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Help-cell fixation problem

Help-cell fixation problem# Biology - 生物学

F*w2011-03-22 07:03

1 楼

父亲今年55岁，年纪不大，不过因为身体原因最近几年一直没有工作，连退休证也没有
。想问问大家这样的情况，如果签证官问起，要怎么回答？
还有一个问题是，这两天有人预约签证吗？每次我一拨通到选择语言那里就断了。。也
有人遇到类似的问题吗？
谢谢！！

h*y2011-03-22 07:03

2 楼

看过死人经，现在正看拔魔。两部开头都有些类似，小孩子们为了各种利益互相划小圈
子刻画的入木三分。大家小时候都有过类似的经历吧？

y*62011-03-22 07:03

3 楼

HEK293 cells in 96-well plate, DMEM with 10% FBS, cultured 2d, about 100%
confluency.
Washed once with PBS before adding fixation solution (3.7% formaldehyde/PBS).
Cells detached in fixastion solution. Is it because formaldehyde does not
work with HEK293 cells? Anyone tried methenol? What's the concentration?

h*e2011-03-22 07:03

4 楼

Not sure about the answer to your first question.
But regards to making appointment, I called to make an interview a couple of
days ago. The phone system seemed fine to me. No problem.

j*u2011-03-22 07:03

5 楼

有人的地方就有江湖……

【在 h******y 的大作中提到】

: 看过死人经，现在正看拔魔。两部开头都有些类似，小孩子们为了各种利益互相划小圈
: 子刻画的入木三分。大家小时候都有过类似的经历吧？

h*y2011-03-22 07:03

6 楼

Do not wash your cells with PBS as 293 cells are easy to detach. Add
fixative after remove medium, or pre-coat your plate with poly-D/L-Lysine.

PBS).

【在 y****6 的大作中提到】

: HEK293 cells in 96-well plate, DMEM with 10% FBS, cultured 2d, about 100%
: confluency.
: Washed once with PBS before adding fixation solution (3.7% formaldehyde/PBS).
: Cells detached in fixastion solution. Is it because formaldehyde does not
: work with HEK293 cells? Anyone tried methenol? What's the concentration?

F*w2011-03-22 07:03

7 楼

谢谢楼上的回答！！
有人知道第一个问题要怎么说嘛？
谢谢了。

f*02011-03-22 07:03

8 楼

等到300多章，你会发现，还是那群孩子在说话，没有成长。

V*n2011-03-22 07:03

9 楼

ice cold acetone

h*y2011-03-22 07:03

10 楼

目前手机上只看到170多章，剩下的等全本了再看

【在 f*****0 的大作中提到】

: 等到300多章，你会发现，还是那群孩子在说话，没有成长。

y*62011-03-22 07:03

11 楼

Can anyone explain how fixation works? My understanding is that fixative
helps the crosslink of proteins and other macromolecules. I also have an
impression that it helps the cells to attach to the plate more firmly. It is
correct?

b*e2011-03-22 07:03

12 楼

拔魔我觉得挺失败的，起码我没有任何跟的欲望，虽然积攒多了有空会拿来消磨。
冰神最好的还是死人经前半部。拔魔和死人经后半部差不多，聊不起太多阅读欲望。

【在 h******y 的大作中提到】

: 目前手机上只看到170多章，剩下的等全本了再看

c*n2011-03-22 07:03

13 楼

I use 4% Paraformaldehyde to fix 293 HEK cells for 15 min.
I always put cells on cover slips coated with fibronectin or polyL lysin and
then fix them. It works fine.

PBS).

【在 y****6 的大作中提到】

x*82011-03-22 07:03

14 楼

死人经基本以报仇为主线，比较单一，
拔魔看起来像是一部构思宏大的作品，似乎要阐述魔，道，人，妖的关系之类的，有一
个故事情节之上的主题要表述，现在可能刚刚展开，

【在 b*********e 的大作中提到】

: 拔魔我觉得挺失败的，起码我没有任何跟的欲望，虽然积攒多了有空会拿来消磨。
: 冰神最好的还是死人经前半部。拔魔和死人经后半部差不多，聊不起太多阅读欲望。

h*n2011-03-22 07:03

15 楼

Fixation reagent is no use to help cells attch on a plate. I suggest coating
your
plate with poly-lysine

is

【在 y****6 的大作中提到】

: Can anyone explain how fixation works? My understanding is that fixative
: helps the crosslink of proteins and other macromolecules. I also have an
: impression that it helps the cells to attach to the plate more firmly. It is
: correct?

j*u2011-03-22 07:03

16 楼

nod

【在 x**8 的大作中提到】

: 死人经基本以报仇为主线，比较单一，
: 拔魔看起来像是一部构思宏大的作品，似乎要阐述魔，道，人，妖的关系之类的，有一
: 个故事情节之上的主题要表述，现在可能刚刚展开，