d*2
2 楼
小弟想向各位大虾问一下caspase 3/7 的问题：）
用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
是结果很奇怪
用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
低。。。
所以想问问到底是什么问题。。。
用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
是结果很奇怪
用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
低。。。
所以想问问到底是什么问题。。。
A*C
3 楼
最关键的电源几个口你没说啊
一般可以
【在 P*****o 的大作中提到】
: 家里一个650w的电源,显卡要两个电源口,机箱上有个小风扇,一个sata硬盘
: 这种状况还能接一个ssd吗?
一般可以
【在 P*****o 的大作中提到】
: 家里一个650w的电源,显卡要两个电源口,机箱上有个小风扇,一个sata硬盘
: 这种状况还能接一个ssd吗?
S*e
4 楼
死过头了。时间搞短点。
【在 d**********2 的大作中提到】
: 小弟想向各位大虾问一下caspase 3/7 的问题：）
: 用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
: 小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
: 是结果很奇怪
: 用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
: 低。。。
: 所以想问问到底是什么问题。。。
【在 d**********2 的大作中提到】
: 小弟想向各位大虾问一下caspase 3/7 的问题：）
: 用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
: 小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
: 是结果很奇怪
: 用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
: 低。。。
: 所以想问问到底是什么问题。。。
P*o
5 楼
忘了,得回家查查
【在 A******C 的大作中提到】
: 最关键的电源几个口你没说啊
: 一般可以
【在 A******C 的大作中提到】
: 最关键的电源几个口你没说啊
: 一般可以
d*2
6 楼
谢谢大虾～请问你指是GFP transfect的细胞死过头还是STS处理的细胞死过头了？STS
那个我是按protocol的。。。
那个我是按protocol的。。。
d*e
7 楼
一般来说肯定够了 除非你的显卡是个高功耗的
【在 P*****o 的大作中提到】
: 家里一个650w的电源,显卡要两个电源口,机箱上有个小风扇,一个sata硬盘
: 这种状况还能接一个ssd吗?
【在 P*****o 的大作中提到】
: 家里一个650w的电源,显卡要两个电源口,机箱上有个小风扇,一个sata硬盘
: 这种状况还能接一个ssd吗?
S*e
8 楼
STS处理的细胞死过头了。这个公司的kit很奇怪，细胞死得稍微多一点，实验组的信号
就会低于对照组。很多人都遇到过类似问题。可以试试降低浓度，缩短时间。或者换个
公司的kit.
STS
【在 d**********2 的大作中提到】
: 谢谢大虾～请问你指是GFP transfect的细胞死过头还是STS处理的细胞死过头了？STS
: 那个我是按protocol的。。。
就会低于对照组。很多人都遇到过类似问题。可以试试降低浓度，缩短时间。或者换个
公司的kit.
STS
【在 d**********2 的大作中提到】
: 谢谢大虾～请问你指是GFP transfect的细胞死过头还是STS处理的细胞死过头了？STS
: 那个我是按protocol的。。。
s*s
9 楼
235425 Caspase-3 Substrate II, Fluorogenic
calbiochem
另外可以做western confirm, 比较好的caspase 3 antibody用cell siganling的9662
【在 d**********2 的大作中提到】
: 小弟想向各位大虾问一下caspase 3/7 的问题：）
: 用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
: 小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
: 是结果很奇怪
: 用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
: 低。。。
: 所以想问问到底是什么问题。。。
calbiochem
另外可以做western confirm, 比较好的caspase 3 antibody用cell siganling的9662
【在 d**********2 的大作中提到】
: 小弟想向各位大虾问一下caspase 3/7 的问题：）
: 用得是promega 的 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay kit
: 小弟想 用不同GFP融合蛋白转染293T 细胞然后用这个KIT监测Caspase-3/7 的活性 但
: 是结果很奇怪
: 用Staurosporine(10uM, 5H)诱导细胞凋亡所产生的信号比GFP空载转染的细胞的信号还
: 低。。。
: 所以想问问到底是什么问题。。。
d*2
10 楼
感谢各位大虾啊！！！！深深感谢～我这就去试一下！
d*2
11 楼
daxia`~is it true that the DVED-Rhodamin 110 is more sensitive than DVED-AMC
as promega`s ad says? Thanks a million~!!!!!!
as promega`s ad says? Thanks a million~!!!!!!
s*s
12 楼
不是daxia
我推荐的是做我们lab routinely使用的
其他的没试过
western with caspase 3 or PARP is another way to confirm.
Good luck
AMC
【在 d**********2 的大作中提到】
: daxia`~is it true that the DVED-Rhodamin 110 is more sensitive than DVED-AMC
: as promega`s ad says? Thanks a million~!!!!!!
我推荐的是做我们lab routinely使用的
其他的没试过
western with caspase 3 or PARP is another way to confirm.
Good luck
AMC
【在 d**********2 的大作中提到】
: daxia`~is it true that the DVED-Rhodamin 110 is more sensitive than DVED-AMC
: as promega`s ad says? Thanks a million~!!!!!!
d*2
13 楼
i tried shortening the time of STS treatment but still didnt work...so I
wonder whether it is the cell line problem.....so what kind of cell line do
you use?springgrass Thanks alot!!
wonder whether it is the cell line problem.....so what kind of cell line do
you use?springgrass Thanks alot!!
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