o*4
2 楼
比如对干细胞的多能性？
谢谢
谢谢
DQ
3 楼
给晚上尿床的小朋友用的？
据说晚上尿床的话有尿到六七岁的呢。
【在 k*******2 的大作中提到】
: 就是这种，有男生的有女生的.
据说晚上尿床的话有尿到六七岁的呢。
【在 k*******2 的大作中提到】
: 就是这种，有男生的有女生的.
y*1
4 楼
Study literature first
k*2
5 楼
我刚开始也是这么想的,看见还有更大号的,能good for 125lb, 就比较奇怪了。
后来在Amazon读review
才知道有的孩子15岁了晚上还尿炕,这个还是有点用的。
害的我还以为我儿子错过了什么阶段。
【在 DQ 的大作中提到】
: 给晚上尿床的小朋友用的？
: 据说晚上尿床的话有尿到六七岁的呢。
后来在Amazon读review
才知道有的孩子15岁了晚上还尿炕,这个还是有点用的。
害的我还以为我儿子错过了什么阶段。
【在 DQ 的大作中提到】
: 给晚上尿床的小朋友用的？
: 据说晚上尿床的话有尿到六七岁的呢。
o*4
6 楼
很少啊
【在 y*****1 的大作中提到】
: Study literature first
【在 y*****1 的大作中提到】
: Study literature first
s*9
7 楼
还有一些有疾病的孩子，也需要用的
n*w
8 楼
knockout or knockdown the gene and what's the phenotype or functions?
o*4
9 楼
这个都有人做了，关键的问题是我发现这个很重要的蛋白A跟另外一个很重要的蛋白B能
相互作用，
而A跟B的功能很重要，都已经有研究了，但是没人发现他们能相互作用，
接下来该怎么办呢？
【在 n***w 的大作中提到】
: knockout or knockdown the gene and what's the phenotype or functions?
相互作用，
而A跟B的功能很重要，都已经有研究了，但是没人发现他们能相互作用，
接下来该怎么办呢？
【在 n***w 的大作中提到】
: knockout or knockdown the gene and what's the phenotype or functions?
s*s
10 楼
我瞎说两句。比如研究一下到底哪个domain有相互作用。比如A蛋白的S domain
和B蛋白的T domain有相互作用。然后用已知有相互作用的domain比如X和Y替代。
理想化的结果就是A(S)+B(T)正常，A(S)+B(Y)或者A(X)+B(T）不正常，但是双突变
A(X)+B(Y）能够rescue表型。不过这个估计比较看运气
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个都有人做了，关键的问题是我发现这个很重要的蛋白A跟另外一个很重要的蛋白B能
: 相互作用，
: 而A跟B的功能很重要，都已经有研究了，但是没人发现他们能相互作用，
: 接下来该怎么办呢？
和B蛋白的T domain有相互作用。然后用已知有相互作用的domain比如X和Y替代。
理想化的结果就是A(S)+B(T)正常，A(S)+B(Y)或者A(X)+B(T）不正常，但是双突变
A(X)+B(Y）能够rescue表型。不过这个估计比较看运气
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个都有人做了，关键的问题是我发现这个很重要的蛋白A跟另外一个很重要的蛋白B能
: 相互作用，
: 而A跟B的功能很重要，都已经有研究了，但是没人发现他们能相互作用，
: 接下来该怎么办呢？
o*4
11 楼
这个是mapping domain，
怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
【在 s******s 的大作中提到】
: 我瞎说两句。比如研究一下到底哪个domain有相互作用。比如A蛋白的S domain
: 和B蛋白的T domain有相互作用。然后用已知有相互作用的domain比如X和Y替代。
: 理想化的结果就是A(S)+B(T)正常，A(S)+B(Y)或者A(X)+B(T）不正常，但是双突变
: A(X)+B(Y）能够rescue表型。不过这个估计比较看运气
怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
【在 s******s 的大作中提到】
: 我瞎说两句。比如研究一下到底哪个domain有相互作用。比如A蛋白的S domain
: 和B蛋白的T domain有相互作用。然后用已知有相互作用的domain比如X和Y替代。
: 理想化的结果就是A(S)+B(T)正常，A(S)+B(Y)或者A(X)+B(T）不正常，但是双突变
: A(X)+B(Y）能够rescue表型。不过这个估计比较看运气
c*k
12 楼
knockdown, then rescue with wt, normal; rescue with binding deficient mutant
,abnormal?
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
,abnormal?
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
w*a
13 楼
先make mutation disrupt interaction，然后再dominant negative?
不怕麻烦的话，就make knock in animal啥的，
用mutant置换原始copy。
【在 o**4 的大作中提到】
: 比如对干细胞的多能性？
: 谢谢
不怕麻烦的话，就make knock in animal啥的，
用mutant置换原始copy。
【在 o**4 的大作中提到】
: 比如对干细胞的多能性？
: 谢谢
n*w
14 楼
disrupt interaction and then observe phenotype of stem cells....
