univerally immobilize proteins to microplate# Biology - 生物学
w*i
1 楼
周润发暴瘦20公斤更潇洒 20年后重当"赌神"
http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
f*d
2 楼
蹦来是要给小孩看的，结果可能还太小看不懂，我就自己又回味了一把童年的回忆
m*M
4 楼
有谁知道什么试剂可以有效的把细胞裂解出的总蛋白固定到９６孔板（任何商业化的９
６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
r*r
5 楼
瓜瓜只要把一气奥地换乘吉安特，就能成
【在 w***i 的大作中提到】
: 周润发暴瘦20公斤更潇洒 20年后重当"赌神"
: http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
【在 w***i 的大作中提到】
: 周润发暴瘦20公斤更潇洒 20年后重当"赌神"
: http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
s*y
6 楼
小时候学校组织在电影院看的，很过瘾，几集以后全校就一起跟着唱主题曲了
p*t
7 楼
还是贵啊
desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
我等100G降到$80，250G降到$120
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
我等100G降到$80，250G降到$120
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
p*p
8 楼
看neuroscience版的回复。
【在 m****M 的大作中提到】
: 有谁知道什么试剂可以有效的把细胞裂解出的总蛋白固定到９６孔板（任何商业化的９
: ６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
: 试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
: 即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
【在 m****M 的大作中提到】
: 有谁知道什么试剂可以有效的把细胞裂解出的总蛋白固定到９６孔板（任何商业化的９
: ６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
: 试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
: 即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
b*a
9 楼
我这半年少了25磅
【在 w***i 的大作中提到】
: 周润发暴瘦20公斤更潇洒 20年后重当"赌神"
: http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
【在 w***i 的大作中提到】
: 周润发暴瘦20公斤更潇洒 20年后重当"赌神"
: http://video.sina.com.cn/p/ent/m/2013-12-11/185363244369.html
g*k
10 楼
我还在跟着孩子们看《鼹鼠的故事》呢。
A*s
11 楼
笔记本120G可以凑合
我个100G的用了有一阵子了 lol
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
我个100G的用了有一阵子了 lol
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
m*M
12 楼
Thank you, I am reading now.
【在 p****p 的大作中提到】
: 看neuroscience版的回复。
【在 p****p 的大作中提到】
: 看neuroscience版的回复。
b*a
13 楼
师妹真猛！
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
d*0
14 楼
拿现在的眼光就是魔幻现实主义题材的大片啊
【在 f****d 的大作中提到】
: 蹦来是要给小孩看的，结果可能还太小看不懂，我就自己又回味了一把童年的回忆
【在 f****d 的大作中提到】
: 蹦来是要给小孩看的，结果可能还太小看不懂，我就自己又回味了一把童年的回忆
A*s
15 楼
话说$1/G都还遥遥无期啊，$80/100G有点夸张了吧
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
H*s
16 楼
(1). Coat your 96 well plate with NeutrAvidin or streptavidin, 1ug/well,
100ul/well. Let sit O/N in the fridge or 1 hour in the 37 degree incubator.
(2). Biotinylate your whole cell protein using Pierce EZ-link biotinylation
kit.
(3). After coating the plate with NeutrAvidin or streptavidin, wash once
with 1XPBS (200ul/well). Block with blocking solution (1%BSA, 1% milk, 200ul
/well). Room temperature, 30 minutes to 1 hour. After blocking step, dump
all blocking solutions.
(4). Then add your biotinylated whole cell protein (100ul/well). Room
temperature, 30-minutes to 1 hour is good enough.
(5). Wash with 1XPBS (200ul/well) to remove unbound whole cell protein.
Proteins added to the wells subsequently will not be fixed to the wells, as
long as they are not biotinylated and they do not bind to any cellular protein.
【在 m****M 的大作中提到】
: 有谁知道什么试剂可以有效的把细胞裂解出的总蛋白固定到９６孔板（任何商业化的９
: ６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
: 试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
: 即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
100ul/well. Let sit O/N in the fridge or 1 hour in the 37 degree incubator.
(2). Biotinylate your whole cell protein using Pierce EZ-link biotinylation
kit.
(3). After coating the plate with NeutrAvidin or streptavidin, wash once
with 1XPBS (200ul/well). Block with blocking solution (1%BSA, 1% milk, 200ul
/well). Room temperature, 30 minutes to 1 hour. After blocking step, dump
all blocking solutions.
(4). Then add your biotinylated whole cell protein (100ul/well). Room
temperature, 30-minutes to 1 hour is good enough.
