌似没事。
: 我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
: wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
: crash。
: 现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
: ，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
【在 c*****h 的大作中提到】
: 不同时开漫画和浏览器的话，后台几十个貌似没事。
: 我当时用mercury下了600MB的mp4，还好。就是后来下个mp3，本来8MB多的，不小心
: wifi断后断点续传，变成了12MB多，然后用mercury自带的文件管理预览的时候就老
: crash。
: 现在觉得，512MB内存还是远远不够。小程序没事，大游戏大程序、漫画这样的同时开
: ，就会有人在后台被T出去……果子在3代能上1GB内存么？
x*q
77 楼
美国电影用 unlimvideos
中国电影用 mycoosh
【在 P***e 的大作中提到】
: 哪下mp4电影呢， 懒得找了
中国电影用 mycoosh
【在 P***e 的大作中提到】
: 哪下mp4电影呢， 懒得找了
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