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Protein Precipitates in Phosphate Buffer

Protein Precipitates in Phosphate Buffer# Biology - 生物学

D*a2011-04-10 07:04

1 楼

You must open a Key Express Free Checking (this is the basic banking account
in NY) or Key Advantage Checking account and by 5/6/11 make one keybank
rewards debit card transaction and a combination of two direct deposits and/
or automated payments each of $100 or more to get $150.
不知道这个好不好拿？
是邮件里收到的，有个Res/Event Code, 不知道是不是应该去branch办，因为网上好像没有看到有提到这个。

m*t2011-04-10 07:04

2 楼

老婆急着要秋播，要买土。一cubic yard garden top soil要$30, 如果给送到家再
弄后院要另外收70，我决定自己搞算了，节约。
结果去拖时候，人家说另外有一种很好，要$50，好吧，$50就50，看人家翻斗车一下
就倒在我们后车箱里了，看看真是少啊，真容易。
拖回家往院子里下，才发现真TM多啊。新家还没有工具把top soil 往院子里运。房子
挤着房子，和邻居间就一米多点儿间距。看来看去想了个办法，用大垃圾箱拖吧，一锹
锹撮到垃圾桶里，然后拖到院子里，拖了两桶，NND浑身都是汗。垃圾桶肚子大，轮子
小，走草地上一歪一歪的，也不容易往外倒，太费劲了。
中午的大太阳烧人，老婆扛不住了，也不在旁边陪说话号称回家做饭去了。一会儿，对
面新邻居，一个30来岁的白男给送了个小推车来了，感动的，好人还是不少啊。有了合
适的工具，又花了大半个小时，终于搞完了，后院堆了两三个小山包，真是工欲善其事
必先利其器啊。
回家痛痛快快地洗了个澡，吃午饭。LD说，下次你还要节约这70块吗，俺一边大块吃肉
，一边头也不抬地回答：如果有下次，还是让劳模来挣这70块，干这么一次农活了，腰
都累折了，这个星期的公粮你就别指望了。

x*i2011-04-10 07:04

3 楼

Hello There,
We have a protein (pI = 8.9, 10 mg/mL, MW 100 K) precipitated in 10 mM
phosphate buffer (pH around 7) after overnight storage at 4 degree. The
precipitate will be soluble again when warming up solution to room
temperature. Addition of NaCl will prevent precipitation. Other common
buffers are OK not causing precipitate.
Hypothesis is ionic cross-linking. Phosphate ion has intense negative charge
density and working as the cross-linking agent, its multiple negative
charges interact with positive proteins to cause precipitation.
The ionic interaction between negatively charged phosphate and positively
charged protein is supposed to be weak and transient. Perhaps only a small
percentage of phosphate ions in buffer are enough to initiate precipitation.
Is there any direct way to prove the above hypothesis?
Thank you very much!

j*u2011-04-10 07:04

4 楼

没收到就不能办了么

f*g2011-04-10 07:04

5 楼

公粮还是要按时上交D！

【在 m******t 的大作中提到】

: 老婆急着要秋播，要买土。一cubic yard garden top soil要$30, 如果给送到家再
: 弄后院要另外收70，我决定自己搞算了，节约。
: 结果去拖时候，人家说另外有一种很好，要$50，好吧，$50就50，看人家翻斗车一下
: 就倒在我们后车箱里了，看看真是少啊，真容易。
: 拖回家往院子里下，才发现真TM多啊。新家还没有工具把top soil 往院子里运。房子
: 挤着房子，和邻居间就一米多点儿间距。看来看去想了个办法，用大垃圾箱拖吧，一锹
: 锹撮到垃圾桶里，然后拖到院子里，拖了两桶，NND浑身都是汗。垃圾桶肚子大，轮子
: 小，走草地上一歪一歪的，也不容易往外倒，太费劲了。
: 中午的大太阳烧人，老婆扛不住了，也不在旁边陪说话号称回家做饭去了。一会儿，对
: 面新邻居，一个30来岁的白男给送了个小推车来了，感动的，好人还是不少啊。有了合

s*e2011-04-10 07:04

6 楼

interesting question although it may not lead to Nature paper.
before u propose protein-ion interaction, I think u should make sure the
precipitation is ur protein and it is phosphate-dependent.
use HEPES as buffer and add series conc. of Pi to test dose-response. Only
difficulty is to quantify protein precipitation, but u could spin down it
and determine protein conc in supernatant.

m*t2011-04-10 07:04

7 楼

腰折啊，得休息

【在 f******g 的大作中提到】

: 公粮还是要按时上交D！