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
s*s
15 楼
我不是说了么，单突变有问题，双突变换domain能够rescue表型。
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个是mapping domain，
: 怎么证明这个相互作用对于细胞很重要的？
o*4
16 楼
哦，好复杂啊
【在 s******s 的大作中提到】
: 我不是说了么，单突变有问题，双突变换domain能够rescue表型。
【在 s******s 的大作中提到】
: 我不是说了么，单突变有问题，双突变换domain能够rescue表型。
y*1
17 楼
Do you have enough money and time?
s*t
18 楼
这是你的家庭作业吗
s*t
19 楼
这是你的作业么
o*4
20 楼
但是突变基因，它如果有表型，也有可能是别的原因，不是因为破坏interaction啊？
【在 n***w 的大作中提到】
: disrupt interaction and then observe phenotype of stem cells....
【在 n***w 的大作中提到】
: disrupt interaction and then observe phenotype of stem cells....
o*4
21 楼
但是相互作用的domain有可能有别的功能啊 （十分有可能）
【在 s******s 的大作中提到】
: 我不是说了么，单突变有问题，双突变换domain能够rescue表型。
【在 s******s 的大作中提到】
: 我不是说了么，单突变有问题，双突变换domain能够rescue表型。
s*s
22 楼
能rescue mutant phenotype还不够啊? 什么都有可能，
你所有的实验都不要做了
【在 o**4 的大作中提到】
: 但是相互作用的domain有可能有别的功能啊 （十分有可能）
你所有的实验都不要做了
【在 o**4 的大作中提到】
: 但是相互作用的domain有可能有别的功能啊 （十分有可能）
i*g
23 楼
这种明的不能明的实验还要问，真是小白，真是90后
o*4
24 楼
这个基因跟别的蛋白相互作用的domain功能相当多 （本身基因功能就相当多），
所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
【在 s******s 的大作中提到】
: 能rescue mutant phenotype还不够啊? 什么都有可能，
: 你所有的实验都不要做了
所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
【在 s******s 的大作中提到】
: 能rescue mutant phenotype还不够啊? 什么都有可能，
: 你所有的实验都不要做了
o*4
25 楼
你牛逼？
【在 i*****g 的大作中提到】
: 这种明的不能明的实验还要问，真是小白，真是90后
【在 i*****g 的大作中提到】
: 这种明的不能明的实验还要问，真是小白，真是90后
y*i
26 楼
做一堆point mutation, resue, yeast 2 hybrid, 再加各种functional assay，能做
的都做上。反正就这么些手段。
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个基因跟别的蛋白相互作用的domain功能相当多 （本身基因功能就相当多），
: 所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
的都做上。反正就这么些手段。
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个基因跟别的蛋白相互作用的domain功能相当多 （本身基因功能就相当多），
: 所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
o*4
27 楼
点突变就能改变两个蛋白的相互作用是么？
【在 y***i 的大作中提到】
: 做一堆point mutation, resue, yeast 2 hybrid, 再加各种functional assay，能做
: 的都做上。反正就这么些手段。
【在 y***i 的大作中提到】
: 做一堆point mutation, resue, yeast 2 hybrid, 再加各种functional assay，能做
: 的都做上。反正就这么些手段。
e*s
28 楼
前面牛人们提到的Knockdown, rescue with WT&mutants应该是很好的方案，
功能多为什么就不能Rescue?
真要是来问建议的就别太钻牛角尖了，把前期工作做好，然后判断值不值得深入。感觉
是要花很长时间的，如果是一个重要蛋白的话，会是很好的Story。
但如果你现在对哪个功能有影响还不清楚的话，个人觉得有一定风险。Knockdown或者
别的方法能确定哪个功能收到影响了，就绝对值得深入研究。
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个基因跟别的蛋白相互作用的domain功能相当多 （本身基因功能就相当多），
: 所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
功能多为什么就不能Rescue?
真要是来问建议的就别太钻牛角尖了，把前期工作做好，然后判断值不值得深入。感觉
是要花很长时间的，如果是一个重要蛋白的话，会是很好的Story。
但如果你现在对哪个功能有影响还不清楚的话，个人觉得有一定风险。Knockdown或者
别的方法能确定哪个功能收到影响了，就绝对值得深入研究。
【在 o**4 的大作中提到】
: 这个基因跟别的蛋白相互作用的domain功能相当多 （本身基因功能就相当多），
: 所以我觉得不可能rescue mutant phenotype的啊
y*i
29 楼
重要的点突变能。当然truncated protein更容易做，点突变工作量大但说服力更大
一点。
可以从保守氨基酸中找重要氨基酸。蛋白已经有结构，或者相似的蛋白有结构，也可
以尝试从结构上猜测重要氨基酸。
【在 o**4 的大作中提到】
: 点突变就能改变两个蛋白的相互作用是么？
一点。
可以从保守氨基酸中找重要氨基酸。蛋白已经有结构，或者相似的蛋白有结构，也可
以尝试从结构上猜测重要氨基酸。
【在 o**4 的大作中提到】
: 点突变就能改变两个蛋白的相互作用是么？
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