g*9
2 楼
标题要长！闲的无聊，在美国开个专门美元换人民币的公司要啥政府手续？
美国还允许这种公司存在？
比如美国收客户美元，国内给客户人民币
国内收客户人民币，美国给客户美元
美国还允许这种公司存在？
比如美国收客户美元，国内给客户人民币
国内收客户人民币，美国给客户美元
w*L
3 楼
申请签证的时候说要三个月的，但是如果入关时给六个月，还是想让妈妈住六个月的。
订机票是订三个月还是六个月好呢？我看版上给海关的信是写停留时间的。我应该写三
个月还是六个月？如果写六个月，那160表是不是就成撒谎了？
谢谢！
订机票是订三个月还是六个月好呢？我看版上给海关的信是写停留时间的。我应该写三
个月还是六个月？如果写六个月，那160表是不是就成撒谎了？
谢谢！
j*n
4 楼
弗朗茨·约瑟夫·海顿(1732年3月31日-1809年5月31日，奥地利音乐家、作曲家）
j*l
5 楼
却不知道叫什么名字,请教一下懂行的.不知道homedepot能不能买到?
a*a
6 楼
s*y
7 楼
上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
internal control 都不降解！
这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
谢谢了！
结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
internal control 都不降解！
这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
谢谢了！
y*u
8 楼
就定6个月，没事。我一般在申请表上写呆2个月，入关的时候他们都给6个月。
【在 w****L 的大作中提到】
: 申请签证的时候说要三个月的，但是如果入关时给六个月，还是想让妈妈住六个月的。
: 订机票是订三个月还是六个月好呢？我看版上给海关的信是写停留时间的。我应该写三
: 个月还是六个月？如果写六个月，那160表是不是就成撒谎了？
: 谢谢！
【在 w****L 的大作中提到】
: 申请签证的时候说要三个月的，但是如果入关时给六个月，还是想让妈妈住六个月的。
: 订机票是订三个月还是六个月好呢？我看版上给海关的信是写停留时间的。我应该写三
: 个月还是六个月？如果写六个月，那160表是不是就成撒谎了？
: 谢谢！
M*t
9 楼
Silver Queen, homedepot里不要太多。lowes里不要太多。二妈店里不要太多。就是随
便走进一个grocery store都不要太多好不好？
【在 j***l 的大作中提到】
: 却不知道叫什么名字,请教一下懂行的.不知道homedepot能不能买到?
便走进一个grocery store都不要太多好不好？
【在 j***l 的大作中提到】
: 却不知道叫什么名字,请教一下懂行的.不知道homedepot能不能买到?
c*x
10 楼
没去过。不过大站更放心一些。
n*k
11 楼
Gosh! Comfort...even the routine chemical would have problems? that's
totally unacceptable, have you complained?
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
totally unacceptable, have you complained?
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
w*L
12 楼
谢谢！ 那给海关的信写六个月，还是不写时间，还是写三个月？
g*e
13 楼
佩服。既懂电影又懂植物，还要懂英译中的电影名。
【在 M*****t 的大作中提到】
: Silver Queen, homedepot里不要太多。lowes里不要太多。二妈店里不要太多。就是随
: 便走进一个grocery store都不要太多好不好？
【在 M*****t 的大作中提到】
: Silver Queen, homedepot里不要太多。lowes里不要太多。二妈店里不要太多。就是随
: 便走进一个grocery store都不要太多好不好？
t*y
14 楼
我觉得好像他们的液体cycloheximide也有问题。你那个批号是多少？去年买他们的
Tunicamycin也有问题。
Tunicamycin也有问题。
c*f
15 楼
给海关的信写六个月。
M*t
16 楼
。。。。。。。。。。
那部片子太有名了。。。那个植物在里面相当于一个演员了吧？成天带着走。
还有，这个植物真的太常见了，只要是个店里，就有卖的。我家里一盆，办公室里一盆
。。。
是随
【在 g***e 的大作中提到】
: 佩服。既懂电影又懂植物，还要懂英译中的电影名。
那部片子太有名了。。。那个植物在里面相当于一个演员了吧？成天带着走。
还有，这个植物真的太常见了，只要是个店里，就有卖的。我家里一盆，办公室里一盆
。。。
是随
【在 g***e 的大作中提到】
: 佩服。既懂电影又懂植物，还要懂英译中的电影名。
s*y
17 楼
还没有，但是我有点懒的去理他们了。去年我和他们抱怨那个MG132的时候，
他们顶了我一句说：他们的产品说明里从来都没有把那个标为纯合物，所以不能
退钱也不能换货。我当时真的是被他们噎住了，因为从法理上来说，他们的那个
说法没有任何问题。
所以这次我去抱怨，估计也是同样下场。所以我真的懒得去花这个时间找气受。
干脆找另外一个可靠的公司去订产品算了。
真的很让我心寒，我以前用他们的产品用了将近十年了，没有料到这两年他们的质量
管理和客户服务如此的江河日下。就像你说的那样，连那么一个普通的化学物都
能搞错，真的让人失去信心
【在 n********k 的大作中提到】
: Gosh! Comfort...even the routine chemical would have problems? that's
: totally unacceptable, have you complained?
