Ab purification from hybridoma cells# Biology - 生物学
r*r
1 楼
听说有一种program，很适合旧房子，每年交点钱，有问题旧会来帮你修，都不用
contractor了，类似AAA，有谁知道么
？好么？
contractor了，类似AAA，有谁知道么
？好么？
i*a
2 楼
http://www.engadget.com/2011/01/14/kfa2-nvidia-geforce-gtx-460-
graphics-card-is-first-to-go-wi/
http://www.blogcdn.com/www.engadget.com/media/2011/01/kfa2-gtx-
600.jpg
What you're looking at is the world's first wireless graphics card
affectionately dubbed the KFA2 (aka, Galaxy) GeForce GTX460 WHDI 1024MB
PCIe 2.0. The card uses five aerials to stream uncompressed 1080p video
from your PC to your WHDI enabled television (or any display courtesy of
the bundled 5GHz WHDI receiver) at a range of about 100 feet. Otherwise,
it's the same mid-range GTX 460 card we've seen universally lauded with
1024MB of onboard RAM helping to make the most of its 336 CUDA cores.
Insane, yes, but we'd accept nothing less from our beloved graphics cards
manufacturers.
graphics-card-is-first-to-go-wi/
http://www.blogcdn.com/www.engadget.com/media/2011/01/kfa2-gtx-
600.jpg
What you're looking at is the world's first wireless graphics card
affectionately dubbed the KFA2 (aka, Galaxy) GeForce GTX460 WHDI 1024MB
PCIe 2.0. The card uses five aerials to stream uncompressed 1080p video
from your PC to your WHDI enabled television (or any display courtesy of
the bundled 5GHz WHDI receiver) at a range of about 100 feet. Otherwise,
it's the same mid-range GTX 460 card we've seen universally lauded with
1024MB of onboard RAM helping to make the most of its 336 CUDA cores.
Insane, yes, but we'd accept nothing less from our beloved graphics cards
manufacturers.
f*g
3 楼
请教高手一个问题， 我从hybridoma cells 纯化抗体， 得到的抗体 跑胶， 除了重链
（55KD）和轻链 （25KD）外，还有一条 带，在轻链下面。 请问这可能是什么原因造
成的呢？
谢谢了！！！
（55KD）和轻链 （25KD）外，还有一条 带，在轻链下面。 请问这可能是什么原因造
成的呢？
谢谢了！！！
w*s
4 楼
Service America.
t*y
5 楼
old
j*8
6 楼
marker跟俺用的一样 其余的不知道：）
帮顶
帮顶
w*s
7 楼
nor worth it actually, broken appliances shouls be replaced
【在 w**s 的大作中提到】
: Service America.
【在 w**s 的大作中提到】
: Service America.
N*w
8 楼
家里一般用不上
【在 t*******y 的大作中提到】
: old
【在 t*******y 的大作中提到】
: old
V*n
9 楼
how u purified the ab, more details please
t*g
10 楼
HTPC的福音呀。
不过GTX460太夸张了，intel的集显弄一个不错。
【在 N****w 的大作中提到】
: 家里一般用不上
不过GTX460太夸张了，intel的集显弄一个不错。
【在 N****w 的大作中提到】
: 家里一般用不上
f*g
11 楼
培养hybridoma cells, 收集上清, 用gamma-bind plus beads (protein G) 纯化 抗体
,然后concentrate elute. buffer change to PBS
谢谢!
,然后concentrate elute. buffer change to PBS
谢谢!
d*0
12 楼
现在无线带宽都这么大了？
m*r
13 楼
你的空（不产抗体细胞）control是什么？
【在 f*******g 的大作中提到】
: 请教高手一个问题， 我从hybridoma cells 纯化抗体， 得到的抗体 跑胶， 除了重链
: （55KD）和轻链 （25KD）外，还有一条 带，在轻链下面。 请问这可能是什么原因造
: 成的呢？
: 谢谢了！！！
【在 f*******g 的大作中提到】
: 请教高手一个问题， 我从hybridoma cells 纯化抗体， 得到的抗体 跑胶， 除了重链
: （55KD）和轻链 （25KD）外，还有一条 带，在轻链下面。 请问这可能是什么原因造
: 成的呢？
: 谢谢了！！！
V*n
14 楼
俺用的方法。也是用Protein G的办法，Buffer 用Pierce的Binding Buffer和Elution
Buffer。得到的Elution，直接用Millipore的Spin Column清洗加浓缩，选大一些的Cut
（比如５０KD），避免小片段污染。
看你的胶，有小片段（～２０ KD），可能是蛋白降解，也可能是小片段污染。另，高
分子处还有条带（～２００KD），可检查蛋白变性是否彻底。
Buffer。得到的Elution，直接用Millipore的Spin Column清洗加浓缩，选大一些的Cut
（比如５０KD），避免小片段污染。
看你的胶，有小片段（～２０ KD），可能是蛋白降解，也可能是小片段污染。另，高
分子处还有条带（～２００KD），可检查蛋白变性是否彻底。
f*g
15 楼
没有control, 抗体纯化, 用什么做negative control呢? 我ｂｉｎｄｉｎｇ ｂｕｆ
ｆｅｒ 用的ＰＢＳ， Ｅｌｕｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ 用的是 Ａｃｅｔｉｃ Ａ
ｃｉｄ，用ＮａＯＨ中和， 然后用 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ的Ｓｐｉｎ Ｃｏｌｕｍｎ
清洗 浓缩， ｃｕｔ好像用的是３０ ＫＤ的，
浓缩的时候，很困难！ 需要半小时到一小时的样子，才能浓缩，而且有很多ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｓ， 不知道原因？
谢谢楼上的回复，小片段污染常见么？
ｆｅｒ 用的ＰＢＳ， Ｅｌｕｔｉｏｎ ｂｕｆｆｅｒ 用的是 Ａｃｅｔｉｃ Ａ
ｃｉｄ，用ＮａＯＨ中和， 然后用 Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ的Ｓｐｉｎ Ｃｏｌｕｍｎ
清洗 浓缩， ｃｕｔ好像用的是３０ ＫＤ的，
浓缩的时候，很困难！ 需要半小时到一小时的样子，才能浓缩，而且有很多ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｓ， 不知道原因？
谢谢楼上的回复，小片段污染常见么？
c*o
16 楼
血清里的牛IgG?
V*n
17 楼
呵呵，RE这个。没注意LZ的培养条件，俺一般是从ascites开始提的。
【在 c********o 的大作中提到】
: 血清里的牛IgG?
【在 c********o 的大作中提到】
: 血清里的牛IgG?
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