(5). Wash with 1XPBS (200ul/well) to remove unbound whole cell protein.
Proteins added to the wells subsequently will not be fixed to the wells, as
long as they are not biotinylated and they do not bind to any cellular protein.
【在 m****M 的大作中提到】
: 有谁知道什么试剂可以有效的把细胞裂解出的总蛋白固定到９６孔板（任何商业化的９
: ６孔板或其他任何孔的商业化的都可以）上吗？
: 试剂去除后固定作用也消失，这样后面加入的蛋白不会被固定。
: 即，只固定第一步的总蛋白。谢谢
h*U
17 楼
那风大的时候小心点，别出门
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
m*x
18 楼
邋遢大王很不错，当年是漫画书先出来开路赚名声，然后是暑期影院早上档学校组织小
学生们集体观看
学生们集体观看
c*m
19 楼
哈哈，猪老还在用XP,不支持Trim.不要指望了，他用SSD的日子肯定也是遥遥无期:D
【在 A*****s 的大作中提到】
: 话说$1/G都还遥遥无期啊，$80/100G有点夸张了吧
【在 A*****s 的大作中提到】
: 话说$1/G都还遥遥无期啊，$80/100G有点夸张了吧
h*U
20 楼
你很快抓重点么
【在 b***a 的大作中提到】
: 师妹真猛！
【在 b***a 的大作中提到】
: 师妹真猛！
o*d
21 楼
昨天看了樱桃小丸子，觉得蛮好看的，比喜洋洋好。决定和我孩子一起看。
A*s
22 楼
这轮ssd降价有啥预期么？3个月内能降到多少？
【在 c*m 的大作中提到】
: 哈哈，猪老还在用XP,不支持Trim.不要指望了，他用SSD的日子肯定也是遥遥无期:D
【在 c*m 的大作中提到】
: 哈哈，猪老还在用XP,不支持Trim.不要指望了，他用SSD的日子肯定也是遥遥无期:D
b*a
23 楼
还剩200多呢
【在 h***U 的大作中提到】
: 那风大的时候小心点，别出门
【在 h***U 的大作中提到】
: 那风大的时候小心点，别出门
O*o
24 楼
我当初很讨厌那个搔首弄姿唱主题歌的小姑娘。极大地影响了我欣赏这个剧。
前几年看见有人贴怀旧片，发现她还浓妆艳抹。还是很讨厌。
【在 f****d 的大作中提到】
: 蹦来是要给小孩看的，结果可能还太小看不懂，我就自己又回味了一把童年的回忆
前几年看见有人贴怀旧片，发现她还浓妆艳抹。还是很讨厌。
【在 f****d 的大作中提到】
: 蹦来是要给小孩看的，结果可能还太小看不懂，我就自己又回味了一把童年的回忆
c*m
25 楼
不要预期了，赶快上把，3个月撑死降个20来快，省一顿buffet就回来了。又不是省200
快。三个月每天就算省你开机1分钟，连爽三个月也值20快把。
【在 A*****s 的大作中提到】
: 这轮ssd降价有啥预期么？3个月内能降到多少？
快。三个月每天就算省你开机1分钟，连爽三个月也值20快把。
【在 A*****s 的大作中提到】
: 这轮ssd降价有啥预期么？3个月内能降到多少？
r*r
26 楼
他是羡慕季度很
【在 h***U 的大作中提到】
: 你很快抓重点么
【在 h***U 的大作中提到】
: 你很快抓重点么
A*s
27 楼
唉。。。纠结啊 lol
200
【在 c*m 的大作中提到】
: 不要预期了，赶快上把，3个月撑死降个20来快，省一顿buffet就回来了。又不是省200
: 快。三个月每天就算省你开机1分钟，连爽三个月也值20快把。
200
【在 c*m 的大作中提到】
: 不要预期了，赶快上把，3个月撑死降个20来快，省一顿buffet就回来了。又不是省200
: 快。三个月每天就算省你开机1分钟，连爽三个月也值20快把。
h*U
28 楼
基础打的这么好
【在 b*a 的大作中提到】
: 还剩200多呢
【在 b*a 的大作中提到】
: 还剩200多呢
p*t
29 楼
非也非也
我不是因为用XP而不用SSD，而是因为不用SSD所以没有升级win7的动力
【在 c*m 的大作中提到】
: 哈哈，猪老还在用XP,不支持Trim.不要指望了，他用SSD的日子肯定也是遥遥无期:D
我不是因为用XP而不用SSD，而是因为不用SSD所以没有升级win7的动力
【在 c*m 的大作中提到】
: 哈哈，猪老还在用XP,不支持Trim.不要指望了，他用SSD的日子肯定也是遥遥无期:D
h*U
30 楼
还是你懂他
【在 r*******r 的大作中提到】
: 他是羡慕季度很
【在 r*******r 的大作中提到】
: 他是羡慕季度很
x*s
31 楼
2年之后吧，～
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
【在 p****t 的大作中提到】
: 还是贵啊
: desktop用120G还行，笔记本只能装一个，还是至少要有250G才好
: 我等100G降到$80，250G降到$120
b*a
32 楼
你学着点
【在 h***U 的大作中提到】
: 你很快抓重点么
【在 h***U 的大作中提到】
: 你很快抓重点么
a*n
33 楼
上吧
犹豫了这么久，死的脑细胞也值不少钱啊
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
