SDS-PAGE 样品求助# Biology - 生物学h*92010-12-18 08:121 楼比方说July - September Gas, Hotel & Theater 中的 300 cap这 300 指是的最多能拿回 300×0.05 = 15 的cashback 还是 300
p*z2010-12-18 08:124 楼最近直接用1*SDS sample buffer溶解细胞,煮10分钟,13K rpm离心后,在液体表面老是会有一层白色的不溶物,试过用超声破碎,没效果,打散之后,重新离心还是那样。换过SDS sample buffer也还是会这样。试图吸出来,一弄就散,然后和溶液混在一起。细胞在加裂解液之前都有用 PBS洗过。如果样品就这样加进去,会导致verticalstreaking,有时候50kD 以下的lane会连在一起。有人知道这是什么状况吗?或者有可能是哪些问题?谢谢赐教!
m*s2010-12-18 08:126 楼YES if:traveling and sightseeing is the only purposeANDstay less than 30 daysANDtravel to Canada onlyend if
S*M2010-12-18 08:127 楼tetherberry, 在app world里好像就有,不过名字叫tether(since RIM doesn'tallow any app with "Berry" in the name)【在 R*L 的大作中提到】: 谁知道怎么弄啊?sprint bb data plan,blackberry curve,谁知道需要安装什么软件: 用它tethering啊?
o*d2010-12-18 08:1210 楼Thanks!【在 m****s 的大作中提到】: YES if:: traveling and sightseeing is the only purpose: AND: stay less than 30 days: AND: travel to Canada only: end if
c*s2010-12-18 08:1211 楼不需要额外的软件。手机本身带的光盘上的Blackberry Desktop Software就可以。记住升级到最新版本。【在 S****M 的大作中提到】: tetherberry, 在app world里好像就有,不过名字叫tether(since RIM doesn't: allow any app with "Berry" in the name)
p*z2010-12-18 08:1212 楼H1299, lung cancer cell line【在 c******m 的大作中提到】: which type of cell are you using?
e*i2010-12-18 08:1213 楼$300 in purchase.【在 h*****9 的大作中提到】: 比方说July - September Gas, Hotel & Theater 中的 300 cap: 这 300 指是的最多能拿回 300×0.05 = 15 的cashback 还是 300
S*t2010-12-18 08:1217 楼300 CAP是消费额。DISCOVER很恶心的。【在 h*****9 的大作中提到】: 比方说July - September Gas, Hotel & Theater 中的 300 cap: 这 300 指是的最多能拿回 300×0.05 = 15 的cashback 还是 300
c*d2010-12-18 08:1218 楼现在还可以吗?前几天试了一下,好像不可以。软件说运营商不支持,感觉已经被sprint封掉了啊【在 c********s 的大作中提到】: 不需要额外的软件。手机本身带的光盘上的Blackberry Desktop Software就可以。记: 住升级到最新版本。
s*s2010-12-18 08:1219 楼如果不是很sensitive的assay,试着用0.1%的triton一类homogenize以后过0.2um的filter【在 p****z 的大作中提到】: 最近直接用1*SDS sample buffer溶解细胞,煮10分钟,13K rpm离心后,在液体表面老: 是会有一层白色的不溶物,试过用超声破碎,没效果,打散之后,重新离心还是那样。: 换过SDS sample buffer也还是会这样。试图吸出来,一弄就散,然后和溶液混在一起: 。细胞在加裂解液之前都有用 PBS洗过。如果样品就这样加进去,会导致vertical: streaking,有时候50kD 以下的lane会连在一起。有人知道这是什么状况吗?或者有可: 能是哪些问题?谢谢赐教!
