j*n
2 楼
12星座各自的塔罗牌：
白羊：The Emperor
金牛：The Hierophant
双子：The Lovers
巨蟹：The Chariot
狮子：Strength
处女：The Hermit
天秤：Justice
天蝎：Death
射手：Temperance
摩羯：The Devil
水瓶：The Star
双鱼：The moon
白羊：The Emperor
金牛：The Hierophant
双子：The Lovers
巨蟹：The Chariot
狮子：Strength
处女：The Hermit
天秤：Justice
天蝎：Death
射手：Temperance
摩羯：The Devil
水瓶：The Star
双鱼：The moon
e*n
3 楼
哎，都博士二年级了，还问这样的问题，真不好意思
我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
是6 ug。
今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
有DNA的。
实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
，就是做不好，哎。。。。
Sample比较珍贵，不敢再做了。。。希望大家能帮我一下啊，谢谢大家！！
我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
是6 ug。
今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
有DNA的。
实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
，就是做不好，哎。。。。
Sample比较珍贵，不敢再做了。。。希望大家能帮我一下啊，谢谢大家！！
l*t
4 楼
I do not trust those so called CPAs.
a number of years ago, while I was living in NYC, I used one CPA. the guy
did not give me the tax deductions i was entitled to get, good thing I had
done my homework, so I asked him. He kept my return and said he would
rearch on it. A couple of days later, he admitted his fault, I got $800
back.
Most CPAs in chinatown can only do the simple tax return. For a little bit
complicated, they tends to make mistakes.
I have been using TurboTax to do my own tax return. Only you understand
your own special tax situation. Donot expect those CPA can figure out your
tax in half an hour for you.
a number of years ago, while I was living in NYC, I used one CPA. the guy
did not give me the tax deductions i was entitled to get, good thing I had
done my homework, so I asked him. He kept my return and said he would
rearch on it. A couple of days later, he admitted his fault, I got $800
back.
Most CPAs in chinatown can only do the simple tax return. For a little bit
complicated, they tends to make mistakes.
I have been using TurboTax to do my own tax return. Only you understand
your own special tax situation. Donot expect those CPA can figure out your
tax in half an hour for you.
c*g
5 楼
什么意思啊？
【在 j**n 的大作中提到】
: 12星座各自的塔罗牌：
: 白羊：The Emperor
: 金牛：The Hierophant
: 双子：The Lovers
: 巨蟹：The Chariot
: 狮子：Strength
: 处女：The Hermit
: 天秤：Justice
: 天蝎：Death
: 射手：Temperance
【在 j**n 的大作中提到】
: 12星座各自的塔罗牌：
: 白羊：The Emperor
: 金牛：The Hierophant
: 双子：The Lovers
: 巨蟹：The Chariot
: 狮子：Strength
: 处女：The Hermit
: 天秤：Justice
: 天蝎：Death
: 射手：Temperance
f*p
6 楼
稀释太多了，我每次只用50ul稀释
ug。
100ul
【在 e*****n 的大作中提到】
: 哎，都博士二年级了，还问这样的问题，真不好意思
: 我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
: 说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
: 但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
: 是6 ug。
: 今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
: elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
: 有DNA的。
: 实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
: proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
ug。
100ul
【在 e*****n 的大作中提到】
: 哎，都博士二年级了，还问这样的问题，真不好意思
: 我是用qiagen blood & tissue kit 提brain tissue的DNA，~ 20 mg， handbook上面
: 说 brain tissue的话25mg 的DNA 产量 15 ~ 30 ug， 那理论上我应该得到12 ~ 24 ug。
: 但是我做了几次，最好的那次是200ul elution buffer，浓度 ~ 30 ug/ml, DNA 总量
: 是6 ug。
: 今天又做了2个sample，200 ul elution buffer，浓度只有10 ug/ml, 再用新的100ul
: elution buffer, 浓度~10 ug/ml， DNA 总量大概只有3 ug。跑了一块胶，可以确定是
: 有DNA的。
: 实在想不出来是什么原因。 我disrupt tissue的时候是用23 G的needle做的，然后加
: proteinase K消化了6个小时，液体很澄清，应该不会是消化的不好吧。很简单的实验
j*n
7 楼
天秤：Justice=公正
【在 c******g 的大作中提到】
: 什么意思啊？
【在 c******g 的大作中提到】
: 什么意思啊？
e*n
8 楼
那最后能得到DNA的总量能达到handbook上的 ~ 20 ug么？
【在 f******p 的大作中提到】
: 稀释太多了，我每次只用50ul稀释
:
: ug。
: 100ul
【在 f******p 的大作中提到】
: 稀释太多了，我每次只用50ul稀释
:
: ug。
: 100ul
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