犹豫了这么久，死的脑细胞也值不少钱啊
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r*r
34 楼
瓜瓜减肥有师妹帮忙，小姨减肥只能减少跑面数量
【在 h***U 的大作中提到】
: 还是你懂他
【在 h***U 的大作中提到】
: 还是你懂他
T*0
35 楼
★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
b*a
36 楼
再多找几个师妹
【在 b*a 的大作中提到】
: 还剩200多呢
【在 b*a 的大作中提到】
: 还剩200多呢
T*0
37 楼
145去年黑色星期五
★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
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h*U
38 楼
太三俗，不学
【在 b***a 的大作中提到】
: 你学着点
【在 b***a 的大作中提到】
: 你学着点
A*s
39 楼
当时傻乐吧唧的在等ocz这个该死的vertex2啊
【在 T***0 的大作中提到】
: 145去年黑色星期五
: ★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
【在 T***0 的大作中提到】
: 145去年黑色星期五
: ★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
h*U
40 楼
人比人，起死人
【在 r*******r 的大作中提到】
: 瓜瓜减肥有师妹帮忙，小姨减肥只能减少跑面数量
【在 r*******r 的大作中提到】
: 瓜瓜减肥有师妹帮忙，小姨减肥只能减少跑面数量
c*r
41 楼
赞呀，想给mbp加一个了。。
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
【在 A*****s 的大作中提到】
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w*i
42 楼
国内的妹子吃人不吐骨头啊
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
【在 b*a 的大作中提到】
: 我这半年少了25磅
u*s
43 楼
intel 的rebate 还挺快的
【在 T***0 的大作中提到】
: 145去年黑色星期五
: ★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
【在 T***0 的大作中提到】
: 145去年黑色星期五
: ★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 6.0 - iPhone Lite
b*a
44 楼
过节还是要给我加餐的吧
【在 h***U 的大作中提到】
: 人比人，起死人
【在 h***U 的大作中提到】
: 人比人，起死人
n*2
45 楼
我还是等 快到$150再下手吧。
这个不算deal吧，前几天20% off的时候也才$180+，那个还不用rebate。
这个不算deal吧，前几天20% off的时候也才$180+，那个还不用rebate。
r*r
46 楼
给小姨过节发只小母猴子？哈哈
【在 h***U 的大作中提到】
: 人比人，起死人
【在 h***U 的大作中提到】
: 人比人，起死人
A*s
47 楼
我就是让ld怂恿着跳了
【在 n*****2 的大作中提到】
: 我还是等 快到$150再下手吧。
: 这个不算deal吧，前几天20% off的时候也才$180+，那个还不用rebate。
【在 n*****2 的大作中提到】
: 我还是等 快到$150再下手吧。
: 这个不算deal吧，前几天20% off的时候也才$180+，那个还不用rebate。
r*r
48 楼
瓜瓜没骨头了？
【在 w***i 的大作中提到】
: 国内的妹子吃人不吐骨头啊
【在 w***i 的大作中提到】
: 国内的妹子吃人不吐骨头啊
G*Y
49 楼
死撑，
没有160G怎么跳。
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
没有160G怎么跳。
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
h*U
50 楼
看心情
【
在 bagua (bagua) 的大作中提到: 】
【
在 bagua (bagua) 的大作中提到: 】
A*s
51 楼
expired
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
【在 A*****s 的大作中提到】
: http://www.newegg.com/Product/Product.aspx?Item=N82E16820167035
r*r
52 楼
日子苦不能怨政府
【在 h***U 的大作中提到】
: 看心情
: 【
: 在 bagua (bagua) 的大作中提到: 】
【在 h***U 的大作中提到】
: 看心情
: 【
: 在 bagua (bagua) 的大作中提到: 】
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