p*z2010-12-18 08:1222 楼我也就是这几次出现这种情况,也试过只吸下层,还是不行。比如说取100ul,吸到50ul左右的时候,就会发现白色的不容物也开始一起被吸进去。这东西很奇怪,很容易和样品混在一起。【在 c******m 的大作中提到】: 没用过这种细胞啊。你试试不吸表层的白色不溶物,而是小心地把下层lysate吸出来。
l*l2010-12-18 08:1223 楼多用ShopDiscover,那个没有cap【在 h*****9 的大作中提到】: 比方说July - September Gas, Hotel & Theater 中的 300 cap: 这 300 指是的最多能拿回 300×0.05 = 15 的cashback 还是 300
c*s2010-12-18 08:1224 楼哦,我还真不知道,我用过T-Mobile 和 AT&T的都没问题。不过最近一次用这个功能也是半年前了。。【在 S****M 的大作中提到】: 那个是要运营商支持的
p*z2010-12-18 08:1225 楼主要是用来做western,过滤会不会导致某些蛋白的减少?【在 s******s 的大作中提到】: 如果不是很sensitive的assay,试着用0.1%的triton一类: homogenize以后过0.2um的filter
m*x2010-12-18 08:1227 楼这功能很好呀。可以省data plan【在 c********s 的大作中提到】: 哦,我还真不知道,我用过T-Mobile 和 AT&T的都没问题。不过最近一次用这个功能也: 是半年前了。。
W*72010-12-18 08:1228 楼估计是礼品lipid一类的东西,我做脂肪细胞的时候遇到这种情况太多了,只能多离心几次,分几次取出来不能怕麻烦。过滤器也是个好办法,不过你样品很少的话过滤器就不行了,基本上都损失掉了!过滤器后的样品我做过100-200kD的蛋白大体上都没有什么问题。
s*n2010-12-18 08:1229 楼Discover那破卡本来就不值得申请, 说5%挺好听, cap低的简直可笑.找一张2% everything的卡, 多省心啊.【在 h*****9 的大作中提到】: 太恶心了: 以后不用它了
j*a2010-12-18 08:1232 楼我猜也是核酸。我也有这样的一层白色,不过不是在上层,离心后在下层(最大速度几秒钟)。上样的时候我一般避免吸这层白膜,我觉得是要么是核酸要么是debris。总之都不是我要的收集的蛋白。【在 h*******0 的大作中提到】: 应该是核酸,多加点buffer稀释,理想脑后去上清就行了
H*e2010-12-18 08:1233 楼最多15.。。我花了400多在hotel,theme park和gas,最后也就15.。。【在 h*****9 的大作中提到】: 比方说July - September Gas, Hotel & Theater 中的 300 cap: 这 300 指是的最多能拿回 300×0.05 = 15 的cashback 还是 300
p*z2010-12-18 08:1234 楼我的是高速离心后在上面,貌试离不下来。如果是核酸的话,为什么超声没有用?【在 j*****a 的大作中提到】: 我猜也是核酸。我也有这样的一层白色,不过不是在上层,离心后在下层(最大速度几: 秒钟)。上样的: 时候我一般避免吸这层白膜,我觉得是要么是核酸要么是debris。总之都不是我要的收: 集的蛋白。
z*a2010-12-18 08:1236 楼i would trysonicate in 2 x sample buffer and vortex every 2min intervals duringboiling【在 p****z 的大作中提到】: 最近直接用1*SDS sample buffer溶解细胞,煮10分钟,13K rpm离心后,在液体表面老: 是会有一层白色的不溶物,试过用超声破碎,没效果,打散之后,重新离心还是那样。: 换过SDS sample buffer也还是会这样。试图吸出来,一弄就散,然后和溶液混在一起: 。细胞在加裂解液之前都有用 PBS洗过。如果样品就这样加进去,会导致vertical: streaking,有时候50kD 以下的lane会连在一起。有人知道这是什么状况吗?或者有可: 能是哪些问题?谢谢赐教!
g*g2010-12-18 08:1238 楼都有cap还没见过2% w/o cap的卡【在 s*****n 的大作中提到】: Discover那破卡本来就不值得申请, 说5%挺好听, cap低的简直可笑.: 找一张2% everything的卡, 多省心啊.
p*u2010-12-18 08:1242 楼这板上至少推荐了两个2% everything without gap的信用卡【在 g******g 的大作中提到】: 都有cap: 还没见过2% w/o cap的卡
c*z2010-12-18 08:1243 楼嗯,我一下子花了1千多,最后也$15 :-(; Discover这一招有点儿不厚道,呵呵【在 H****e 的大作中提到】: 最多15.。。我花了400多在hotel,theme park和gas,最后也就15.。。
z*32010-12-18 08:1245 楼话说如果买300块的GC,在grocery 或者drug store买的话,算是符合这个5%么?【在 p*********w 的大作中提到】: 呵呵,多谢了
y*d2010-12-18 08:1246 楼nod 很少用了【在 s*****n 的大作中提到】: Discover那破卡本来就不值得申请, 说5%挺好听, cap低的简直可笑.: 找一张2% everything的卡, 多省心啊.