w*z
2 楼
今年太忙,没去。有谁说说?
f*e
3 楼
买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
是没有聚合酶做PCR啊
看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
少的cDNA。
谁做过的推荐下,非常感谢!
次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
是没有聚合酶做PCR啊
看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
少的cDNA。
谁做过的推荐下,非常感谢!
b*e
4 楼
1
s*s
5 楼
[email protected]
15-30 s/kb
超级牛b,很好用
现在NEB也有卖
http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
做一
【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
: 次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下,非常感谢!
15-30 s/kb
超级牛b,很好用
现在NEB也有卖
http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
做一
【在 f*******e 的大作中提到】
: 买了个signosis的single cell real time PCR kit, 但是你面的东东实在太少了,做一
: 次预实验就消耗了不少,不知道大家有没有用另外的DNA polymerase, 不至于有CDNA但
: 是没有聚合酶做PCR啊
: 看了takara的 LA taq, EX taq,都是用来扩增长片段的,没有提到可以用于扩增非常
: 少的cDNA。
: 谁做过的推荐下,非常感谢!
b*e
6 楼
2
f*e
7 楼
只是提到快和fidelity啊,不知道是不是同样可以理解为效率高 比如极少量的模板也能
高效扩增
【在 s*********s 的大作中提到】
: [email protected]
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
高效扩增
【在 s*********s 的大作中提到】
: [email protected]
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
b*e
8 楼
3
b*e
10 楼
4
b*e
12 楼
5
L*s
13 楼
和别的没比过,但相对于Taq、Vent之类,Phusion的效率绝对高的多。我从cDNA libra
ry里扩增某些gene的cDNA,taq做不出来的,换Phusion就全做出来了,而且cDNA libra
ry的用量可以减到用taq时的1/10,可能再低也行,不过没有去试。
RTp
但是
【在 f*******e 的大作中提到】
: 我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR,就是常规的RTp
: cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
: 还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
: 么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率(灵敏)的
ry里扩增某些gene的cDNA,taq做不出来的,换Phusion就全做出来了,而且cDNA libra
ry的用量可以减到用taq时的1/10,可能再低也行,不过没有去试。
RTp
但是
【在 f*******e 的大作中提到】
: 我不是要扩增长片段 我只是要做single cell或极少量RNA RT来的PCR,就是常规的RTp
: cr 但是模板量极少。kit里都有带的DNA polymerase 但是都非常少 很快就用完了 但是
: 还剩下很多的cDNA和RNA 用自己的普通taq酶好像不怎么灵 所以请教大家有没有用过什
: 么NB的酶 很多公司的牛酶都是宣称长片段 高保真 但是没有说高效率(灵敏)的
b*e
14 楼
6
c*6
15 楼
Herculase 和phusion比怎么样?
我做的Herculase的产量是最高的。当然啦,我的PCR的底物浓度很高的那种。
【在 s*********s 的大作中提到】
: [email protected]
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
我做的Herculase的产量是最高的。当然啦,我的PCR的底物浓度很高的那种。
【在 s*********s 的大作中提到】
: [email protected]
: 15-30 s/kb
: 超级牛b,很好用
: 现在NEB也有卖
: http://www.finnzymes.fi/pcr/phusion_products.html
:
: 做一
b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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b*e
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100
b*e
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b*e
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1
b*e
59 楼
1
b*e
60 楼
1
l*g
61 楼
399999
m*o
62 楼
怎么抢
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