他们顶了我一句说：他们的产品说明里从来都没有把那个标为纯合物，所以不能
退钱也不能换货。我当时真的是被他们噎住了，因为从法理上来说，他们的那个
说法没有任何问题。
所以这次我去抱怨，估计也是同样下场。所以我真的懒得去花这个时间找气受。
干脆找另外一个可靠的公司去订产品算了。
真的很让我心寒，我以前用他们的产品用了将近十年了，没有料到这两年他们的质量
管理和客户服务如此的江河日下。就像你说的那样，连那么一个普通的化学物都
能搞错，真的让人失去信心
【在 n********k 的大作中提到】
: Gosh! Comfort...even the routine chemical would have problems? that's
: totally unacceptable, have you complained?
g*e
18 楼
我知道的中文名是这个杀手不太冷。从没留心过那个植物的长相，光关注natalie
portman了。
【在 M*****t 的大作中提到】
: 。。。。。。。。。。
: 那部片子太有名了。。。那个植物在里面相当于一个演员了吧？成天带着走。
: 还有，这个植物真的太常见了，只要是个店里，就有卖的。我家里一盆，办公室里一盆
: 。。。
:
: 是随
portman了。
【在 M*****t 的大作中提到】
: 。。。。。。。。。。
: 那部片子太有名了。。。那个植物在里面相当于一个演员了吧？成天带着走。
: 还有，这个植物真的太常见了，只要是个店里，就有卖的。我家里一盆，办公室里一盆
: 。。。
:
: 是随
s*y
19 楼
嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
有点
不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
现在是轮到我也快疯了。
【在 t******y 的大作中提到】
: 我觉得好像他们的液体cycloheximide也有问题。你那个批号是多少？去年买他们的
: Tunicamycin也有问题。
目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
有点
不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
现在是轮到我也快疯了。
【在 t******y 的大作中提到】
: 我觉得好像他们的液体cycloheximide也有问题。你那个批号是多少？去年买他们的
: Tunicamycin也有问题。
M*t
20 楼
我想起来一个经典笑话，是真事儿，一个小女孩楚楚可怜地跟一个大男孩儿说，哥哥，
放过我嘛，我还小。
一盆
【在 g***e 的大作中提到】
: 我知道的中文名是这个杀手不太冷。从没留心过那个植物的长相，光关注natalie
: portman了。
放过我嘛，我还小。
一盆
【在 g***e 的大作中提到】
: 我知道的中文名是这个杀手不太冷。从没留心过那个植物的长相，光关注natalie
: portman了。
b*k
21 楼
同情一把。
【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
: 目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
: 24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
: 然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
: 有点
: 不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
: 现在是轮到我也快疯了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
: 目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
: 24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
: 然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
: 有点
: 不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
: 现在是轮到我也快疯了。
i*t
22 楼
faint!
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我想起来一个经典笑话，是真事儿，一个小女孩楚楚可怜地跟一个大男孩儿说，哥哥，
: 放过我嘛，我还小。
:
: 一盆
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我想起来一个经典笑话，是真事儿，一个小女孩楚楚可怜地跟一个大男孩儿说，哥哥，
: 放过我嘛，我还小。
:
: 一盆
n*k
23 楼
be an expert and Ask to talk with a manager and be an asshole:)) when
necessary...tell them how much time/damage their crappy stuff has caused ...
with this kind of stuff, I do agree one has to play strong (still reasonable
though) in order to win...
【在 s******y 的大作中提到】
: 还没有，但是我有点懒的去理他们了。去年我和他们抱怨那个MG132的时候，
: 他们顶了我一句说：他们的产品说明里从来都没有把那个标为纯合物，所以不能
: 退钱也不能换货。我当时真的是被他们噎住了，因为从法理上来说，他们的那个
: 说法没有任何问题。
: 所以这次我去抱怨，估计也是同样下场。所以我真的懒得去花这个时间找气受。
: 干脆找另外一个可靠的公司去订产品算了。
: 真的很让我心寒，我以前用他们的产品用了将近十年了，没有料到这两年他们的质量
: 管理和客户服务如此的江河日下。就像你说的那样，连那么一个普通的化学物都
: 能搞错，真的让人失去信心
necessary...tell them how much time/damage their crappy stuff has caused ...
with this kind of stuff, I do agree one has to play strong (still reasonable
though) in order to win...
【在 s******y 的大作中提到】
: 还没有，但是我有点懒的去理他们了。去年我和他们抱怨那个MG132的时候，
: 他们顶了我一句说：他们的产品说明里从来都没有把那个标为纯合物，所以不能
: 退钱也不能换货。我当时真的是被他们噎住了，因为从法理上来说，他们的那个
: 说法没有任何问题。
: 所以这次我去抱怨，估计也是同样下场。所以我真的懒得去花这个时间找气受。
: 干脆找另外一个可靠的公司去订产品算了。
: 真的很让我心寒，我以前用他们的产品用了将近十年了，没有料到这两年他们的质量
: 管理和客户服务如此的江河日下。就像你说的那样，连那么一个普通的化学物都
: 能搞错，真的让人失去信心
i*e
24 楼
咳咳， 是发生在土豆身上的亲身经历
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我想起来一个经典笑话，是真事儿，一个小女孩楚楚可怜地跟一个大男孩儿说，哥哥，
: 放过我嘛，我还小。
:
: 一盆
【在 M*****t 的大作中提到】
: 我想起来一个经典笑话，是真事儿，一个小女孩楚楚可怜地跟一个大男孩儿说，哥哥，
: 放过我嘛，我还小。
:
: 一盆
s*y
25 楼
懒得去理他们了。这个粉末本来就不贵。
而且他们就算给了我们一个新的replacement, 我也得重新检测才敢用。
不如直接找一个可靠的公司订算了
..
reasonable
【在 n********k 的大作中提到】
: be an expert and Ask to talk with a manager and be an asshole:)) when
: necessary...tell them how much time/damage their crappy stuff has caused ...
