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攒人品！分享PLASMID大提经验
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攒人品！分享PLASMID大提经验# Biology - 生物学
s*y
1 楼
很多人遇到过 大提的时候 产量很低 虽然有1。87到1。93的质量控制指标，但是获得
的浓度偏低
比如 1毫升 浓度在 150ng/ul
我的经验是，可以使用 3k 或者10 k的filter, 10分钟的离心，你就可以得到 100ul的
浓度在
1000ng/ul的高浓度DNA
作为一般的真核细胞 转染 使用 足够了
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a*n
2 楼
我用midi prep kit，100ml culture可以提出来500 ul of 600ng/ul，这产量也算正常
吧
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S*e
3 楼
什么是3 k 和 10 k filter？

【在 s*********y 的大作中提到】
: 很多人遇到过 大提的时候 产量很低 虽然有1。87到1。93的质量控制指标，但是获得
: 的浓度偏低
: 比如 1毫升 浓度在 150ng/ul
: 我的经验是，可以使用 3k 或者10 k的filter, 10分钟的离心，你就可以得到 100ul的
: 浓度在
: 1000ng/ul的高浓度DNA
: 作为一般的真核细胞 转染 使用 足够了
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C*e
4 楼
说的再具体点？
用3k或10k MWCO的centricon/minicon么？
上样是什么？裂解、蛋白沉淀以后的上清？
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s*y
6 楼
是的，这个浓度和体积算是很好了

【在 a********n 的大作中提到】
: 我用midi prep kit，100ml culture可以提出来500 ul of 600ng/ul，这产量也算正常
: 吧
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s*y
7 楼
用3k或10k MWCO的centricon/minicon么
回答是 是的
上扬的是最终的 TE elutions

【在 C*******e 的大作中提到】
: 说的再具体点？
: 用3k或10k MWCO的centricon/minicon么？
: 上样是什么？裂解、蛋白沉淀以后的上清？
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