: with this kind of stuff, I do agree one has to play strong (still reasonable
: though) in order to win...
而且他们就算给了我们一个新的replacement, 我也得重新检测才敢用。
不如直接找一个可靠的公司订算了
..
reasonable
【在 n********k 的大作中提到】
: be an expert and Ask to talk with a manager and be an asshole:)) when
: necessary...tell them how much time/damage their crappy stuff has caused ...
: with this kind of stuff, I do agree one has to play strong (still reasonable
: though) in order to win...
c*p
26 楼
那部电影太悲了，受不了，不敢看第二次
t*p
27 楼
GFP抗体，普遍得跟二抗一样普遍的抗体，Sigma的竟然不work！
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
j*l
28 楼
这正是好电影的伟大之处~不像别的商业片为了个续集埋N多伏笔.
【在 c***p 的大作中提到】
: 那部电影太悲了，受不了，不敢看第二次
t*n
29 楼
你用的什么细胞系，我们实验室一同学用这个在HEK293里头做发现蛋白就是不降解，后
来换了CHO居然work了。。。
来换了CHO居然work了。。。
s*y
30 楼
晕，这也太奇怪了！
我们和隔壁实验室用的是HEK293T， MEF， HEla， 真的就是一点都没有用！
但是这个药品不应该挑细胞系的，而且我以前用的时候一直好好的，那三个细胞系都可以
的，就是这个新来的药品突然一下子就不能用了
【在 t********n 的大作中提到】
: 你用的什么细胞系，我们实验室一同学用这个在HEK293里头做发现蛋白就是不降解，后
: 来换了CHO居然work了。。。
我们和隔壁实验室用的是HEK293T， MEF， HEla， 真的就是一点都没有用！
但是这个药品不应该挑细胞系的，而且我以前用的时候一直好好的，那三个细胞系都可以
的，就是这个新来的药品突然一下子就不能用了
【在 t********n 的大作中提到】
: 你用的什么细胞系，我们实验室一同学用这个在HEK293里头做发现蛋白就是不降解，后
: 来换了CHO居然work了。。。
C*m
31 楼
这个要顶一下，我用过他们的PIP3，也是有问题的，试验结果没法解释。后来用了
cayman的，就没有问题。还有他们的GNP好像也不纯，做HPLC出了两个峰和标准样品对
不上。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
cayman的，就没有问题。还有他们的GNP好像也不纯，做HPLC出了两个峰和标准样品对
不上。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
O*e
32 楼
这个有点过分了。
你得找他们公司的代表好好控诉一下。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
你得找他们公司的代表好好控诉一下。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
O*e
33 楼
你用多大浓度?什么溶剂？
【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
: 目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
: 24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
: 然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
: 有点
: 不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
: 现在是轮到我也快疯了。
【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
: 目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
: 24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
: 然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
: 有点
: 不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
: 现在是轮到我也快疯了。
s*y
34 楼
50 或者 100 ug/mL， DMSO
不过这些浓度或者什么的不太可能出问题，因为我不是第一次用cycloheximide,
以前用的时候没有出过问题。就是这一批有问题。
【在 O******e 的大作中提到】
: 你用多大浓度?什么溶剂？
不过这些浓度或者什么的不太可能出问题，因为我不是第一次用cycloheximide,
以前用的时候没有出过问题。就是这一批有问题。
【在 O******e 的大作中提到】
: 你用多大浓度?什么溶剂？
c*d
35 楼
他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
【在 t****p 的大作中提到】
: GFP抗体，普遍得跟二抗一样普遍的抗体，Sigma的竟然不work！
尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
【在 t****p 的大作中提到】
: GFP抗体，普遍得跟二抗一样普遍的抗体，Sigma的竟然不work！
T*t
36 楼
我在sigma订的RNA oligo，做出来结果一塌糊涂，跑HPLC一看，好几个峰。在IDT订的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不理我。
而且这个已经是replacement了，之前订的一次，是浓度不到标识的一半，纯度马马虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
而且这个已经是replacement了，之前订的一次，是浓度不到标识的一半，纯度马马虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
s*y
37 楼
咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
还可以。
我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
简直就跟trypsin 差不多！
而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
还可以。
我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
简直就跟trypsin 差不多！
而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
y*8
38 楼
Let's dump SIGMA together.
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
C*e
39 楼
跟风抱怨一把
不过不是说实验不work
就是每次订RuBP
也不是多难合成的的东西
每次都是back order
一等就要等几个月
不过不是说实验不work
就是每次订RuBP
也不是多难合成的的东西
每次都是back order
一等就要等几个月
c*d
40 楼
是呀，我以前也用这个抗体。
谁也想不到突然就出错了，害的我还以为是质粒的问题
又重新测序，耽误了很多时间
最可恨的就是他们的客服，这是店大欺客
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
谁也想不到突然就出错了，害的我还以为是质粒的问题
又重新测序，耽误了很多时间
最可恨的就是他们的客服，这是店大欺客
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
d*t
41 楼
他家连SDS-marker都能backorder 3个月...
【在 C*******e 的大作中提到】
: 跟风抱怨一把
: 不过不是说实验不work
: 就是每次订RuBP
: 也不是多难合成的的东西
: 每次都是back order
: 一等就要等几个月
【在 C*******e 的大作中提到】
: 跟风抱怨一把
: 不过不是说实验不work
: 就是每次订RuBP
: 也不是多难合成的的东西
: 每次都是back order
: 一等就要等几个月
M*n
42 楼
以前sigma克服挺好的antibody 不work, 马上就即一个新的过来，还是不work,就退钱
了。
现在经济不好，很多公司的客服不如以前了。
了。
现在经济不好，很多公司的客服不如以前了。
b*j
43 楼
ordered one middle of this year. works ok to me. When did you order?
quiet bit more order to invitrogen, got backordered couple of times.
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
quiet bit more order to invitrogen, got backordered couple of times.
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
d*e
44 楼
原来是这样，我最近用他们的M2 beads也出现了好多问题，protein根本就不bind
beads,全在flow through里面。 怪不得啊，有什么替代公司可用吗
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
beads,全在flow through里面。 怪不得啊，有什么替代公司可用吗
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
n*k
45 楼
The Flag antibody was best before Sigma bought the other company out(Kodac
or whatever about 6-8ys ago), it was super, a single band with no background
at all, whatever one would use...after Sigma's buyout, it become craps--it
must have more than one hundred band:)). They sent replacements after
replacements, M2, M5 etc and we tested for a y, and then give it all up and
decided to switch to other tag...We never solved the problem until I came to
this new lab and a colleague told me you would have to dilute to 1:8000 or
even more, then the background goes away...but the signal is not nearly as
strong either...I really hate buyouts, it just messes thing up...Signal
transduction lab was a super Ab company, I never had a single Ab from them
not working well if they stated it would work for the purpose; Phaminggen
was ok too...but after BD bought them, everything falls apart...Big
companies are just evil but unfortunately that's the trend...see how big
Invitrogen is now...and their service is going down to the toilet...
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
or whatever about 6-8ys ago), it was super, a single band with no background
at all, whatever one would use...after Sigma's buyout, it become craps--it
must have more than one hundred band:)). They sent replacements after
replacements, M2, M5 etc and we tested for a y, and then give it all up and
decided to switch to other tag...We never solved the problem until I came to
this new lab and a colleague told me you would have to dilute to 1:8000 or
even more, then the background goes away...but the signal is not nearly as
strong either...I really hate buyouts, it just messes thing up...Signal
transduction lab was a super Ab company, I never had a single Ab from them
not working well if they stated it would work for the purpose; Phaminggen
was ok too...but after BD bought them, everything falls apart...Big
companies are just evil but unfortunately that's the trend...see how big
Invitrogen is now...and their service is going down to the toilet...
【在 s******y 的大作中提到】
: 咦！你们也有这个经历啊？我三年前用的那个anti-FLAG(M2)很好使。
: 但是今年中间用了隔壁实验室新订的同样的抗体，就是怎么都没有特异信号，
: 后来只好悻悻的把三年前在－２０存起来的使用过的回收液拿来用，幸好
: 还可以。
: 我怀疑sigma 是不是他们的冷库出了问题？那么多不同的产品都纷纷的在今年
: 出问题？我们实验室另外一个人用他们的特异性水解酶，以前都很好用的，
: 最近订的一批突然就不特异了，放什么东西都噼里啪啦的全部切成了小肽，
: 简直就跟trypsin 差不多！
: 而且Sigma很讨厌的一点是他们从来都不会认错，打电话给他们抱怨的时候
: 态度傲慢得一塌糊涂，退款换货是没有的。
s*y
46 楼
那个抗体是隔壁实验室订的，我们只是顺他们的用而已。他们应该是二月份左右订
的吧？然后我在四月份用的，怎么用怎么不对劲。然后把几年前的老的，已经稀释
过的存货拿出来用就好好的。
【在 b**j 的大作中提到】
: ordered one middle of this year. works ok to me. When did you order?
: quiet bit more order to invitrogen, got backordered couple of times.
的吧？然后我在四月份用的，怎么用怎么不对劲。然后把几年前的老的，已经稀释
过的存货拿出来用就好好的。
【在 b**j 的大作中提到】
: ordered one middle of this year. works ok to me. When did you order?
: quiet bit more order to invitrogen, got backordered couple of times.
y*8
47 楼
We can wait until the patent get expired.
Both FLAG peptide and M2 clone are not hard to get.
background
it
and
to
or
【在 n********k 的大作中提到】
: The Flag antibody was best before Sigma bought the other company out(Kodac
: or whatever about 6-8ys ago), it was super, a single band with no background
: at all, whatever one would use...after Sigma's buyout, it become craps--it
: must have more than one hundred band:)). They sent replacements after
: replacements, M2, M5 etc and we tested for a y, and then give it all up and
: decided to switch to other tag...We never solved the problem until I came to
: this new lab and a colleague told me you would have to dilute to 1:8000 or
: even more, then the background goes away...but the signal is not nearly as
: strong either...I really hate buyouts, it just messes thing up...Signal
: transduction lab was a super Ab company, I never had a single Ab from them
Both FLAG peptide and M2 clone are not hard to get.
background
it
and
to
or
【在 n********k 的大作中提到】
: The Flag antibody was best before Sigma bought the other company out(Kodac
: or whatever about 6-8ys ago), it was super, a single band with no background
: at all, whatever one would use...after Sigma's buyout, it become craps--it
: must have more than one hundred band:)). They sent replacements after
: replacements, M2, M5 etc and we tested for a y, and then give it all up and
: decided to switch to other tag...We never solved the problem until I came to
: this new lab and a colleague told me you would have to dilute to 1:8000 or
: even more, then the background goes away...but the signal is not nearly as
: strong either...I really hate buyouts, it just messes thing up...Signal
: transduction lab was a super Ab company, I never had a single Ab from them
O*e
48 楼
这个东西对纯度要求应该不高啊。
不会他们给你装错了东西吧。
【在 s******y 的大作中提到】
: 50 或者 100 ug/mL， DMSO
: 不过这些浓度或者什么的不太可能出问题，因为我不是第一次用cycloheximide,
: 以前用的时候没有出过问题。就是这一批有问题。
不会他们给你装错了东西吧。
【在 s******y 的大作中提到】
: 50 或者 100 ug/mL， DMSO
: 不过这些浓度或者什么的不太可能出问题，因为我不是第一次用cycloheximide,
: 以前用的时候没有出过问题。就是这一批有问题。
O*e
49 楼
我们也在用他们的siRNA，你这么一说把我吓到了。
你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
理我。
虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
【在 T**********t 的大作中提到】
: 我在sigma订的RNA oligo，做出来结果一塌糊涂，跑HPLC一看，好几个峰。在IDT订的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不理我。
: 而且这个已经是replacement了，之前订的一次，是浓度不到标识的一半，纯度马马虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
理我。
虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
【在 T**********t 的大作中提到】
: 我在sigma订的RNA oligo，做出来结果一塌糊涂，跑HPLC一看，好几个峰。在IDT订的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不理我。
: 而且这个已经是replacement了，之前订的一次，是浓度不到标识的一半，纯度马马虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
s*y
50 楼
IDT很不错，送货及时，质量也好
Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
【在 O******e 的大作中提到】
: 我们也在用他们的siRNA，你这么一说把我吓到了。
: 你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
:
: 的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
: 理我。
: 虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
【在 O******e 的大作中提到】
: 我们也在用他们的siRNA，你这么一说把我吓到了。
: 你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
:
: 的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
: 理我。
: 虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
s*2
51 楼
不过我觉得sigma公司服务还好呀。订引物特别快~
我就是来找拍的~
我就是来找拍的~
W*C
52 楼
我用他们的这个试剂是两年前啦, 你怎么知道它不ｗｏｒｋ呢？ 我当时是用不同浓度
的ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ处理细胞，Ｈ３－Ａ.Ａ.标记蛋白，测有效浓度的。
最后用的是５ug/ml(抑制>９５％的蛋白合成）.
我现在正在用他们m2 flag的抗体。。。。。。。。。吓得我去问同事， 她说她用过
，是好的
的ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ处理细胞，Ｈ３－Ａ.Ａ.标记蛋白，测有效浓度的。
最后用的是５ug/ml(抑制>９５％的蛋白合成）.
我现在正在用他们m2 flag的抗体。。。。。。。。。吓得我去问同事， 她说她用过
，是好的
s*y
53 楼
因为我用了很高的浓度 (50-100ug/mL)， 不光我自己想看的蛋白不降解，
连几个常见的内参比蛋白cyclin D, IKBa都不降解。两年前我也用过同样的
浓度和同样的产品，那个时候就好好的没有什么异常。隔壁实验室的产品和
我们订的是一批，他们也有类似问题。
那个anti-FLAG (M2) 早几年的批次非常好，但是今年我们碰到一个不好的。
【在 W****C 的大作中提到】
: 我用他们的这个试剂是两年前啦, 你怎么知道它不ｗｏｒｋ呢？ 我当时是用不同浓度
: 的ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ处理细胞，Ｈ３－Ａ.Ａ.标记蛋白，测有效浓度的。
: 最后用的是５ug/ml(抑制>９５％的蛋白合成）.
: 我现在正在用他们m2 flag的抗体。。。。。。。。。吓得我去问同事， 她说她用过
: ，是好的
连几个常见的内参比蛋白cyclin D, IKBa都不降解。两年前我也用过同样的
浓度和同样的产品，那个时候就好好的没有什么异常。隔壁实验室的产品和
我们订的是一批，他们也有类似问题。
那个anti-FLAG (M2) 早几年的批次非常好，但是今年我们碰到一个不好的。
【在 W****C 的大作中提到】
: 我用他们的这个试剂是两年前啦, 你怎么知道它不ｗｏｒｋ呢？ 我当时是用不同浓度
: 的ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ处理细胞，Ｈ３－Ａ.Ａ.标记蛋白，测有效浓度的。
: 最后用的是５ug/ml(抑制>９５％的蛋白合成）.
: 我现在正在用他们m2 flag的抗体。。。。。。。。。吓得我去问同事， 她说她用过
: ，是好的
W*C
54 楼
会不会你加太多了， 连降解的酶都失活了。 比如你不加ｃｙｃｌｏ，如果细胞彻底
死了（比如ｌｙｓａｔｅ里的这些蛋白）会降解嘛？
你要说他的试剂不好， 你得证明有新的蛋白合成啊。
可如果重新定个试剂就能ｗｏｒｋ的话没必要做这些ｔｒｏｕｂｌｅ ｓｈｏｏｔｉｎ
ｇ， 这个试剂很便宜， 而且保存时间久， 周围实验室应该就可以借到
【在 s******y 的大作中提到】
: 嗯！他们的液态的那个好像也有问题！隔壁实验室一个小女生用他们的液态的，
: 目标蛋白根本不降解（文献里说是1个小时半衰期），后来用我们的粉末，
: 24小时了才降解了一半，重复了两个月了都是这个结果，她都要疯掉了。
: 然后我这两个星期一直用这个粉末，一直觉得结果很蹊跷，觉得我做的那个蛋白稳定得
: 有点
: 不对头。后来用cylin D, IKBa, IKBb, 作了内对照，发现9个小时内根本不降解！
: 现在是轮到我也快疯了。
W*C
55 楼
圣诞了， 你不出去玩嘛？
T*t
56 楼
我在东北部。
我们一直是在IDT定oligo的，就是前段时间在这里看到你们讨论sigma的oligo service
说是又便宜又好才决定试一下他们，没想到直接杯具了。
【在 O******e 的大作中提到】
: 我们也在用他们的siRNA，你这么一说把我吓到了。
: 你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
:
: 的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
: 理我。
: 虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
我们一直是在IDT定oligo的，就是前段时间在这里看到你们讨论sigma的oligo service
说是又便宜又好才决定试一下他们，没想到直接杯具了。
【在 O******e 的大作中提到】
: 我们也在用他们的siRNA，你这么一说把我吓到了。
: 你在那嘎啊？我寻思着是不是该换地方买这些东西了。
:
: 的同样规格同样序列的样品，HPLC出来就是一个单峰。跟Sigma交涉要求退款，理都不
: 理我。
: 虎虎，有杂峰但是不多。这次的这个HPLC Chromatogram干脆就是群山起伏了。。。
s*y
57 楼
这个不会，因为我们处理的时间很短。而且这个条件我们两年前做过几百次，
在６个小时之内肯定没有问题。细胞肯定是活着的，显微镜下一看就知道了。
而且很搞笑的一点是我们转进去的蛋白不但没有减少，反而是越来越多，
证明细胞在不停的合成那个蛋白，所以细胞肯定是没有死，而且精神得很。
所以我上来问，其实本来就是想问其他公司的类似产品有没有人用过，
因为就像你说的那样，这个东西本来就不贵，没有必要为此大动干戈去
trouble shooting. 我们附近几个实验室都是从Sigma 订的。
【在 W****C 的大作中提到】
: 圣诞了， 你不出去玩嘛？
在６个小时之内肯定没有问题。细胞肯定是活着的，显微镜下一看就知道了。
而且很搞笑的一点是我们转进去的蛋白不但没有减少，反而是越来越多，
证明细胞在不停的合成那个蛋白，所以细胞肯定是没有死，而且精神得很。
所以我上来问，其实本来就是想问其他公司的类似产品有没有人用过，
因为就像你说的那样，这个东西本来就不贵，没有必要为此大动干戈去
trouble shooting. 我们附近几个实验室都是从Sigma 订的。
【在 W****C 的大作中提到】
: 圣诞了， 你不出去玩嘛？
T*t
58 楼
Sigma的股票估计要跌了。
W*C
59 楼
股票的大买家都不懂中文吧：）
【在 T**********t 的大作中提到】
: Sigma的股票估计要跌了。
T*t
60 楼
大部分实验室都有老中吧，这帖子一出，Sigma的销售额明显要下降啊。股票的大买家
们都懂阿拉伯数字的。：）
【在 W****C 的大作中提到】
:
: 股票的大买家都不懂中文吧：）
们都懂阿拉伯数字的。：）
【在 W****C 的大作中提到】
:
: 股票的大买家都不懂中文吧：）
O*e
61 楼
我１０月份刚买的一大管，用着倒还行，WB and IP都没什么异常。
【在 s******y 的大作中提到】
: 那个抗体是隔壁实验室订的，我们只是顺他们的用而已。他们应该是二月份左右订
: 的吧？然后我在四月份用的，怎么用怎么不对劲。然后把几年前的老的，已经稀释
: 过的存货拿出来用就好好的。
【在 s******y 的大作中提到】
: 那个抗体是隔壁实验室订的，我们只是顺他们的用而已。他们应该是二月份左右订
: 的吧？然后我在四月份用的，怎么用怎么不对劲。然后把几年前的老的，已经稀释
: 过的存货拿出来用就好好的。
W*C
62 楼
嗯 我们实验室同事说也没问题， 因为我正在用， 看到你这么说舒服多啦
【在 O******e 的大作中提到】
: 我１０月份刚买的一大管，用着倒还行，WB and IP都没什么异常。
C*e
63 楼
对于你说的IDT很不错我要提醒一下
大多数时候IDT很不错
又快又好
不过我说的是一般情况
我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
，结果造成少
了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
是要求HPLC
纯化的，结果不要说等了很久，拿到手量也少，等我P32标记以后跑了个胶确认一下，
居然发现有三条
带。从那次以后我做primer extension的时候都是订普通的salt free，买来自己跑个
PAGE胶切下
来纯化一下，又快又便宜。
【在 s******y 的大作中提到】
: IDT很不错，送货及时，质量也好
: Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
大多数时候IDT很不错
又快又好
不过我说的是一般情况
我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
，结果造成少
了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
是要求HPLC
纯化的，结果不要说等了很久，拿到手量也少，等我P32标记以后跑了个胶确认一下，
居然发现有三条
带。从那次以后我做primer extension的时候都是订普通的salt free，买来自己跑个
PAGE胶切下
来纯化一下，又快又便宜。
【在 s******y 的大作中提到】
: IDT很不错，送货及时，质量也好
: Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
O*e
64 楼
可他们的价格真是非常非常低，$55/10nmol，相当划算。
【在 s******y 的大作中提到】
: IDT很不错，送货及时，质量也好
: Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
【在 s******y 的大作中提到】
: IDT很不错，送货及时，质量也好
: Sigma的Oligo 质量差是公认的，自打我从研究生院开始就知道了。
s*y
65 楼
我们一般就是随便跑个PCR, 要那么大量的OLIGO没有用
Sigma的QC部门似乎有问题，产品质量不稳定
【在 O******e 的大作中提到】
: 可他们的价格真是非常非常低，$55/10nmol，相当划算。
Sigma的QC部门似乎有问题，产品质量不稳定
【在 O******e 的大作中提到】
: 可他们的价格真是非常非常低，$55/10nmol，相当划算。
s*y
66 楼
分特，我们只是说它的质量不稳定，倒不是说一直都不能用。
我三年前订的那个管真的是很好啊，又干净又强劲
【在 W****C 的大作中提到】
:
: 嗯 我们实验室同事说也没问题， 因为我正在用， 看到你这么说舒服多啦
我三年前订的那个管真的是很好啊，又干净又强劲
【在 W****C 的大作中提到】
:
: 嗯 我们实验室同事说也没问题， 因为我正在用， 看到你这么说舒服多啦
s*y
67 楼
同情一下，后来你跟他们抱怨了么？
他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
nts
【在 C*******e 的大作中提到】
: 对于你说的IDT很不错我要提醒一下
: 大多数时候IDT很不错
: 又快又好
: 不过我说的是一般情况
: 我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
: 1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
: ，结果造成少
: 了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
: 2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
: 是要求HPLC
他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
nts
【在 C*******e 的大作中提到】
: 对于你说的IDT很不错我要提醒一下
: 大多数时候IDT很不错
: 又快又好
: 不过我说的是一般情况
: 我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
: 1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
: ，结果造成少
: 了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
: 2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
: 是要求HPLC
s*n
68 楼
如果要求纯度很高的话我一般都会用PAGE纯化而不是HPLC的。
我现在一般都是IDT和Bioneer两个公司都用，量大就在IDT订，这样没有handling和
shipping，如果量小的话(1-5 primers)就在Bioneer，没有费用，两者质量差不多，
bioneer还会附上MS的图。还有就是让Bioneer将引物配好，费用很便宜，$0.4/tube。
Bioneer的缺点是合成的量有点少，不过一般的引物也就用几次，所以也无所谓了。
nts
【在 C*******e 的大作中提到】
: 对于你说的IDT很不错我要提醒一下
: 大多数时候IDT很不错
: 又快又好
: 不过我说的是一般情况
: 我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
: 1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
: ，结果造成少
: 了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
: 2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
: 是要求HPLC
我现在一般都是IDT和Bioneer两个公司都用，量大就在IDT订，这样没有handling和
shipping，如果量小的话(1-5 primers)就在Bioneer，没有费用，两者质量差不多，
bioneer还会附上MS的图。还有就是让Bioneer将引物配好，费用很便宜，$0.4/tube。
Bioneer的缺点是合成的量有点少，不过一般的引物也就用几次，所以也无所谓了。
nts
【在 C*******e 的大作中提到】
: 对于你说的IDT很不错我要提醒一下
: 大多数时候IDT很不错
: 又快又好
: 不过我说的是一般情况
: 我自己就遇到过两次从IDT订引物然后很失败的
: 1.就是上次在版上问的PCR然后TOPO克隆出来以后发现引物5'端位置比设计少了几个nts
: ，结果造成少
: 了一个限制性酶切位点；我重新定引物，就好了；
: 2.是以前做primer extension的时候，因为这个对纯度要求比较高，要统一长度，订的
: 是要求HPLC
D*a
69 楼
我前一阵也用过，抗体做WB很好，但IP不下来。是我技术差还是抗体真的是质量差呢？
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
NND
【在 c********d 的大作中提到】
: 他们的anti-FLAG(M2)抗体通常很好,最近买了一只，怎么都不work,
: 尝试了好几个FLAG Tag 的蛋白.没想到这也会出错，当时做了将近２０个 CO－IP，NND
: ，INPUT什么都没有， 用了实验室以前买的那只test的很好。就这样，打电话过去都不
: 给换，虽然SATA CRUZ 的抗体不是很好，但人家的服务要好多了
O*e
70 楼
DNA oligo我们一直用他们的，没啥问题。
service
【在 T**********t 的大作中提到】
: 我在东北部。
: 我们一直是在IDT定oligo的，就是前段时间在这里看到你们讨论sigma的oligo service
: 说是又便宜又好才决定试一下他们，没想到直接杯具了。
service
【在 T**********t 的大作中提到】
: 我在东北部。
: 我们一直是在IDT定oligo的，就是前段时间在这里看到你们讨论sigma的oligo service
: 说是又便宜又好才决定试一下他们，没想到直接杯具了。
W*C
71 楼
你的ｆｌａｇ在表达的蛋白里被遮住了？你表达的蛋白很大嘛?
【在 D***a 的大作中提到】
: 我前一阵也用过，抗体做WB很好，但IP不下来。是我技术差还是抗体真的是质量差呢？
:
: NND
C*e
72 楼
没抱怨
这种事情到时候抱怨扯皮没完没了还可能不解决问题
还不如自己解决了算了
【在 s******y 的大作中提到】
: 同情一下，后来你跟他们抱怨了么？
: 他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
:
: nts
这种事情到时候抱怨扯皮没完没了还可能不解决问题
还不如自己解决了算了
【在 s******y 的大作中提到】
: 同情一下，后来你跟他们抱怨了么？
: 他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
:
: nts
C*e
73 楼
同意
后来有人问我的话我都会建议PAGE纯化
而不用花HPLC纯化那个冤枉钱以及等待的时间
Bioneer公司记下了，回头去看看
我们这里大多数人用operon的
我一直用IDT
好像IDT在我们附近有个点
我头一天下午比较晚的时候订
也不需要same day的
第二天早晨就到我桌上了
【在 s********n 的大作中提到】
: 如果要求纯度很高的话我一般都会用PAGE纯化而不是HPLC的。
: 我现在一般都是IDT和Bioneer两个公司都用，量大就在IDT订，这样没有handling和
: shipping，如果量小的话(1-5 primers)就在Bioneer，没有费用，两者质量差不多，
: bioneer还会附上MS的图。还有就是让Bioneer将引物配好，费用很便宜，$0.4/tube。
: Bioneer的缺点是合成的量有点少，不过一般的引物也就用几次，所以也无所谓了。
:
: nts
后来有人问我的话我都会建议PAGE纯化
而不用花HPLC纯化那个冤枉钱以及等待的时间
Bioneer公司记下了，回头去看看
我们这里大多数人用operon的
我一直用IDT
好像IDT在我们附近有个点
我头一天下午比较晚的时候订
也不需要same day的
第二天早晨就到我桌上了
【在 s********n 的大作中提到】
: 如果要求纯度很高的话我一般都会用PAGE纯化而不是HPLC的。
: 我现在一般都是IDT和Bioneer两个公司都用，量大就在IDT订，这样没有handling和
: shipping，如果量小的话(1-5 primers)就在Bioneer，没有费用，两者质量差不多，
: bioneer还会附上MS的图。还有就是让Bioneer将引物配好，费用很便宜，$0.4/tube。
: Bioneer的缺点是合成的量有点少，不过一般的引物也就用几次，所以也无所谓了。
:
: nts
p*i
74 楼
i used cyclohexmide solution from Calbiochem, it worked very well
but it was like 3-5 years ago...
【在 s******y 的大作中提到】
: 同情一下，后来你跟他们抱怨了么？
: 他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
:
: nts
but it was like 3-5 years ago...
【在 s******y 的大作中提到】
: 同情一下，后来你跟他们抱怨了么？
: 他们的客服对我们挺不错的，好像是一个华人
:
: nts
s*n
75 楼
IDT在SD好像有个点，所以到我们这里很快，像你说的第二天就到了，但就是要
handling和shipping的费用比较烦，以前总是攒了一批的primer再order的。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 同意
: 后来有人问我的话我都会建议PAGE纯化
: 而不用花HPLC纯化那个冤枉钱以及等待的时间
: Bioneer公司记下了，回头去看看
: 我们这里大多数人用operon的
: 我一直用IDT
: 好像IDT在我们附近有个点
: 我头一天下午比较晚的时候订
: 也不需要same day的
: 第二天早晨就到我桌上了
handling和shipping的费用比较烦，以前总是攒了一批的primer再order的。
【在 C*******e 的大作中提到】
: 同意
: 后来有人问我的话我都会建议PAGE纯化
: 而不用花HPLC纯化那个冤枉钱以及等待的时间
: Bioneer公司记下了，回头去看看
: 我们这里大多数人用operon的
: 我一直用IDT
: 好像IDT在我们附近有个点
: 我头一天下午比较晚的时候订
: 也不需要same day的
: 第二天早晨就到我桌上了
k*o
76 楼
幸好只用他们的氯化钠和氯化钾
明天去系里宣传下sigma卓越的QC
明天去系里宣传下sigma卓越的QC
C*k
77 楼
我们实验室在他家订的oligo，怎么都不work,过了几个礼拜他家发信说机器出故障，合
成的序列有误...
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
成的序列有误...
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
D*U
78 楼
这家就是业界的walmart了
都是外包给生产，质量就那么回事。。。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
都是外包给生产，质量就那么回事。。。
【在 s******y 的大作中提到】
: 上个月在他们公司买的cycloheximide 粉末，大家用了都觉得结果不太对头。
: 结果这两个星期我亲自去用了几次，发现根本就没有效果！随便几个很简单的
: internal control 都不降解！
: 这个烂公司，真的是一天比一天烂了。以前我还觉得他们是大公司应该质量不错，
: 没想到那么多糟糕的产品，去年他们的MG132就坑了我一次，现在又弄这个。
: 我都忍无可忍了，我还要赶实验呢，这么华丽丽的来浪费我的时间！
: 版上有没有用过其他公司的，比较可靠的cycloheximide?
: 谢谢了！
m*7
79 楼
Most of the small molecule inhibitors we used are from Calbiochem, (or EMD).
So far, I have not experience problems with any of the product. You may
want to give them a try.
So far, I have not experience problems with any of the product. You may
want to give them a try.
s*y
80 楼
谢谢！
我去年在Sigma 订的MG132出问题的时候也是转向这个公司订的。
听你和另外一个同学这么一说，我打算cyclehexmide 也向他们订了。
希望这次不要再出问题了。。。我已经受不了更多的打击了。。。
).
【在 m*********7 的大作中提到】
: Most of the small molecule inhibitors we used are from Calbiochem, (or EMD).
: So far, I have not experience problems with any of the product. You may
: want to give them a try.
我去年在Sigma 订的MG132出问题的时候也是转向这个公司订的。
听你和另外一个同学这么一说，我打算cyclehexmide 也向他们订了。
希望这次不要再出问题了。。。我已经受不了更多的打击了。。。
).
【在 m*********7 的大作中提到】
: Most of the small molecule inhibitors we used are from Calbiochem, (or EMD).
: So far, I have not experience problems with any of the product. You may
: want to give them a try.
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